prospectivo de casos y controles
Resumen Antecedentes
estudios transversales previos han sugerido que el tipo de parto puede influir en la composición de la microflora oral. El objetivo de este estudio prospectivo fue comparar la colonización salival en niños por vía vaginal con niños entregados por cesárea (cesárea) durante sus primeros 6 meses de vida.
Métodos Francia El grupo de estudio consistió de 149 inscritos de forma consecutiva bebés, entregados por vía vaginal (n = 96
) o por cesárea (n = 53
) que se ofreció después del consentimiento de los padres. Las muestras de saliva se recogieron dentro de 2 días después del nacimiento y luego, después de 1, 3 y 6 meses. Se obtuvo una muestra de saliva de las madres 6 meses después del parto. Se pidió a los padres que completen un cuestionario sobre factores socioeconómicos, estilo de vida e higiene al inicio del estudio y durante todo el período de estudio. Todas las muestras se analizaron con 13 sondas bacterianas predeterminados utilizando la hibridación ADN-ADN de tablero de ajedrez.
Resultados
Los grupos estaban equilibrados al inicio del estudio en relación con todos los factores de antecedentes pertinentes. Gram-positivas (Streptococcus mitis, S. salivarius
) muestra los conteos más altos en ambos grupos, pero se observó una mayor diversidad en el grupo vía vaginal. A. naeslundi, A. odontolytics, F. nucleatum
y L. salivarius
solamente fueron detectados entre los recién nacidos por vía vaginal. La prevalencia de S. sanguinis, S. gordoni, R. denticariosa, y B. dentinum
aumenta con la edad en ambos grupos pero la prevalencia fue significativamente menor en el grupo de la sección C (p
& lt; 0,05). Había un vínculo entre las madres y sus crías y que afectan el perfil microbiano salival.
Conclusión México La composición microbiana en la saliva se diferencia por el tipo de parto durante los primeros seis meses de vida.
Palabras clave
C -Sección bacterias orales bebés oral colonización saliva Antecedentes Francia El biofilm oral, juega un papel importante en la salud y la enfermedad [1]. La composición es muy individual y están afectadas por factores como la genética, la dieta, la edad y el nivel de higiene [2]. De acuerdo con la hipótesis de la higiene, la secuencia y el momento de la exposición a una variedad de cepas bacterianas tempranas en la vida parecen ser de importancia para la colonización de los intestinos [3]. El tipo de parto y el cese de la lactancia materna han sido identificados como factores importantes en la maduración de la microbiota intestinal [4], y esto parece aplicable también a la cavidad oral. Investigaciones anteriores han indicado que los niños entregados por cesárea (cesárea) exhiben una diversidad microbiana reducida en la saliva, en comparación con los niños por vía vaginal [5, 6]. Por otra parte, el perfil microbiano oral puede discriminar amamantados de bebés alimentados con fórmula [7]. El largo plazo importancia clínica de estos hallazgos no está del todo clara, pero una reducción de la diversidad en las tripas se correlaciona con un mayor riesgo de desarrollar enfermedades crónicas como el asma y la alergia [8]. La información de la diversidad inferiores en recién nacidos de sección en C es sin embargo deriva principalmente de estudios transversales y están disponibles pocos datos longitudinales. El objetivo del presente estudio fue analizar muestras de saliva de los niños nacidos con cesárea a través de sus primeros seis meses de vida con respecto a las bacterias clave seleccionados. Los resultados se compararon con un grupo de niños por vía vaginal y la hipótesis nula fue que se muestran diferencias entre los grupos.
Métodos Diseño del estudio
La investigación empleó un diseño de casos y controles prospectivo y fue éticamente . aprobado por el Comité regional de Ética en Lund, Suecia (DNR 2012/483) que tiene la autoridad de aprobar los estudios en el hospital Halland
grupo Estudio Francia el material consistió en 149 recién nacidos por vía vaginal entregado (V; n
= 96) o por cesárea (CS; n
= 53). Los participantes se inscribieron consecutivamente entre los voluntarios sanos que nacieron en el Hospital Halland, Halmstad, Suecia, entre abril y diciembre de 2013. Ambos padres firmaron un formulario de consentimiento después de que la información verbal y escrita a fondo. Los criterios de exclusión fueron i) los niños prematuros, ii) recién nacidos que necesitan atención neonatal, iii) los lactantes con una condición médica no está claro, y iv) las familias que planificaron la reubicación en el extranjero después de su nacimiento. La tasa de desgaste de 6 meses fue del 20% y los abandonos con respecto a los seguimientos designados se muestran en la Tabla 1 1.Table participantes y la frecuencia de abandono en los dos grupos (CS = C-sección; V = vaginal entrega)
Edad
CS
V
total
tasa de abandono
recién nacido (1-2 días )
53
95
148
-
1 mes
45
79
124
16%
3 meses
44
74
118
20%
página 6 meses
44
73
117
20%
los valores en el número denotan mesa de los niños
toma de muestras de saliva
las muestras de saliva se recogieron dentro de 2 días después del nacimiento y después de 1, 3 y 6 meses con la ayuda de los bastoncillos de algodón estériles. En la primera ocasión, los padres fueron instruidos cuidadosamente y muestran cómo recoger la muestra y la transferencia de la parte superior de un tubo de plástico marcada. En los seguimientos designados, los padres recibieron el kit de prueba con un estéril que contiene un bastoncillo de algodón y un tubo de plástico con una hoja de información se ilustra a través de correo ordinario. Se pidió a los padres para recoger la muestra de la mañana remojando el bastoncillo de algodón en la saliva e inmediatamente volver al laboratorio. Cuando una muestra faltaba, los padres se les recordó a través de una llamada telefónica dentro de los 5 días. De manera similar, se obtuvo una muestra de saliva de las madres 6 meses después del parto. Todas las muestras se almacenaron congeladas hasta el análisis adicionales.
Método microbiana
Las muestras se procesaron con la tecnología de hibridación ADN-ADN de tablero de ajedrez de acuerdo a Wall-Manning et al. [9]. Se extrajo el ADN con mutanolisina y lisozima como se describe anteriormente [10] y se evaluó la calidad del ADN a partir del espectro UV entre 200 y 300 nm usando un espectrofotómetro de Gene Quant (Pharmacia Biotech, Uppsala, Suecia). Las sondas de ADN genómico enteros de interés potencial para la salud oral y la enfermedad se preparan a partir de un panel de 13 especies bacterianas con designación de la cepa según la colección de cultivos de Microbiología Oral, Gotemburgo, Suecia: Actinomyces Odontolyticus
G67; Actinomyces Naeslundii
2466 (A. oris
); Bifidobacterium dentium
G174; Fusobacterium nucleatum
2865; Lactobacillus casei
3184; Lactobacillus salivarius
3830; Rothia denticariosa
1956; Streptococcus gordonii
2471; Streptococcus mitis
1770; Streptococcus mutans
2482; Streptococcus salivarius
2473; Streptococcus sanguinis
2478; Veillonella parvula
G186. Los recuentos de bacterias se obtuvieron por el porcentaje-método en el que se expresó la intensidad de los (unidades de luz biomédica) de señal como una fracción de una muestra estándar de alta (10
6 células) con ayuda de LumiImager Workstation (Boehringer Mannheim, Mannheim , Alemania). El nivel de detección era & gt; 10. 4 células por ml de muestra
Cuestionario
Para la inclusión, se pidió a los padres que completen un cuestionario de 20 preguntas sobre las características de la familia, socio-economía, factores de estilo de vida y hábitos de higiene. Un segundo cuestionario sobre la cría, alimentación, hábitos de cepillado dental y antibióticos prescritos estaba unido a los envíos de seguimiento y regresó junto con las muestras.
Métodos estadísticos
Todos los datos fueron procesados con el software IBM SPSS (versión 22.0 ; Chicago IL, EE.UU.). Las diferencias en las distribuciones porcentuales entre los grupos se calcularon con las pruebas de chi-cuadrado y las correlaciones entre los recuentos bacterianos en las madres y sus crías se expresaron como del coeficiente de correlación de Spearman. Se consideraron los p-valores
inferior a 0,05 como estadísticamente significativo.
Resultados
Los grupos estaban equilibrados al inicio del estudio en relación con todos los factores de antecedentes pertinentes, a excepción de la rotura del agua (para mayor información, véase la Tabla 2). La proporción de niñas fue algo mayor en el grupo de disparo, pero la diferencia no fue estadísticamente significativa. Las rutinas de alimentación en la percepción subjetiva y el uso de chupetes se muestran en la Tabla 3. Los preparados para lactantes fueron más frecuentes en el grupo CS en comparación con el grupo V durante los primeros 6 meses, pero la diferencia no alcanzó significación estadística. La frecuencia de los antibióticos prescritos a las madres durante los primeros seis meses después del parto fue similar (& lt; 15%) en ambos grupos. El número total de células detectadas a partir de las muestras V fue en promedio superiores a las muestras CS en absoluto muestreo ocasiones: al nacer: 0,7 vs. 0,5x10 6; 1 mes: 1,3 vs. 0.9x10 6; 3 meses: 1,6 frente a 0.9x10 6; 6 meses: 1,5 vs 0.9x10 6 células. La prevalencia de las bacterias seleccionadas se resume en la Tabla 4. Se observó una mayor diversidad en el grupo V. Por ejemplo, A. naeslundi
, A. odontolytics
, F. nucleatum
y L. salivarius
solamente fueron detectados entre los recién nacidos por vía vaginal. La prevalencia de S. sanguinis
, S. gordoni
, R. denticariosa
y B. dentinum
aumentó con la edad en ambos grupos, pero la prevalencia fue significativamente menor en el grupo CS (p
& lt; 0,05). S. mitis salivarius
y S.
muestran los conteos más altos en ambos grupos en todos los muestreos, pero los recuentos no se asociaron con el tipo de parto. Hubo una correlación estadísticamente significativa entre las madres y sus crías y que afectan el perfil salival seis meses después de la entrega con respecto a cinco cepas en el grupo de disparo y ocho cepas en el grupo V (Tabla 5) .table 2 características de la familia de línea de base en los dos grupos (CS = C-sección; V = parto vaginal)
variable
CS
V
Sexuales (niñas /niños)
57/43 44/56
descanso de agua (sí)
29
100a
Madre nacida en Suecia (sí)
91
91
la educación de la madre, la universidad (sí)
64
60
Madre fumar (sí)
0
4
antibióticos prescritos (madre) guía empresas 4
4
Hermanos (& gt; 2)
6
6
valores de la tabla denotar ciento
diferencia astatistically significativa entre los grupos (p Restaurant & lt.; 0,05, prueba de chi-cuadrado) sobre Table 3 de datos auto-reportados de los cuestionarios distribuidos 1, 3 y 6 meses después del parto vaginal (V) o cesárea (CS)
variable
1
mes 3 meses 6 meses
CS /V
CS /V
CS /V
La lactancia materna (sí)
89/95 71/84
55/69
La fórmula infantil (sí)
47/32 51/35
50/44
Introducido comida-degustación (sí)
0/0 0/4
72/83
chupete (sí)
80/83
82/77 85/71
dientes presentes (sí)
0/0 2/0
30/32
limpieza oral (sí)
0/0 9/3
30/26
antibióticos (sí, bebé)
0/3 0/1
0/1
antibióticos ( Sí, las madres)
9/5 5/4
0/3
valores de la tabla denotan por ciento sobre Table 4 Prevalencia (≥104 células) de las cepas seleccionadas en el nacimiento y los intervalos de tiempo designados en los niños por parto vaginal (V) o con cesárea (CS)
Strain
nacimiento
1
mes 3 meses 6 meses
CS /V
CS /V
CS /V
CS /V
A. naeslundi
0/5 0/0
0/2
0/2
A. Odontolyticus
0 /12a
0 /32a
0 /30a
0 /32a
B. dentinum
5 /32a
13 /61a
8 /49a
16 /63a
F. nucleatum
0/2
0/11
0 /10
0 /14a
L. casei
0/2 0/0
0 /0
0/0
L. salivarius
0/0 0/0
0/0 0/3
R. denticariosa
0 /12a
3 /22a
10/21
8 /39a
S. gordoni
3 /15a
10/19
13 /32a
13 /38a
S. mitis
73/84 85/94
90/94 93/96
S. mutans
53 /76a
65 /88a
58 /88a
68 /92a
S. salivarius
28/36
45 /67a
53/71 48/70
S. sanguinis
0 /35a
5 /44a
10 /47a
13 /53a
V. parvula
0/0
3 /6
5/6
8/24
valores de la tabla denotan ciento
diferencia astatistically significativa entre los grupos (p Restaurant & lt; 0,05, prueba de chi-cuadrado) sobre Table 5 colonización oral de bacterias seleccionadas en las madres y sus bebés, 6 meses después del parto vaginal (V) o cesárea (CS)
Strain
CS
V
A. naeslundi
NS NS
A. Odontolyticus
NS
0,43
B. dentinum
0,54
0,28
F. nucleatum
NS NS
L. casei
NS
NS
L. denticariosa
NS
0,45
L. salivarius
NS NS
S. gordonii
0,48
0,36
S. mitis
0,59
0,32
S. mutans
0,85
0,36
S. salivarius
0,71
0,48
S. sanguinis
NS
0,56
V. parvula
NS NS
Los valores de la tabla denotan dos Spearman coeficiente de correlación de cola. NS
No estadísticamente significativa
Discusión
Los resultados de este estudio relativamente grande se prestan más apoyo a los hallazgos previos de que la composición del biofilm oral se ve afectado por el tipo de parto [5, 6, 11] con una menor diversidad entre los bebés nacidos con cesárea. Por lo tanto, la hipótesis nula puede ser rechazada. Nuestros resultados, sin embargo deben ser consideradas con precaución para un número de razones. En primer lugar, la composición de la microbiota salival temprana puede estar influida por una serie de factores que no sean el tipo de parto, como el tratamiento peri-parto con antibióticos, la dieta [12], las prácticas de alimentación [7, 13], el uso de chupetes [14], los ingresos familiares [11, 13], y el cepillado de dientes hábitos [15]. En nuestro estudio, el CS y los grupos por vía vaginal fueron similares con respecto a la socio-economía, tamaño de la familia, nivel de educación de la madre, y el comportamiento de alimentación por lo que consideramos que el riesgo de confusión tan pequeños. Incluso la prescripción de antibióticos a las madres y sus plantas fuera de los muelles era igual de acuerdo a los cuestionarios, aunque un cierto subregistro puede sospechar. En segundo lugar, la técnica de hibridación ADN-ADN de tablero de ajedrez tiene sus ventajas y limitaciones; La principal ventaja es que el método permite la enumeración de un gran número de especies en gran número de muestras y por lo tanto, considerarse como una herramienta útil para la enumeración de las especies bacterianas en sistemas microbianos complejas [16]. Entre las limitaciones, las posibles reacciones cruzadas y variando la reproducibilidad de diferentes cepas se ha discutido [17]. En tercer lugar, es posible que el procedimiento de toma de muestras puede haber causado una mayor variabilidad de los resultados que el procedimiento de laboratorio como tal. Estas deficiencias, junto con el nivel de detección relativamente alta nos hizo para cuantificar los datos bacterianas de acuerdo con el método por ciento como la alternativa más fiable [17]. Sin embargo, es importante subrayar que los valores de prevalencia aquí se basan en un nivel de umbral de 4 células de aproximadamente 10; las cepas seleccionadas podría muy bien estar presentes en las muestras, pero no en cantidades suficientes para ser detectados. Por lo tanto, el siguiente paso natural sería, pues, para extender el mapeo para incluir todo el microbioma oral. Un cuarto sesgo posible era la relativamente alta tasa de abandono durante el curso del estudio, y sólo podemos especular sobre su posible influencia en los resultados.
La correlación de la microflora oral intrafamiliar, con especial referencia a la madre y el niño y adquisición estreptococos mutans se ha descrito varias veces antes de [18-21]. Curiosamente, Ruiz-Rodríguez y compañeros de trabajo [22] no pudieron demostrar una relación madre-hijo para S. mutans
con el cultivo convencional, pero su muestra era pequeña y S. mutans
fue muy rara vez se detecta (2%) entre los recién nacidos a la edad de 150 días. En el presente estudio, la mayoría de todos los niños en el grupo de disparo y casi todos en el grupo V albergaba S. mutans
a los 6 meses de edad y aparte de las diferentes técnicas de muestreo y de análisis, no tenemos ninguna explicación para estos contraste recomendaciones. Sin embargo, la correlación entre madre e hijo clara para 8 de los 13 manchas en el grupo V fue interesante, pero necesita ser investigado más a fondo, por ejemplo con 16 s de amplificación y secuenciación del rDNA.
La pregunta por cuánto tiempo una diferencia de entrega dependiente de la la colonización oral, prevalece, y si esto puede afectar a la salud dental más tarde en la vida, permanece abierta. Sin embargo, existe evidencia justo que una adquisición temprana de estreptococos mutans oral en general, se asocia con un mayor riesgo para el desarrollo de la caries [23, 24]. Además, hay informes que sugieren que los niños entregados con cesárea tienen un riesgo elevado de asma infantil [25] y la caries dental más a la edad de 3-5 años [26, 27]. Esta posible relación obstante, se ha verificado en los entornos más grandes y en estudios prospectivos que cubre el joven dentición permanente.
Conclusiones
Dentro de las limitaciones del presente estudio, se concluyó que el tipo de parto juega un papel en la composición de el biofilm oral, durante los primeros 6 meses de vida. los niños por vía vaginal parecen tener una diversidad mayor que los niños de cesáreas y una similitud más estrecha con sus madres. Más estudios para investigar una posible influencia a largo plazo sobre la salud oral parece justificado
Abreviatura
CS:.
Cesárea
Declaraciones
Agradecimientos
el proyecto fue apoyado por una beca de la Región Halland, Suecia. Los autores desean agradecer al personal de la clínica materna en el Hospital Halland y todos los padres por su confianza y paciencia. La difunta señora Kerstin Magnusson (RDH) es reconocido por su asistencia técnica especializada logo articles abierto AccessThis se distribuye bajo los términos de la licencia Creative Commons Reconocimiento 4.0 Licencia Internacional (http:.. //Creativecommons org /licencias /por /4. 0 /), que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que se dé el crédito correspondiente al autor (s) original y la fuente, proporcionar un enlace a la licencia Creative Commons, e indicar si se han realizado cambios. La renuncia Creative Commons Public Domain Dedication (http:. //Creativecommons org /publicdomain /cero /1 0 /) se aplica a los datos facilitados en este artículo, a menos que se indique lo contrario
de la competencia.
intereses los autores no tienen ningún conflicto de intereses que declarar las contribuciones de los autores
KB:. recogido todos los datos, realiza análisis estadísticos y escribió el primer borrador. JR: diseñó el estudio, y finalizó el manuscrito. GD: realizado los análisis microbianos y escribió el manuscrito. JD: diseñado y supervisado el estudio y finalizado el manuscrito. ST: diseñó el estudio, realizado los análisis estadísticos y escribió el primer borrador. Todos los autores han leído y aprobado el manuscrito final.
