sección transversal
Resumen Antecedentes
Los cambios patológicos en los tejidos periodontales están mediadas por la interacción entre los microorganismos y el anfitrión respuesta inmune inflamatoria. La hiperglucemia puede interferir con este proceso. El objetivo de este estudio fue comparar los niveles de 27 moléculas inflamatorias en el fluido crevicular gingival (GCF) de los pacientes con diabetes tipo 2, con y sin periodontitis crónica, y de sujetos con periodontitis crónica que no tienen diabetes. Una correlación supuesta entre la hemoglobina glucosilada (HbA1c) y los niveles de las moléculas inflamatorias también fue investigado
Métodos
La población de estudio comprendió un total de 108 individuos, estratificados en:. 54 con diabetes tipo 2 y la periodontitis crónica (DM + CP), 30 con periodontitis crónica (CP) y 24 con diabetes tipo 2 (DM). Los participantes fueron entrevistados con la ayuda de un cuestionario estructurado. Se registraron los parámetros periodontales (placa dental, sangrado al sondaje y la profundidad de la bolsa periodontal). Los niveles del GCF de las 27 moléculas inflamatorias se midieron utilizando múltiplex inmunoensayo de microperlas. Se realizó una prueba de hemoglobina glucosilada (HbA1c) para los pacientes con diabetes mediante cromatografía de afinidad boronato.
Resultados
Después del ajuste para posibles factores de confusión, el grupo DM + CP tenían niveles más altos de IL-8 y MIP-1β, y menor los niveles de TNF-α, IL-4, INF-γ, RANTES e IL-7 en comparación con el grupo CP. Por otra parte, el grupo DM + CP tenían niveles más bajos de IL-6, IL-7 y G-CSF en comparación con el grupo DM. El grupo DM tenían niveles más altos de IL-10, VEGF, y G-CSF en comparación con el grupo CP. Los niveles de MIP-1α y FGF fueron menores en los pacientes con diabetes (independientemente de su estado periodontal) que en los sujetos con periodontitis crónica sin diabetes. Pacientes con diabetes (DM + CP y DM) tenían una mayor relación de Th-2 /Th-1 en comparación con el grupo de CP. HbA1c correlacionó positivamente con las citoquinas pro-inflamatorias (coeficiente de correlación de Pearson = 0,27, P Valor: 0,02)
Conclusión
la diabetes tipo 2 y la periodontitis crónica puede influir en los niveles de moléculas inflamatorias del GCF sinérgicamente, así como de forma independiente.. La diabetes tipo 2 se asocia con una alta Th-2 relación /Th-1, y se modula la expresión local de moléculas que participan en los procesos anti-inflamatorios y la curación.
Palabras clave
Diabetes mellitus periodontitis crónica inflamación gingival citoquinas fluido crevicular Antecedentes
Diabetes mellitus representa un grupo heterogéneo de trastornos metabólicos en los que los niveles elevados de glucosa en sangre como resultado perturbaciones de carbohidratos, grasas y proteínas [1]. La forma más común es la diabetes tipo 2 [2]. La diabetes es un importante problema de salud pública con 380 millones de personas que sufren de la enfermedad en todo el mundo, y alrededor del 80% de los pacientes son de países de ingresos bajos y medianos [3]. Se espera que África va a tomar la iniciativa en términos de la mayor aumento proporcional de los adultos con diabetes en 2030 [4]. La prevalencia de la diabetes en el Sudán, como en muchos otros países de bajos ingresos, está aumentando en proporciones epidémicas [5]. En 2014, la prevalencia de la enfermedad en el Sudán era alrededor del 18% [3], que ocupa el Sudán entre los países con alta prevalencia de la diabetes en África y en el mundo. También refleja el cambio en el estilo de vida y el movimiento de la urbanización de la población.
Hiperglucemia crónica se asocia con complicaciones irreversibles tales como nefropatía, retinopatía, neuropatía, enfermedades cardiovasculares, enfermedades vasculares periféricas, retraso en la cicatrización y enfermedades periodontales [6]. Las enfermedades periodontales, incluida la forma reversible (gingivitis), son muy frecuentes y afectan hasta 90% de los adultos en todo el mundo [7]. periodontitis crónica se caracteriza por la migración apical de la adherencia epitelial acompañado por pérdida de tejido conectivo y el hueso alveolar [8]. Estos cambios están mediados por la interacción entre los patógenos y la respuesta inmune inflamatoria del huésped [9]. Aunque los patógenos periodontales son considerados como el factor de iniciativa de la enfermedad, [10] la destrucción de tejidos en la periodontitis crónica es la consecuencia de la respuesta del huésped a los patógenos [11].
El mecanismo exacto por el que la diabetes afecta a los tejidos periodontales no está totalmente dilucidado [12]. Una respuesta inmune inflamatoria alterada respecto a patógenos bacterianos ha sugerido [11]. La hiperglucemia puede afectar a los tejidos periodontales mediante el aumento de estrés oxidativo como resultado del desequilibrio entre las especies reactivas del oxígeno y antioxidantes, que eventualmente puede conducir a la acumulación de productos finales de glicación avanzada (AGE) [13]. La unión de AGE a sus receptores (RAGE) desencadena eventos intracelulares que mejoran la producción de citoquinas pro-inflamatorias, quimiocinas y moléculas de adhesión celular [14]. La hiperglucemia se puede evaluar mediante la medición de la concentración de hemoglobina glucosilada (HbA1c), que refleja los niveles medios de glucosa más de las 8-12 semanas anteriores [15].
Un medio de la investigación de la condición inflamatoria local de la cavidad oral es mediante el análisis de fluido gingival (GCF), un enfoque no invasivo para evaluar la presencia o ausencia de diversas moléculas inflamatorias [16]. GCF es un trasudado o un exudado inflamatorio que puede ser recogida desde el surco gingival que rodea los dientes. Contiene componentes de la sangre que circula, tejidos locales y lo más importante, las moléculas inflamatorias derivadas del huésped [16, 17].
La mayoría de los estudios de moléculas inflamatorias del GCF en individuos con diabetes han sido generalmente a base de pequeñas muestras de los sujetos y de investigación un número limitado de moléculas inflamatorias, con resultados no concluyentes [12]. análisis Multiplex de moléculas inflamatorias, por el que un gran número de moléculas inflamatorias se puede investigar al mismo tiempo, sería facilitar la comprensión del proceso inflamatorio implicado en la diabetes y las enfermedades periodontales.
El objetivo de este estudio fue investigar el efecto de diabetes tipo 2 en la expresión local de moléculas inflamatorias implicadas en la inflamación periodontal y la curación mediante la comparación de los niveles de MCD de 27 moléculas inflamatorias en pacientes con diabetes tipo 2, con y sin periodontitis crónica, y en sujetos con periodontitis crónica sin diabetes. Una correlación supuesta entre la HbA1c y las moléculas que se investigan también fue explorado. Pusimos a prueba la hipótesis de que la diabetes tipo 2 influye negativamente en la expresión local de las moléculas inflamatorias bajo investigación.
Métodos
Diseño del estudio y participantes
En total, 108 personas se inscribieron en el estudio, lo que representa un subconjunto seleccionado al azar de 461 participantes reclutados para un estudio previo realizado por Mohamed et al. [18]. Los sujetos fueron estratificados en tres grupos: 54 con diabetes tipo 2 y la periodontitis crónica (DM + CP), 30 con periodontitis crónica (CP) y 24 con diabetes tipo 2 (DM). Los participantes en el estudio tenían entre 24-70 años. Pacientes con diabetes fueron reclutados en el Centro de Diabetes Jaber Abol'ez en Jartum y Sudán. La diabetes fue diagnosticada por un médico especialista en el centro de acuerdo con los criterios de la American Diabetes Association [19]. muestras de sangre entera obtenidas de pacientes con diabetes se analizaron para HbA1c por boronato cromatografía de afinidad utilizando un kit disponible comercialmente (LabonaCheck
™ analizador A1c) [20]. El grupo CP fue reclutado de la clínica dental de pacientes externos en el Hospital Dental Jartum Enseñanza. El reclutamiento de los participantes del estudio y los criterios de elegibilidad para la inscripción se han descrito anteriormente [18]. En pocas palabras, los criterios para la inscripción fueron (i), de ser diagnosticado con diabetes tipo 2 durante más de un año y asistir a una clínica especializada diabetes -para pacientes con diabetes- (ii), que tiene por lo menos 10 dientes restantes (iii), ningún antibiótico, no existe ningún medicamento antiinflamatorio esteroideo y /o no esteroideo utilizado durante las últimas 3 semanas (IV), no se trata con quimioterapia inmunosupresora, ninguna enfermedad aguda actual, ningún tratamiento periodontal profesional recibida durante los últimos 6 meses y ningún embarazo en curso o la lactancia. Los datos demográficos se obtuvieron de los participantes en el estudio por medio de un cuestionario estructurado. Francia El protocolo de estudio fue aprobado por el Ministerio de Salud de Sudán y el Comité de Ética de Investigación de Noruega en la Universidad de Bergen (2012/1470 /Chaleco REK) . Los participantes en el estudio se inscribieron entre julio y diciembre de 2012. escrito el consentimiento informado se obtuvo de cada participante después de que los objetivos del proyecto, se han explicado los pasos en el examen clínico bucal y los procedimientos de muestreo. Los participantes fueron informados de su diagnóstico dental y referidos para tratamiento dental apropiada si está indicado.
Examen periodontal Clínico
Todas las evaluaciones clínicas, las asignaciones de grupo y selección de muestreo in situ fueron llevadas a cabo por un solo examinador, calibrado (HGM). El examen periodontal incluye todos los dientes excepto los 3 er molares utilizando una sonda periodontal un código de colores (N22, 2-4-6-8-10-12 marcas mm), una sonda de furca Nabors un código de colores (NAB2, 3 -6-9-12 marcas mm), curetas, espejo, sonda, pinzas y rollos de algodón. El examen clínico comprendía la evaluación de la placa dental mediante el índice de Silnness y Loe [21], sangrado al sondaje (BOP), anotó como presente o ausente, y la profundidad de sondaje (medida desde el margen gingival hasta la base de la bolsa periodontal en milímetros) a cuatro sitios en cada diente (mesial, distal, bucal y lingual). Los participantes fueron diagnosticados de periodontitis crónica si tenían al menos dos sitios con bolsillos sangrantes de ≥ 4 mm (no en el mismo diente) [22, 23]. El examen oral se repitió para 20 participantes seleccionados al azar dentro de 2 semanas. fiabilidad intra-examinador se evaluó mediante el coeficiente kappa de Cohen [24]. valor kappa (κ) fue de 0,88 para la periodontitis crónica (sí /no).
muestreo GCF GCF
muestras fueron recolectadas utilizando tiras de papel, perio-(PERIOPAPER® gingivales Tiras de recogida de fluidos, Oraflow Inc., Nueva York, EE.UU. ). Cuatro muestras, cada una representando un cuadrante, se recogieron de cada participante. La tira se inserta en el sitio mesiobucal del surco /bolsillo de la 1 st molar. Si falta, el 2 nd molar, 2 nd premolares o 1 Se tomaron muestras st premolar, respectivamente. Cuadrantes sin dientes posteriores fueron excluidos de la toma de muestras. Después de que el biofilm supragingival había sido eliminado con torundas de algodón estériles, los sitios se secaron y se aislaron con rollos de algodón. Las tiras de papel se insertaron 2 mm en el surco /bolsillo y dejar en su lugar durante 30 s. Las tiras que se evaluaron visualmente como contaminados con sangre o saliva fueron descartados. Las tiras 4 se combinaron inmediatamente en un tubo, etiquetados y almacenados en nitrógeno líquido para su posterior análisis. Se añadió la extracción y cuantificación de proteínas
Para la extracción de proteínas, tampón Tween (230 l) a cada uno de los tubos que contienen la 4 tiras. Los tubos se agitaron durante 30 min y después se centrifugaron durante 10 min a 4 ° C y 1400 rpm. La proteína extraída se cuantificó usando un kit disponible en el mercado y siguiendo las instrucciones del fabricante (Pierce ™ BCA Protein Assay Kit, Thermo Scientific, Rockford, EE.UU.). Se midió la absorbancia a 560 nm en un lector de placas (FLUOstar OPTIMA- BMG Labtech, Alemania). La proteína total por muestra (4 tiras) se calculó en microgramos (mg). Análisis FODA y agrupación de moléculas inflamatorias
Después de la extracción de proteínas, muestras de GCF (20 l cada uno) fueron procesados por inmunoensayo multiplexado que contiene microesferas fluorescentes conjugados con teñidos anticuerpo monoclonal específico para 27 moléculas inflamatorias (Bio-Plex ensayo humano de citocinas; Bio-Rad Inc., Hercules, CA, EE.UU.) [25]. Se investigaron las siguientes moléculas: IL-1β, IL-1ra, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, eotaxina, factor de crecimiento de fibroblastos básico gratis (FGF), factor estimulante de colonias de granulocitos gratis (G-CSF), granulocitos y factor estimulante de colonias de monocitos gratis (GM- CSF), interferón-γ gratis (INF-γ), interferón-inducible proteína 10 gratis (IP-10), de monocitos quimio-atractiva de la proteína-1 gratis (MCP-1), proteína inflamatoria de macrófagos-1α gratis (MIP-1α), proteína inflamatoria de macrófagos-1β gratis (MIP-1β), derivado de plaquetas factor de crecimiento gratis (PDGF), regulado a la activación, normalmente T-expresados, y presumiblemente secretada
(RANTES), factor de necrosis tumoral-α
(TNF-α) y del factor de crecimiento endotelial vascular
(VEGF). Las muestras se diluyeron 1: 4 (50 l en total) y se incubaron con perlas acopladas. Los complejos se lavaron, se incubaron con anticuerpo de detección y, posteriormente, con estreptavidina-ficoeritrina. Se utilizó 0,29 pg /ml citocinas recombinantes para establecer las curvas de calibración - Una gama de 105.876. Los niveles de las moléculas inflamatorias se midieron en un lector de matriz multiplex (Bio-Plex estación de trabajo de Bio-Rad Laboratories). . Las cantidades finales se calcularon utilizando el software proporcionado por el fabricante y se informaron como picogramos por 30 s (pg /30 s) [26]
Basado en el efecto biológico de cada molécula, las moléculas objeto de la investigación se agruparon como: pro citoquinas-inflamatorio (IL-1ß, IL-6, IL-9, IL-12 y TNF-a), citocinas antiinflamatorias (IL-4 e IL-10), quimiocinas (IL-8, IP-10, MCP -1, MIP-1α, MIP-1β y RANTES) y T-helper 2-helper T relación /1 (Th-2 /TH-1) (IL-4, IL-6, IL-9, IL-10 /INF-γ, IL-2). El análisis estadístico
entre los grupos diferencias en los datos demográficos y clínicos se evaluó mediante chi-cuadrado y la prueba exacta de Fisher para las variables categóricas, una análisis de la varianza (ANOVA) con post -hoc (Sidak) de ajuste para comparaciones múltiples para las variables continuas con distribución normal, y Kruskal-Wallis y Mann-Whitney para datos asimétricos. Desde está sesgada la distribución de los niveles de las moléculas estudiadas, los enlaces logaritmo natural se calcularon y se utilizan para detectar las diferencias entre los grupos de estudio, y análisis de varianza de una sola vía (ANOVA) con post-hoc (Sidak) se llevó a cabo. modelos lineales generalizados (GLM) con la familia de Gauss y la función log se utilizaron para ajustar el posible efecto de confusión de la edad, el sexo, el tabaquismo, la placa dental, balanza de pagos y la proteína total en el resultado (cantidades de moléculas). Una posible correlación entre la HbA1c y el estado inflamatorio se investigó usando correlación de Pearson. Stata 13 (StataCorp 2013. Statistical Software Stata:. Release 13. College Station, TX:. StataCorp LP) se utilizó para el análisis de datos. Los valores de p inferior a 0,05 se consideró estadísticamente significativa.
Resultados
Las características demográficas y los parámetros clínicos de los grupos de estudio se presentan en la Tabla 1. BP fue el único parámetro clínico que difería significativamente entre los grupos. Fue mayor en el grupo DM + CP que en los PC y DM. Las siguientes moléculas inflamatorias, que no fueron detectados en más de 30% de las muestras del GCF, se excluyeron del análisis: (IL-1ra, IL-5, IL-13, IL-15 y eotaxina). Los medios no ajustados de las cantidades de las moléculas detectadas a través de los grupos de estudio se presentan en la Tabla 2. Después del ajuste para posibles factores de confusión (edad, sexo, tabaquismo, BOP, índice de placa dental y de proteína total), el grupo DM + CP tuvo mayor niveles de IL-8 y MIP-1β, y menores niveles de TNF-α, IL-4, INF-γ, RANTES e IL-7 en comparación con el grupo CP. Por otra parte, el grupo DM + CP tenían niveles más bajos de IL-6, IL-7 y G-CSF que en el grupo DM. El grupo DM tenían niveles más altos de IL-10, VEGF, y G-CSF que el grupo CP. Ambos grupos diabetes (DM + CP y DM) tenían menores niveles de MIP-1α y FGF en comparación con sujetos con periodontitis crónica sin diabetes (CP) (Tabla 3) .Tabla 1 Distribución de los indicadores socio-demográficas y clínicas de los grupos de estudio
variable
DM + CP (n = 54
) guía empresas CP (n = 30
) guía empresas DM (n = 24
)
Edad, media (SE) 1
54,76 (1,37)
55,37 (1,83)
50,79 (2,05) guía empresas
Género,% (n) 2
Hombre
42.59 (23)
60.00 (18)
29.17 (7)
Mujer
57.41 (31)
40.00 (12)
70.83 (17)
Educación,% (n) 2
Analfabetos
29.63 (16) guía empresas 33.33 (10)
20.83 (5)
Literate
70.37 (38) guía empresas 66,67 (20) guía empresas 79.17 (19)
Empleo,% (n) 2
Desempleado
62.96 (34)
43.33 (13)
70.83 (17)
propia
37.04 (20)
56.67 (17)
29.17 (7)
fumadores,% (n) 3
Sí
12.96 (7)
26.67 (8)
12.50 (3)
Sin
87.04 (47) guía empresas 73.33 (22)
87.50 (21)
hipertensión,% (n) 2
Sí
31.48 (17)
20.00 (6)
29.17 (7)
Sin
68.52 (37)
80.00 (24)
70.83 (17)
asistencia dental regular,% (n) 3
Sí
3,70 (2)
10.00 (3)
8,33 (2)
Sin
96.30 (52)
90.00 (27) guía empresas 91,67 (22)
duración de la diabetes, la media (SE) 4
8,44 (0,83) guía empresas -----
9,67 (1,70)
HbA1c%, media (SE) 5
9.17 ( 0,24) guía empresas -----
9,25 (0,49)
índice de placa, media (SE) 1
1,66 (0,05)
1,40 (0,06)
1,47 (0,07)
Porcentaje de dientes con la balanza de pagos, la media (SE) 1
58.88 (2.85) un
28.97 (3.82) b **
32.51 (4.28) b **
profundidad de la caja,% (n) 2
4-5 mm
59.30 (32)
70.00 (21) guía empresas 0.00 (0)
≥6 mm
40.70 (22)
30.00 (9)
0.00 (0)
profundidad de la bolsa, media (SE) 4
4,16 (0,09)
4,25 (0,12) guía empresas -----
proteína total -μg, media (SE) 6
82.78 (7.53)
84.23 (15.25)
77.84 (9.06) guía empresas
letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas
1one ANOVA de una vía
prueba 2chi cuadrados
la prueba exacta de 3Fisher
4Mann-Whitney
prueba
5Independent muestra T
prueba
prueba 6Kruskal-Wallis
P ** Hotel & lt; 0.01
Tabla 2 Niveles de las moléculas inflamatorias detectadas entre los grupos de estudio (pg /30s): perfil molécula inflamatoria, media (SE) guía empresas DM + CP (n = 54
)
CP (n = 30
) guía empresas DM (n = 24
)
IL-1β
350.50 (31.18)
260,31 (41,45)
261.74 (46.34)
IL-6
9.01 (0.83) un
11.12 (1.11) ab
12,67 (1,27) b *
IL-9
6,91 (0,57)
9,64 (0,76)
8,57 (0,87)
IL-12
13,93 (1,07)
16,44 (1,43)
17.13 (1.63)
TNF-α
17.70 (1.84) un
31.57 (2.47) b **
22.05 (2.82) ab
IL-4
0,83 (0,06) una
1,26 (0,09) b **
0,92 (0,10) ab
hotels, IL-10
27,74 (1,43) ab
23.68 (1.90) un
33.02 (2.17) b **
IL-2
8,01 (0,98) a *
8,93 (1,30) a *
12,68 (1,48) b
INF-γ
29.55 (2.61) a **
47.50 (3.50) b
33.89 (3.92) a *
IL-8
633.87 (48.22)
501,96 (62,25)
507,65 (69,60)
IP-10
19.32 (2.30) un
24.60 (3.01) ab
29.13 (3.43) b *
MCP-1
6,10 (0,87) una
10,73 (1,11) b **
7,88 (1,24) ab
MIP-1α
3,14 (0,27) a *
4,52 (0,36) b
2,98 (0,40) a *
MIP-1β
23,53 (2,64)
21.37 (3.54)
26.03 (3.95)
RANTES
32,93 (2,77)
45.64 (3.72)
40.12 (4.16)
FGF
76.91 (4.62) a **
105.16 (6.20) b
76.34 (6.93) a *
PDGF
13.05 (0.93) un
17.22 (1.24) b *
15.45 (1.39) ab
VEGF
212,01 (11,75)
188.50 (15.77)
222.83 (17.63)
IL-7
2.63 ( 0.31) un
4,85 (0,42) b **
4,24 (0,47) b **
G-CSF
122,73 (12,48 ) un
131.02 (16.75) ab
196,73 (19,13) b **
GM-CSF
621,28 (21,82)
558,27 (29,28)
555,30 (33,44)
IL-17
72.04 (3.71) un
246.03 (62.90 ) b **
79.98 (6.68) ab
letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas usando un modelo lineal para el logaritmo natural. enlaces de las cantidades de moléculas inflamatorias
* P Hotel & lt; 0.05
P ** Hotel & lt; 0.01 sobre Table 3 medias ajustadas de los niveles de moléculas inflamatorias (pg /30s): perfil molécula inflamatoria, media (SE) guía empresas DM + CP (n = 54
)
CP (n = 30
) guía empresas DM (n = 24
)
IL-6
9.01 (0.94) un
11.11 (1.30) ab
14.01 (1.50) b *
TNF-α
17.68 (2.06) un
31.64 (3.16) b **
23.13 (3.20) ab
IL-4
0,84 (0,07) una
1.25 ( 0,11) b *
0,96 (0,11) ab
IL-10
28.82 (1.66) ab
22.46 (1.99) un
33.72 (2.42) b **
INF-γ
30.62 (2.99) un
45.77 (4.29) b *
36.88 (4.62) ab
IL-8
699,48 (53,44) un
464,17 (57,03) b *
503.04 (71.04) ab
MIP-1α
3,05 (0,32) a *
4,79 (0,47) b
2,99 (0,45) una *
MIP-1β
28.71 (3.05) un
16.84 (2.86) b *
22,37 (3,40) ab
RANTES
31.94 (3.14) un
48,01 (4,70) b *
41.16 (4.79) ab
FGF
71.66 (5.17) a **
113.28 (7.90) b
80,86 (7,93) ** un
VEGF
215.04 (12.69) ab
177.52 (16.40) un
255,82 (19,39) b **
IL-7
2,81 (0,35) una
4,47 (0,51) b *
4,78 (0,56) b *
G-CSF
131.71 ( 14.41) a *
116.98 (17.79) a **
206.60 (21.25) b
letras diferentes indican diferencias estadísticamente significativas utilizando GLM con la familia de Gauss y registro . la función de ajustar por edad, sexo, tabaquismo, balanza de pagos, índice de placa dental y proteína total
* P Hotel & lt; 0.05
P ** Hotel & lt; 0.01 Francia El ratio de Th-2 /Th-1 fue significativamente mayor en los grupos de la diabetes (DM + CP y DM) que en el grupo CP (Fig. 1d). Se observó una correlación positiva débil entre HbA1c y los niveles de las citoquinas pro-inflamatorias (coeficiente de correlación de Pearson: 0,27, valor P: 0,02) (Fig. 2), mientras que la correlación entre la HbA1c y las citoquinas anti-inflamatorios no fue estadísticamente significativa (coeficiente de correlación de Pearson: -0.11, P valor: 0,33) (Fig. 3). Higo. 1 Los niveles de moléculas inflamatorias en MCD de los grupos de estudio. a: citocinas pro-inflamatorias (IL-1β, IL-6, IL-9, IL-12, TNF-α), b: citocinas antiinflamatorias (IL-4, IL-10), C: quimiocinas (IL 8, IP-10, MCP-1, MIP-1α, MIP-1β, RANTES), d: Th-2 /TH-1 ratio: (IL-4, IL-6, IL-9, IL-10) /(INF-γ, IL-2), **: P
& lt; 0,01
Fig. 2 Correlación entre la HbA1c y las citoquinas pro-inflamatorias. Pearson coeficiente de correlación: 0,27, P Valor: 0,02
Fig. 3 Correlación entre HbA1c y las citoquinas anti-inflamatorias. Pearson coeficiente de correlación: -0.11, P Valor: 0,33
Discusión
citoquinas pro-inflamatorias inducen la respuesta inflamatoria a varios estímulos tales como lipopolisacáridos bacterianos [27]. En pacientes con diabetes, la IL-1β es considerado como una de las citocinas clave en la destrucción del tejido periodontal inflamatoria [28]. En el presente estudio, el nivel de IL-1β fue mayor en el grupo DM + CP, aunque no estadísticamente significativa. Un reciente meta-análisis informó que los pacientes diabéticos tipo 2 con periodontitis crónica se encontró que tenían niveles significativamente más altos de IL-GCF 1β que sus contrapartes sistémicamente sanos [29]. Por el contrario, otros no han podido confirmar una asociación entre los niveles de IL-1β y la diabetes en individuos con la enfermedad periodontal [30, 31]. Estas inconsistencias pueden ser atribuidas a la diferencia en los niveles de HbA1c y la duración de la diabetes. Resultados contradictorios se registraron a partir de estudios de los niveles de TNF-a en los fluidos orales en pacientes con diabetes y la periodontitis crónica [12]. En el presente estudio, los niveles de TNF-α tanto e IL-7 fueron menores en el grupo DM + CP que en el grupo CP. Por el contrario, otros estudios han informado de altos niveles de TNF-GCF α e IL-7 en pacientes con diabetes tipo 2 que en individuos sin enfermedad sistémica [29, 32]. En este contexto, es interesante observar que los niveles de citocinas y quimiocinas pro-inflamatorias en el grupo de DM fueron comparables con aquellos en el grupo CP, lo que refleja un proceso inflamatorio activo local en el grupo de DM (Fig. 1a-1c) . Se observó una correlación positiva débil entre la HbA1c y los niveles de citoquinas pro-inflamatorias. Otro estudio informó de una correlación positiva significativa entre los niveles de IL-1β en GCF y HbA1c [33].
Estudiar el efecto de IL-6 y IL-10, en particular en los estudios transversales, se complica por el hecho de que ambos son citoquinas multifuncionales (es decir, pro y anti-inflamatorio) [34, 35]. IL-6 está implicada en la activación de los osteoclastos y Th-17 células [36]. En contraste, sino que también induce la producción de IL-1ra, por lo tanto contribuye al proceso de anti-inflamatoria [37]. No hay evidencia para apoyar una asociación entre el aumento de los niveles de IL-6 y la enfermedad periodontal destructiva entre los individuos con hiperglucemia [38]. Sin embargo, Javed et al., [39] informaron de que la regulación de IL-6 junto con IL-1α podría estar asociada con la destrucción del tejido periodontal relacionada con la diabetes. En el presente estudio, los niveles de la citoquina antiinflamatoria IL-4 fueron inferiores en el grupo DM + CP que en el grupo CP. Se ha informado de que la IL-4 es el regulado en pacientes con diabetes de tipo 2 [40]. Además, en un in-vivo modelo animal para la curación de ligamentos, se encontró que la IL-4 para contribuir a la fase proliferativa de la curación [41].
Las quimioquinas son pequeños péptidos que reclutan células inmunes de la circulación a los tejidos, según sea necesario [42]. La mayoría de las investigaciones sobre el papel de las quimiocinas se han centrado en IL-8 [12]. En el presente estudio, la IL-8 estaba regulado en el grupo DM + CP en comparación con el grupo de CP. La misma tendencia se ha observado en la investigación de los niveles séricos de IL-8 [43]. MIP-1α es un potente quimioquinas que atrae a los macrófagos, T citotóxicos y células asesinas naturales [44]. Se había reducido regulado en los dos grupos de la diabetes (DM + CP y DM) en comparación con el grupo de CP. Por el contrario, Duarte et al., [32] informó de mayores niveles de MIP-1α en pacientes con diabetes tipo 2 mal controlada en comparación con los controles sanos sistémicamente. El presente estudio demostró niveles más bajos de RANTES en el grupo DM + CP comparación con el grupo CP. Se informó de que los niveles de RANTES se correlacionan negativamente con aumento de la inflamación [45]. Diabetes tipo 2
podrían afectar negativamente a la salud periodontal por moléculas de abajo de la regulación implicados en la regeneración del tejido periodontal y el proceso de curación, tales como FGF y PDGF [46, 47] . Se detectó FGF en cantidades más bajas en los grupos de la diabetes (DM + CP y DM) que en el grupo CP. Por otra parte, los niveles de VEGF fueron mayores en el grupo DM que en el grupo CP. Esta observación puede explicarse por el hecho de que el estrés oxidativo induce la señalización de VEGF en pacientes con diabetes de tipo 2 [48]. Por otra parte, nuestros resultados corroboran VEGF con un estudio previo que informó de una tendencia no significativa hacia un aumento de VEGF en el MCD de los pacientes con diabetes tipo 2 y la periodontitis crónica en comparación con los individuos sin enfermedad sistémica asociada con periodontitis crónica [49]. Por el contrario, Guneri et al., [50] llegó a la conclusión de que los niveles de VEGF GCF estaban elevados en los sujetos con periodontitis crónica, independientemente de su estado diabético.
De acuerdo con las citoquinas que producen, células Th se dividen en Th-1, Th-2, J-17 y las células T reguladoras. Th-1 segrega IL-2 e INF-γ, mientras Th-2 segrega IL-4, IL-6, IL-9, IL-10 e IL-13 [51, 52]. Sólo información limitada disponible sobre el papel de las células Th en pacientes diabéticos tipo 2 con periodontitis [12]. Th-2 /TH-1 proporción fue mayor en ambos grupos diabetes (DM + CP y DM) que en el grupo CP, lo que indica una mejor respuesta humoral y la progresión de la enfermedad periodontal en los pacientes con diabetes tipo 2 a través de 2 ª /B-cell eje [53, 54].
en el presente estudio, los niveles bajos de algunas de las moléculas pro-inflamatorias detectados en pacientes diabéticos tipo 2 que aquellos sin diabetes puede explicarse por el hecho de que algunos de los pacientes con diabetes estaban recibiendo terapia con insulina, lo que podría afectar a la expresión local de moléculas inflamatorias [43, 55]. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.
