experimental primaria y secundaria
Resumen Antecedentes
Para determinar el efecto antibacteriano de la terapia fotodinámica en Enterococcus faecalis (E. faecalis)
biopelículas en infectados experimentalmente conductos radiculares humanos en infecciones primarias y re-tratamientos de endodoncia.
Métodos
se prepararon ciento sesenta dientes unirradiculares extraídos con un conducto radicular utilizando los instrumentos ProTaper. Setenta muestras se quedaron sin obturación del conducto radicular y el autoclave. Los conductos radiculares de otros 70 especímenes estaban llenos de Thermafil y AH Plus y las obturaciones del conducto radicular se retiraron después de 24 horas usando archivos ProTaper D y plasma esterilizados. Las muestras fueron infectados con un aislado clínico de E. faecalis
durante 72 horas. Las muestras se tomaron con puntas de papel estéril para determinar la presencia de E. faecalis Hoteles en los conductos radiculares. Las muestras se dividieron aleatoriamente en grupos de acuerdo con su tratamiento con 20 dientes cada uno, y un control. En el grupo de TFD los dientes fueron tratados con TFD, que consiste en el azul de toluidina fotosensibilizador y la fuente de luz PDT a 635 nm. En el grupo de NaOCl (hipoclorito de sodio) los canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de 3% NaOCl. En el grupo de NaOCl-PDT los canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de 3% de hipoclorito de sodio y luego tratados con PDT. Las muestras fueron tomadas después de los tratamientos con puntas de papel estéril. Además, el material de obturación del conducto radicular restante se recuperó de las paredes del conducto radicular. fracciones de supervivencia de las muestras se calcula contando unidades formadoras de colonias. Se aplicó un análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) para los datos para evaluar el efecto de diferentes técnicas de tratamiento.
Resultados
tratamiento antimicrobiano de canales de la raíz causó una reducción significativa de la carga bacteriana en todos los grupos. la irrigación de NaOCl eliminado E. faecalis
más eficaz. PDT solo fue menos eficaz en comparación con el riego NaOCl y la combinación de riego NaOCl y PDT. niveles CFU recuperados del material de relleno después de la irrigación NaOCl de los canales de la raíz fueron de 10 veces mayor en comparación con PDT y la combinación de riego NaOCl y PDT.
Conclusiones
terapia fotodinámica mataron E. faecalis
en infecciones endodónticas primarias experimentales y se retiraron los conductos radiculares humanos. La TFD es un complemento eficaz en la desinfección del conducto radicular, especialmente en repeticiones de tratamientos de endodoncia.
Palabras clave
La terapia fotodinámica PDT Fotoactivado quimioterapia fototerapia láser de conducto radicular Desinfección infección endodóntica Enterococcus faecalis Electrónico material complementario
La versión en línea de este artículo (doi :. 10 1186 /1472-6831-14-132) contiene material complementario, que está disponible para los usuarios autorizados
Antecedentes
un tratamiento de conducto radicular es la combinación de instrumentación mecánica de un sistema de conductos radiculares, su. desbridamiento químico y llenado con un material inerte, diseñada para mantener o restablecer la salud de los tejidos periapicales. Aunque, los microorganismos que infectan se eliminan durante el desbridamiento mecánico combinado con riego químico, las bacterias residuales son fácilmente detectables en aproximadamente el 50% en el momento de relleno del canal de la raíz, a pesar de una amplia irrigación con hipoclorito de sodio [1]. Las bacterias se han encontrado en istmos, los conductos laterales, aletas, ramificaciones y estructuras anatómicas, que permanecen inaccesibles para la instrumentación mecánica [2, 3].
Bacterias y toxinas bacterianas que quedan en el sistema de conductos radiculares después de la preparación químico-mecánico o entrar en el lleno sistema de conductos radiculares mediante microfiltración salival, la fuga de la restauración coronaria o inadecuada obturación del conducto radicular puede conducir al fracaso [4-7]. enfermedad post-tratamiento asociado con mal tratamiento endodóntico puede ser causada como resultado de no utilizar un dique de goma, el acceso deficiente que resulta en canales radiculares perdidas no tratados, instrumentación inadecuada, desinfección inadecuada, insuficiente obturación del conducto radicular o errores iatrogénicas, por ejemplo, instrumento fracturado, perforación, cornisa [8].
repetición del tratamiento de conducto radicular se considera más difícil en comparación con el tratamiento de conducto principal, ya que hay obstáculos que superar por lo general intracanal, por ejemplo eliminación de gutapercha, materiales intracanal tales como puntas de plata, postes o instrumentos fracturados, la corrección de errores iatrogénicas tales como cornisas o perforaciones [8]. Estudios anteriores han demostrado que el material de obturación del conducto radicular no se puede eliminar por completo dejando la gutapercha y /o sellador en la pared del conducto radicular hacer la desinfección del sistema de conductos radiculares más difícil en comparación con los tratamientos de conductos primarios [9-11].
después de la eliminación de relleno del canal de la raíz y otros obstáculos intracanal contaminación bacteriana residual tiene que ser reducido a un mínimo para el éxito de un tratamiento de endodoncia [12]. Un método preferido es alterna de riego utilizando hipoclorito de sodio y un agente quelante, por ejemplo, o de ácido cítrico ácido etilendiaminotetraacético [13]. compuestos de clorhexidina y yodo también se han defendido como irrigantes adicionales para tratamiento de conducto (re) de tratamiento [14].
fracasos endodónticos se asocian con una alta proporción de microorganismos aerobios y facultativos gram-positivas [15]. Enterococcus feacalis
, que se puede encontrar en los conductos radiculares tratados y no tratados, está muy asociada con fallas [16]. Pseudomonas
, estafilococos y estreptococos
también son la causa de los fallos. La terapia fotodinámica gratis (PDT), también conocida como terapia fotorradiación, fototerapia, la fotoquimioterapia, o quimioterapia photoactivated (PACT) es un tratamiento médico, que utiliza la activación de un agente fotosensibilizante (fotosensibilizador) por la exposición a luz de una longitud de onda específica en la presencia de oxígeno [17]. Hay una transferencia de energía desde el fotosensibilizador activado para oxígeno disponible que resulta en la formación de especies de oxígeno tóxicas, tales como oxígeno singlete y radicales libres. El oxígeno singlete y especies de radicales provocan una destrucción rápida y selectiva de microorganismos. La mayoría de los fotosensibilizadores se activan por la luz entre 630 y 700 nm. Los principales fotosensibilizantes que se encuentran en la literatura se hematoporfirina derivados (620-650 nm), fenotiazina, como el azul de toluidina y azul de metileno (620-700 nm), cianina (600-805 nm), agentes fitoterapéuticos (550-700 nm) y hytalocyanines (660 a 700 nm) [18-20].
PDT ha demostrado ser una terapia adyuvante a tratamiento endodóntico convencional para optimizar la reducción microbiana en canales de la raíz en infecciones endodónticas primarios [21-23]. Garcez et al. [24] investigaron el efecto de la PDT en retratamientos endodónticos in vivo. Encontraron que PDT como un adyuvante al tratamiento de endodoncia convencional conduce a una reducción adicional significativa de la carga bacteriana después del riego utilizando hipoclorito de sodio, peróxido de hidrógeno y EDTA y es eficaz contra las bacterias resistentes a múltiples fármacos. En retratamientos es imposible retirar la obturación del conducto radicular por completo, lo que impide la desinfección del sistema de conductos radiculares. Con base en los resultados anteriores, la TFD se supone que tiene un efecto antimicrobiano adicional después de la irrigación del conducto radicular, especialmente en los microorganismos resistentes. Francia El objetivo del presente estudio es investigar el efecto antibacteriano de la terapia fotodinámica (TFD) en Enterococcus faecalis
biopelículas en infectados experimentalmente conductos radiculares humanos de las infecciones endodónticas primarias y secundarias.
Métodos
especímenes de dientes
Para este estudio, se seleccionaron ciento sesenta intactas extraídos los dientes delanteros humanos y premolares permanentes. Dos radiografías fueron tomadas de cada muestra, una idiomas bucal /palatina y una imagen mesial-distal, para asegurar que las muestras tenían cámaras pulpares normales, endodoncias patentes y ápices completamente formadas, sin ningún signo de la resorción. Se excluyeron los dientes con obturaciones del conducto radicular.
Los dientes fueron extraídos en el Centro de Medicina Dental, Departamento de Cirugía Maxilofacial de la Universidad del Centro Médico de Friburgo, a causa de dolor de dientes agudos, complicaciones inflamatorias severas de enfermedades sistémicas, en el contexto de ortodoncia tratamiento, las infecciones agudas (absceso), mala salud general o, en el caso de las muelas del juicio, antes de complicaciones del tratamiento de ortodoncia. Los pacientes dieron su consentimiento informado por escrito para el uso de los dientes extraídos para la investigación, el cual fue revisado y aprobado por el comité de ética de la Universidad de Friburgo (175/13).
Cavidades de acceso estándar se prepararon y la longitud de las cuchillas preciso se determinó por la inserción de un 10-K archivo ISO (VDW®, Munich, Alemania) en el canal hasta que el archivo fue visible en el foramen apical. A continuación, la punta de la lima se colocó exactamente en el foramen apical del diente para medir la longitud de los dientes. Longitud de trabajo (WL) se encuentra a 1 mm de longitud de las cuchillas cortas. Los conductos radiculares se prepararon utilizando instrumentos ProTaper (Dentsply®, Konstanz, Alemania) según las instrucciones del fabricante en combinación con un Endo IT Professional (VDW®, Munich, Alemania) a 250 rpm. Durante la preparación del canal radicular se utilizó una solución de hipoclorito sódico al 3% para el riego [25]. preparación del conducto radicular se realizó usando limas de conformación ProTaper S1 y S2 y acabado de archivos F1 y F2. preparación apical se realizó finalizando con el archivo F2 ProTaper en WL. Una punta de gutapercha ProTaper F2 se fijó en WL y la región apical estaba cubierta de compuesto utilizando Optibond FL (Kerr Corporation, Orange, CA, EE.UU.) y CeramX mono (Dentsply®, Konstanz, Alemania) para un sellado apical. Los dientes fueron incrustados en metacrilato (Techovit 4070 ™, Haereus Kulzer®, Wernheim, Alemania) y luego decoronated usando un instrumento de corte giratorio de diamante (6830 L.314.014, Gebr Brasseler GmbH & amp;. Co. KG, Lemgo, Alemania) a 40.000 rpm en la unión cemento-esmalte. Después de una irrigación final con hipoclorito de sodio al 3% y tiosulfato de sodio al 5%, los dientes se trataron en autoclave a continuación a 134 ° C durante 18 minutos. Para verificar que los conductos radiculares estaban libres de microorganismos, se tomaron muestras de los conductos radiculares utilizando puntas de papel estéril ProTaper F2. puntos de papel incubadas en el canal radicular durante un minuto y luego se transfieren a un vial que contenía 750 l de solución de Ringer estéril, sometidos a vórtice durante 30 segundos y 100 l se cultivaron en una placa de agar sangre durante 24 horas. Los dientes con un cultivo positivo fueron excluidos.
Obturación del conducto radicular y el nuevo tratamiento
Los conductos radiculares de 70 especímenes estaban llenos con un tamaño de 25 Thermafil obturador (Dentsply®, Konstanz, Alemania) en combinación con un sellador a base de resina epoxi (AH Plus, Dentsply®, Konstanz, Alemania). Para la descontaminación de los obturadores Thermafil se incubaron en un vial con una solución de hipoclorito sódico al 3% durante 10 minutos [26]. El sellador se coloca en el tercio coronal del conducto radicular con una punta de papel ProTaper F2 estériles. Cada obturador se calentó usando un ThermaPrep Plus Horno (Dentsply®, Konstanz, Alemania) hasta que una señal audible indica que el obturador estaba listo para su colocación. A continuación, se inserta en el canal radicular preparado con un movimiento lento, firme y continuo en la dirección apical. se estabilizó El mango de cada obturador durante el enfriamiento. El transportista no se cortó a ser capaz de eliminar fácilmente. 2 radiografías fueron tomadas de cada muestra, una buco-lingual /palatal y una imagen mesial-distal, para asegurar el llenado completo del conducto radicular.
Después de 24 horas los transportistas se retiraron y el relleno del canal radicular se retiró usando ProTaper D1 e instrumentos D2 hasta la longitud de trabajo se alcanzó utilizando 5 ×. Después de la eliminación de la obturación del conducto radicular 2 radiografías fueron tomadas de cada muestra para visualizar el material de obturación del conducto radicular restante.
Después de retirar la obturación del conducto radicular los especímenes fueron seccionados longitudinalmente usando un diamante de corte rotativo vio bajo un spray de agua. Las muestras fueron esterilizados mediante esterilización por plasma (H
2O 2). Después de la esterilización de las dos secciones de los especímenes fueron unidos entre sí mediante un adhesivo (Heliobond, Ivoclar Vivadent, Ellwangen, Alemania).
Enterococcus faecalis
infección
Los conductos radiculares fueron infectados con un aislado clínico de E. faecalis. E. faecalis
se cultivó durante la noche en caldo de soja tríptico (TSB) (Sigma-Aldrich, St Louis, MO, EE.UU.) a 36 ° C en el 5 al 10% de CO 2 y con jeringa en el conducto radicular preparado usando una aguja de calibre 30 de irrigación. Los conductos radiculares fueron infectados con E. faecalis
durante 72 horas para permitir la formación de biopelículas. TSB se cambió cada 24 horas. Después de 72 horas de los conductos radiculares se lavaron con 5 ml de solución estéril de Ringer y una muestreado usando 3 puntos estériles de papel ProTaper F2 (Dentsply®, Konstanz, Alemania) para evaluar la presencia de E. faecalis Hoteles en los conductos radiculares. Las puntas de papel se transfirieron a 750 l de solución de Ringer estéril. Las muestras se cultivaron en agar sangre para determinar la presencia de E. faecalis Hoteles en los conductos radiculares. 10 especímenes que no se llena de la raíz y 10 especímenes con tratamientos de conducto replegado se quedaron sin la infección con E. faecalis
y sirvieron como grupo de control.
Después se tomaron muestras de 72 horas usando puntas de papel y se cultivaron en agar sangre de comprobará que los conductos radiculares no infectadas estaban libres de microorganismos.
tratamiento antimicrobiano de las infecciones primarias
Setenta muestras con infecciones primarias fueron divididos aleatoriamente en tres grupos. En el primer grupo (grupo PDT), los canales de la raíz de 20 especímenes fueron tratados con PDT (PACT200, Cumdente, Tübingen, Alemania), que consiste en una fuente de luz a 635 nm en combinación con el fotosensibilizador PACT-Fluid Endo, un toluidina solución de azul a 13-15 mg /ml. PACT-Fluid Endo fue llevado en el conducto radicular utilizando una aguja de calibre 30. Después de 60 segundos de incubación, la Endo-PACT fluido se activan mediante la fuente de luz PACT con la punta Guía PACT Luz Endo, 100 mW LED fuente de luz a 635 nm. La punta de la guía de luz PACT Endo se fijan lo más cerca WL como sea posible y se activa durante 120 segundos de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Los conductos radiculares se lavaron con 5 ml de solución de Ringer para eliminar la solución Endo-PACT de fluidos, y se tomaron muestras con 3 puntas de papel estéril ProTaper F2. puntas de papel se transfirieron a 750 l de solución de Ringer estéril, vortex durante 30 segundos y 100 l fueron cultivadas en una placa de agar sangre y se contaron las unidades formadoras de colonias.
En el segundo grupo (grupo de NaOCl), 20 canales de la raíz eran de regadío con 10 ml de 3% NaOCl con una velocidad de flujo de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl se eliminó por enjuague de los canales de la raíz con 2,5 ml de solución de Ringer estéril.
En el tercer grupo, 20 canales de la raíz fueron tratados con hipoclorito de sodio y (grupo NaOCl-PDT) PDT. Los canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de hipoclorito sódico al 3% utilizando una aguja de calibre 30 de irrigación con una velocidad de flujo de 3-3,5 ml por minuto. hipoclorito de sodio en exceso se eliminó mediante la irrigación con 2,5 ml de solución estéril de Ringer y los canales de la raíz fueron tratados con PDT y se tomaron muestras de acuerdo con el protocolo del grupo de PDT. En un grupo control, 10 canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de solución de Ringer.
Tratamiento antimicrobiano de las infecciones secundarias
Para el tratamiento antimicrobiano de las infecciones endodónticas secundarias, 70 especímenes fueron divididos aleatoriamente en tres grupos. En el primer grupo (grupo PDT), 20 canales de la raíz fueron tratados con PDT (PACT, Cumdente, Tübingen, Alemania) y se tomaron muestras de acuerdo con el tratamiento del grupo de PDT de las infecciones primarias.
En el segundo grupo (grupo NaOCl) , 20 canales de la raíz se regaron con 10 ml de 3% NaOCl con una velocidad de flujo de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl se eliminó por enjuague de los canales de la raíz con 2,5 ml de solución de Ringer estéril.
En el tercer grupo (grupo NaOCl-PDT), 20 canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de hipoclorito de sodio 3% (NaOCl) utilizando un calibre 30 aguja de irrigación con una velocidad de flujo de 3-3,5 ml por minuto. NaOCl fue retirado por irrigación con 2,5 ml de solución estéril de Ringer y se tomó una muestra con 3 puntas de papel estéril ProTaper F2. Después canales de la raíz fueron tratados con PDT y se tomaron muestras como se describe anteriormente.
En el grupo control, 10 canales de la raíz se enjuagaron con 10 ml de solución de Ringer.
Después se tomaron de todas las muestras utilizando 3 ProTaper F2 estéril muestras de tratamiento antimicrobianos puntas de papel y se transfirieron a un vial que contenía 750 l de solución de Ringer estéril para determinar las fracciones de supervivencia.
las muestras se separaron de nuevo utilizando un bisturí estéril y se recogió el canal de la raíz restante relleno en las paredes del canal de la raíz usando una handfile estéril (VDW ®, Munich, Alemania) en un vial que contiene 5 ml de TSB y cultivadas durante la noche. 100 l de las muestras se cultivaron en agar sangre. fracciones de supervivencia de las muestras se calcularon mediante el recuento unidades formadoras de colonias.
microscopía electrónica de barrido (SEM)
Para las muestras de dientes examen SEM, se prepararon muestras de Thermafil gutapercha y AH Plus. Las muestras de recién mezclado AH Plus se fijaron durante 24 horas. AH Plus muestras y muestras Thermafil fueron desinfectados con un 70% de etanol. Las muestras se cortaron los dientes verticalmente en dos piezas utilizando una sierra de diamante de corte rotativo. secciones de diente de muestra se trataron en autoclave a 134 ° C durante 18 minutos. Las secciones de diente de la muestra y las muestras de material fueron infectados con E. faecalis
en TSB durante 72 horas en cubreobjetos en la recámara (μ-Slide 8 así, ibidi GmbH, Martinsried, Alemania). Las muestras de material y muestras de dientes se dividieron en tres grupos. Los pozos de grupo uno no recibieron ningún tratamiento antimicrobiano y sirvió como control. En el grupo dos los especímenes y muestras de material fueron tratados con Endo-PACT de fluidos durante 1 minuto y la fuente de luz PACT durante 1 minuto. En el grupo tres de los especímenes y muestras de material se incubaron con 3% de NaOCl durante 1 minuto. Después del tratamiento antimicrobiano, los pocillos se lavaron con 1 ml de solución de Ringer estéril. Las muestras y las muestras se fijaron en 8% de formaldehído durante la noche a 4 ° C y se deshidrataron en alcohol graduado (30%, 50%, 70%, 80%, 90% una vez cada uno y dos veces en 99,8% durante 1 hora). A continuación, secado de punto crítico (CPD y Puntos Críticos de Secadora 030; Bal-Tec, Wallruf, Alemania) con dióxido de carbono líquido se llevó a cabo de acuerdo con el procedimiento estándar. Las muestras se pulverizaron con oro en un dispositivo de recubrimiento 050 SCD (Bal-Tec) y se examinaron utilizando un Zeiss Leo 435 VP microscopio electrónico de barrido (Leo Electron Microscopy Ltd Cooperación Zeiss Leica, Cambridge, Inglaterra) en 10 a 12 kV.
el análisis estadístico
Un análisis unidireccional de la varianza (ANOVA) se aplicó a los datos con el fin de evaluar el efecto de diferentes técnicas de tratamiento en la reducción de E. faecalis
en canales de la raíz. El nivel de significación se fijó en p & lt; 0,05
. Todas las pruebas estadísticas se realizaron utilizando SPSS (15.0).
Resultados
Efecto de los tratamientos antimicrobianos en las infecciones primarias
La figura 1 muestra las 72 horas de edad E. faecalis
biopelícula. La media de recuentos de E. faecalis
antes de los tratamientos antimicrobianos fueron 2,32x10 6 UFC /ml. Figura 1 micrografías electrónicas de barrido de la raíz de la dentina del canal y los materiales de relleno de raíz Thermafil gutapercha y AH Plus colonizados con E. faecalis con una ampliación de 5000 ×. Tratamientos con 3% de NaOCl o PDT reducen severamente E. faecalis
sobre la dentina y las superficies de los materiales de obturación del conducto radicular. No se encontraron células bacterianas de forma normal en la gutapercha y AH Plus después de los tratamientos. Restante células sobre la dentina después de los tratamientos mostraron forma anormal.
El tratamiento de conductos radiculares con PDT solo causó una reducción en la carga bacteriana, lo que resulta en una matanza 92,7% de E. faecalis
. Enjuague de los conductos radiculares con hipoclorito de sodio al 3% (NaOCl) lograron una reducción del 99,9% y la combinación de NaOCl desinfección y PDT reducen la viabilidad bacteriana en un 99,9%. La irrigación con hipoclorito de sodio al 3% y la combinación de la irrigación NaOCl y PDT condujo a una reducción significativamente mayor de E. faecalis
comparación con el tratamiento PDT sola (p & lt; 0,0001). Después de los casos de riego con un 3% de NaOCl, el 80% de los conductos radiculares fueron negativos canales de cultivo. El tratamiento adicional con PDT aumentó el número de canales negativos de cultivo a 90%. Cuando los conductos radiculares fueron tratados con PDT sola, 1 de cada 20 casos (5%) se cultivo negativo (Tabla 1) .Tabla 1 Reducción de E. faecalis después del tratamiento antimicrobiano
La contaminación con E. faecalis
UFC /ml x 106
tratamiento
contaminación después del tratamiento UFC /ml x 106
Reducción de E. faecalis
[%]
Cultura muestras negativas [%]
media
Std Dev
3% NaOCl
PDT
media
Std Dev
primaria infection
2.48
2.04
X
-
0.0006
0.0003
99.9a
80
2.22
1.92
-
X
0.16
0.14
92.7b
5
2.13
1.86
X
X
0.0004
0.0003
99.9a
90
Secondary infection
2.24
1.76
X
-
0.0005
0.0001
99.9a
55
2.57
2.21
-
X
0.02
0.04
99.9a
0
2.26
1.58
X
X
0.001
0.001
99.9a
30
Porcentaje de muestras negativas de cultivo. letras en superíndice indican diferencias estadísticas.
Efecto de los tratamientos antimicrobianos en las infecciones secundarias
tratamiento antimicrobiano de los canales de la raíz replegado causó una reducción significativa de la carga bacteriana en los tres grupos, lo que resulta en una muerte 99,9% de E. faecalis
(Tabla 1). la irrigación de NaOCl alcanzó los conductos radiculares con cultivo negativo en el 55% de los casos, mientras que en los dientes tratados con TFD ningún espécimen era cultivos negativos. Para la combinación de irrigación de NaOCl y el PDT 30% de los casos se encontraron con cultivo negativo.
E. faecalis
aislado del material de relleno del canal radicular
Figura 1 muestra las 72 horas de edad E. facealis
biopelícula sobre Thermafil gutapercha y AH Plus. En todos los grupos E. facealis
podría cultivarse a partir del material de relleno aislados recuperados de las paredes del conducto radicular. Había cantidades iguales de CFU recuperados de muestras de material de relleno de la raíz con PDT y la combinación de riego NaOCl seguido por PDT. niveles CFU recuperados del material de relleno después de la irrigación NaOCl de los canales de la raíz fueron aproximadamente de 10 veces mayor en comparación con PDT y la combinación de riego NaOCl y PDT.
Discusión
En el presente estudio, PDT causa una reducción de la viabilidad bacteriana en tanto primaria infección de endodoncia y tratamientos de conducto replegado infectados con E. faecalis
. El tratamiento de conductos radiculares con hipoclorito de sodio (NaOCl), PDT o una combinación de riego NaOCl y PDT causó una reducción significativa de E. faecalis
en los canales de la raíz. En los casos de infecciones primarias, la combinación de riego NaOCl y riego PDT NaOCl logró el mayor número de canales de la raíz con cultivo negativo (90%), de riego NaOCl solos canales de la raíz con cultivo negativo obtenidos en 80%, mientras que después del tratamiento usando sólo PDT un espécimen fue con cultivo negativo. Para las infecciones secundarias, la irrigación de NaOCl logró el mayor número de conductos radiculares con cultivo negativo, mientras que después del tratamiento con TFD todos los especímenes fueron cultivo positivo. Garcez et al. [24] investigaron el efecto de la PDT en retratamientos endodónticos in vivo. Encontraron que PDT como un adyuvante al tratamiento de endodoncia convencional conduce a una reducción adicional significativa de la carga bacteriana después del riego utilizando NaOCl, peróxido de hidrógeno y EDTA y es eficaz contra las bacterias resistentes a múltiples fármacos. Sobre la base de estos hallazgos, la TFD se supone que tiene un efecto antimicrobiano adicional después de la irrigación del conducto radicular, especialmente en los microorganismos resistentes. Los resultados del presente estudio no puede confirmar estos resultados en los casos de re-tratamientos. Los microorganismos pueden ser capaces de invadir la dentina y túbulos de la dentina cubiertas por material de obturación del conducto radicular y podrían no ser accesibles para los agentes o componentes PDT desinfección. Además, irrigularities en la forma de los conductos radiculares, aletas y túbulos de la dentina podrían limitar la difusión de NaOCl o el fotosensibilizador, el oxígeno y la luz. El material de obturación del conducto radicular restante puede albergar microorganismos por lo que es imposible para soluciones de riego, el fotosensibilizador y la luz penetre. La luz emitida puede ser absorbida o reflejada por el material de relleno de canal de la raíz residuo limitar el efecto de la PDT. Sin embargo, en el presente estudio aislado del conducto radicular material de relleno muestra menor contaminación con E. faecalis
después del tratamiento con TFD y la combinación de la irrigación de NaOCl y la TFD en comparación con la irrigación de NaOCl. El fotosensibilizador podría haber penetrado en estas zonas de material de relleno adherido a la pared del conducto radicular mejor que NaOCl o NaOCl se inactiva cuando se pone en contacto con E.faecalis
o sus componentes de la estructura del biofilm-como [27]. Francia El resistencia de los microorganismos organizados en biofilms se ha descrito anteriormente [28]. Las bacterias en las capas profundas de la biopelícula son más resistentes debido a la limitación de la difusión (fotosensibilizador, el oxígeno o la luz o el agente de irrigación) a través de la estructura orgánica [29]. Además, los compuestos orgánicos, tales como las células muertas o biofilm matriz extracelular, neutralizan los agentes antimicrobianos. Estudios previos han sugerido utilizar PDT como un tratamiento adyuvante para el riego en la desinfección del canal radicular [21-23, 30]. Los autores encontraron protocolos de riego sobre la base de NaOCl, agentes de peróxido de hidrógeno y quelantes, como EDTA, para ser superior en el tratamiento antimicrobiano de endodoncia, especialmente en términos de desintegración biofilm. Sin embargo, Garcez et al. [30] han demostrado un efecto adicional de PDT después del tratamiento convencional y se encontró E. faecalis
ser 100-1000 veces más sensibles a la destrucción mediada PDT comparación con las especies Gram-negativas [31]. El efecto antimicrobiano más baja de la TFD en comparación con el riego se puede explicar por las células muertas y restos de células que permanecen en el canal de la raíz, en la pared del conducto radicular o que aún pueden estar integradas en la estructura del biofilm-como la neutralización de la destrucción mediada PDT, por lo que la fotosensibilizador, el oxígeno y la luz no pueden llegar a las bacterias en las capas profundas. Irrigación elimina las células muertas y restos.
En el presente estudio, se utilizó un modelo de infección sola especie con un aislado clínico de E. faecalis
. E. faecalis
con frecuencia se ha encontrado en infecciones primarias y secundarias más importante de los sistemas de canal radicular [32, 33]. E. faecalis
ha demostrado ser muy resistente frente a los agentes desinfectantes y antibióticos [32]. E. faecalis
efectivamente pueden ser colonizados, formas de biopelículas en las paredes del conducto radicular e invade túbulos de la dentina [34-36]. Este modelo monoinfección se utilizó para reproducir la misma estructura de la biopelícula como en cada canal de la raíz de las muestras con una especie que se sabe que es difícil de eliminar por quimio-mecánica desbridamiento [32]. Sin embargo, las infecciones del conducto radicular se asocian a menudo con múltiples especies [27, 37]. Una biopelícula con múltiples especies puede diferir en el contenido de los microorganismos en cada espécimen que puedan menoscabar el efecto de la desinfección [27].
Las muestras de los conductos radiculares se tomaron con puntas de papel estéril ProTaper F2. Sólo puntas de papel toman una porción de las bacterias de la pared del conducto radicular. Este método de muestreo será subestimar los niveles de UFC en los conductos radiculares antes y después del tratamiento y no dar los totales de E. faecalis
recuentos para cada muestra. Una muestra de cultivo negativo no significa un tratamiento de conducto estéril. Para todas las muestras se utilizaron puntas de papel ProTaper F2. Estas puntas de papel tienen el mismo tamaño de la superficie y encajan perfectamente en el canal radicular preparado para el muestreo y este método se ha utilizado en estudios anteriores [24, 29, 32]. Las técnicas moleculares, como las técnicas de PCR, se utilizan a menudo para detectar microorganismos en conductos radiculares [37, 38]. Sin embargo, en el presente estudio, que era importante diferenciar entre las bacterias de estar (cultivables) y muertos (no cultivables). Las técnicas moleculares habrían dado lugar a resultados falsos positivos cuando restos de células y el ADN se dejan en el conducto radicular después del tratamiento antimicrobiano, la sobreestimación de la contaminación restante del conducto radicular. Esta sobreestimación habría sido mayor para las muestras tratadas con TFD en comparación con el riego, porque el riego eliminará una gran cantidad de células muertas y restos celulares. Por lo tanto, una segunda muestra se tomó después del tratamiento antimicrobiano utilizando una lima K estéril para retirar las virutas de dentina de la pared del conducto radicular. De esta manera, se evaluó la contaminación restante de la pared del canal de la raíz y los túbulos dentinarios. Esto limita la subestimación de la contaminación bacteriana por el muestreo utilizando puntas de papel.
Souza et al. [29] conductos radiculares infectados antes de la conformación. procedimientos de instrumentación y sistemas de riego provocan una tensión extra sobre los microorganismos y perturban la biopelícula. Se ha demostrado que la instrumentación de los conductos radiculares reduce significativamente bacterias en canales de la raíz [39, 40]. En el presente estudio, la TFD ha sido probado en tratamientos de conducto en forma completa y en el caso de retratamiento endodóntico después de obturación del conducto radicular y la eliminación de la obturación del conducto radicular. Esto no imita la situación clínica. Estas muestras fueron infectadas con un aislado clínico de E. faecalis
. Dentro de las 72 horas de la infección, E. faecalis
fue capaz de formar una estructura similar a la biopelícula y el efecto de los diferentes tratamientos antimicrobianos en E. faecalis
en los conductos radiculares podría ser investigado.
Conclusión
PDT reduce E. faecalis Hoteles en infecciones primarias infectadas y se retiró conductos radiculares. Sin embargo, la irrigación con hipoclorito de sodio 3% es más eficaz en la eliminación de E. faecalis
comparación con PDT. PDT fue capaz de eliminar E. faecalis En venta restante del conducto radicular material de relleno en la pared del conducto radicular con mayor eficacia en comparación con el 3% de NaOCl. PDT no es una alternativa sino un complemento eficaz en la desinfección del conducto radicular, especialmente en casos de re-tratamientos. La interrupción de la biopelícula antes de la TFD y el uso de un adyuvante a base de hipoclorito de sodio enfoque convencional permanecen obligatoria.
Declaraciones
Reconocimiento
Los autores agradecen al Dr. Susanne Stampf y Kirstin Vach (Instituto de Biometría Médica y la informática médica Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.
