Resumen Antecedentes
Francia El objetivo de este estudio fue comparar la reacción del tejido conectivo de la rata de dos materiales de relleno de la raíz de gama blanca: agregado trióxido mineral (WMTA ) y Diaket.
Métodos
Cada uno de los materiales se colocó en tubos de dentina y se implantaron subcutáneamente en la parte dorsal del tejido conectivo de 21 ratas albinas Wistar. biopsias de tejido se recogieron 7, 30, y 60 días después de que el procedimiento de implantación. Las muestras se procesaron y se tiñeron con hematoxilina y eosina y se examinaron microscópicamente. Después de determinar el número de células inflamatorias en las secciones de cada muestra, las puntuaciones reacción inflamatoria se definieron de la siguiente manera: 0; no o pocas células inflamatorias (sin reacción), 1; menos de 25 células (de reacción suaves), 2; 25 a 125 células, (reacción moderada), y 3; 125 o más células (reacción severa). El análisis estadístico se realizó mediante las pruebas de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney.
: Resultados de la No hubo diferencias estadísticamente significativas en el número de células inflamatorias a través de la mediana de los tres períodos de prueba, con el más severo grado de inflamación observada en el -Semana periodo. Se observaron pocos casos de necrosis con WMTA. Diaket exhibió la más severa grado de inflamación y necrosis. Después de 30 días, ambos materiales provocaron reacción inflamatoria moderada. El período de ocho semanas mostró la menor grado severo de la inflamación en todos los grupos.
Conclusiones
Se concluyó que WMTA exhibe una respuesta tisular más favorable en comparación con Diaket que indujo reacción inflamatoria más severa que WMTA y el control.
Material electrónico complementario
La versión en línea de este artículo (doi:. 10 1186 /1472-6831-11-17) contiene material complementario, que está disponible para los usuarios autorizados
Antecedentes Un
. procedimiento quirúrgico periapical por lo general implica la resección del extremo radicular, preparación y sellado, utilizando un material de relleno del extremo radicular. El éxito de la cirugía puede depender de la capacidad de sellado del material de relleno extremo de la raíz para evitar la entrada de bacterias o sus subproductos, y también de su capacidad para proporcionar un entorno favorable para la regeneración y cicatrización de los tejidos perirradiculares [1, 2 ].
agregado de trióxido mineral (MTA) se desarrolló como un material de relleno del extremo radicular en Loma Linda University, California, EE.UU. [1]. Los principales compuestos en este material son silicato tricálcico, aluminato tricálcico, óxido tricálcico y óxido de silicato de [2]. In vivo e in vitro
estudios apoyan el uso potencial de este material como un material de relleno del extremo radicular [3-5]. Investigaciones anteriores también demostraron la capacidad de MTA para estimular tejido duro deposición [3, 6, 7], y su buena capacidad de sellado en comparación con otros materiales [3, 8-10]. Por otra parte, MTA se encontró ser bien tolerado y biocompatible [11-17], y reveló una respuesta del tejido periapical más favorable en comparación con amalgama, IRM, y Super EBA [4, 5, 18].
Diaket es un quelato de calcio reforzado con resina de polivinilo [19]. Se formuló inicialmente como un sellador de canal de la raíz cuando se mezcla en un polvo a la proporción de líquido de 1: 1. Tetsch, en 1986, documentó por primera vez el uso de Diaket como material de relleno del extremo radicular cuando se mezcla hasta obtener una consistencia más gruesa [20]. propiedades aceptables Diaket demostrado [21-23]. Se demostró un sellado superior en comparación a la amalgama [23], un potencial de curación favorable en perros [22], y una mejor respuesta de curación en comparación con gutta-percha [24].
Tanto Diaket y MTA se encontraron para promover la regeneración de tejido perirradicular . . Sin embargo, las propiedades de manipulación de Diaket se consideraron superiores a las de MTA [21] comentario El objetivo del presente estudio fue comparar la reacción del tejido conectivo rata para los materiales de relleno en dos finales de la raíz: trióxido mineral blanco se utilizaron agregada (WMTA) y Diaket.
Métodos Veinte
un macho, 5-6 meses de edad ratas Wistar albinas de 350 ± 50 g. cuidado de los animales se llevó a cabo de acuerdo con el Comité para el Cuidado y Uso de Animales institucional y el Consejo Canadiense de los Animales [25, 26]. El protocolo fue aprobado por la Universidad de Jordania de Ciencia y Tecnología Decanato de Investigación, y el Cuidado de Animales de la Universidad y el empleo. Se investigaron los siguientes grupos: Grupo 1
:. El grupo de control (tubos vacíos de dentina)
Grupo 2: Blanco agregado trióxido mineral (Dentsply, Tulsa Dental, Tulsa, OK, EE.UU.): perfil del Grupo 3:. Diaket , (3 M ESPE AG, Seefeld, Bayern, Alemania).
tubos dentina se preparan a partir de raíces de los dientes humanos de los dientes de una sola raíz en una longitud de 7 mm. Los canales se ampliaron utilizando ProTaper archivos (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suiza) y fresas de Gates Glidden (Dentsply Maillefer, Ballaigues, Suiza) con un espesor de la pared exterior de 0,5-1 mm. El foramen apical se ampliaron en un diámetro aproximado de 2 mm. Los tubos de dentina se regaron abundantemente con hipoclorito de sodio 3% y 18% de EDTA (ácido diamina-tetra-acético de etileno), (Ultra Dent, EE.UU.), se lavó con agua destilada, a continuación, en autoclave. Para cada animal, se utilizaron tres tubos, dos como portadores de los dos materiales ensayados y un tubo vacío como control.
WMTA se mezcló de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. Diaket se mezcló hasta obtener una consistencia (polvo a la proporción de líquido de 2: 1) más gruesa que las recomendaciones del fabricante, [21]. Los materiales se aplican en los tubos.
Los animales se anestesiaron usando un régimen que consiste en atropina (0,02 hasta 0,05 mg /kg), clorhidrato de ketamina (40 a 87 mg /kg), y clorhidrato de xilazina (5 a 13 mg /kg). Las pieles dorsales de los animales se afeitaron y desinfectadas con una solución de yodo 5%. Dos incisiones largas centímetro se hicieron en la parte posterior de cada animal, por lo menos 2 cm de distancia entre sí, utilizando un no. 15 hoja (Aesculap AG & Co. KG, Tutlingen, Alemania) en una cabeza con cola. La piel se reflejó y espacios subcutáneos se crearon mediante disección roma. Los tubos de dentina inmediatamente se implantaron en los espacios. La piel se cerró con sutura de seda 3/0.
Las evaluaciones se realizaron a los 7, 30, y 60 días después de la implantación quirúrgica. En cada periodo de evaluación, 7 animales se sacrificaron mediante una sobredosis de anestesia. La piel dorsal se rasuró y los tubos se escindió con el tejido conectivo circundante. Los especímenes extirpados se mantuvieron en solución de formalina al 10% durante 2 semanas. Después del procesamiento e inclusión de tejidos, se prepararon secciones seriadas de 6 micras de espesor y se tiñeron con hematoxilina y eosina. Las secciones fueron examinadas y evaluadas utilizando un microscopio óptico (Olympus, T-MDOB BX 40, Olympus Optical Co. LTD, Japón) a 40 ×, × 100, 400 × y aumentos. Para cada material, la suma y promedio de células inflamatorias (leucocitos polimorfonucleares (PMNs), células plasmáticas, linfocitos, macrófagos y células gigantes) y fibroblastos se determinó en diez áreas separadas en × 400 aumentos. El observador fue cegado a la fuente de tejido
Reacciones en el tejido se calificaron como:. 0, ninguna o pocas células inflamatorias (sin reacción); 1, menos de 25 células (de reacción suaves); 2, entre 25 y 125 células (reacción moderada); y 3, 125 o más células (reacción severa), [13, 27, 28]. Necrosis y /o supuración se clasificaron como "sí" o "no".
Los resultados se analizaron estadísticamente mediante las pruebas de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney para la comparación de la gravedad de la inflamación en los intervalos y de materiales.
Resultados
grupo control
en las muestras obtenidas a los 7 días, se observó el tejido de granulación vascular (Figura 1.A) que fue dominada por los PMN, células plasmáticas y linfocitos, con algunas células gigantes y los macrófagos. tejido de granulación inflamado que habían crecido en los tubos también se observó (Figura 1.b). A los 30 días, infiltrados de células inflamatorias leves, dominado principalmente por los linfocitos y las cápsulas fibrosas finas que rodean los tubos, se observaron (Figura 1.c). tejido de granulación inflamado también se observó dentro de los tubos, pero con menos infiltración inflamatoria (Figura 1.d). Al día 60, un par de infiltrados de células inflamatorias dispersas se observaron (Figura 1.e), junto a un aumento de la actividad fibroblástica y una cápsula fibrosa espesa. No se detectó necrosis. Figura 1 imágenes histológicas de infiltración de células inflamatorias en el extremo de los tubos implantados y crecimiento hacia el interior de los tejidos de granulación dentro de los tubos en grupos de MTA (tinción de hematoxilina-eosina) de control y. (A) altamente vascular, moderadamente inflamado tejido de granulación (G) en el extremo del tubo de dentina (D) en el grupo control a los 7 días; aumento original x 50. (b) el crecimiento de tejido de granulación inflamado (I) en el interior del lumen del tubo en el grupo de control a los 7 días. Espacio previamente ocupado por el extremo del tubo de dentina está representado por (S); aumento original x 100. (c) una cápsula fibrosa delgada (FC) que rodea el tubo de dentina vacío (D) a los 30 días; aumento original x 200 (d) el crecimiento de tejido de granulación inflamado (I) dentro de un tubo de vacío de la dentina (D) a los 30 días; aumento original x 200. (e) la inflamación muy leve observado en algunos casos del grupo de control a los 60 días, en la que los linfocitos (L) fueron las células predominantes; aumento original x 400. (f) angiogénesis activa con tejido de granulación inflamado en la zona en contacto con MTA a los 7 días. células gigantes multinucleadas con engullido MTA (GM); aumento original x 200. (g) Necrosis en el área adyacente al material de MTA (M) a los 7 días; aumento original × 200. (h) reacción inflamatoria leve en un espécimen de MTA a los 30 días; aumento original x 400. (i) Suppuration (SP) observada en el área adyacente al material de MTA (M) en el tubo a los 30 días; aumento original x 50.
Hay una diferencia estadísticamente significativa en la suma de células inflamatorias entre los tres períodos de prueba para el grupo de control (valor de P & lt; 0,05). El número de células inflamatorias era significativamente mayor para el 7-día que el grupo de 30 días.
WMTA grupo
En las muestras obtenidas a los 7 días, se observó necrosis rodeado por una angiogénesis activa y tejido de granulación moderadamente inflamado (Figura 1. h, g). El infiltrado se predominaba por PMNs, linfocitos, células plasmáticas, macrófagos y células gigantes. No se observaron reacciones inflamatorias similares en el día 30 que se caracteriza por necrosis y /o supuración, rodeados por un infiltrado inflamatorio moderado (figura 1.h, i). El aumento de la actividad fibroblástica y también se detectaron células gigantes escasos y macrófagos (Figura 2.a). La inflamación fue leve en el día 60, y dominado por linfocitos, macrófagos y células gigantes, con un aumento de la actividad fibroblástica. Además, se observó adyacente un material osteoide-como a la WMTA en día 60 (Figura 2.b) en una muestra. Figura 2 histológico imágenes de características de la infiltración celular y la reacción inflamatoria del tejido en el extremo de los tubos implantados en MTA y grupos Diaket (tinción de hematoxilina-eosina). (A) pocos macrófagos y células gigantes (G) observados en el grupo de MTA a los 30 días; aumento original x 400. (b) de material osteoide-como (OS) observada en el área adyacente al MTA (M) a los 60 días; aumento original x 100. (c) la necrosis por licuefacción severa y extensa o supuración (N) en la zona adyacente a Diaket el material (M) a los 7 días; aumento original x 100. (d) células gigantes (G) y los macrófagos en el tejido conectivo adyacente a Diaket a los 30 días; aumento original x 200. (e) la inflamación leve observado en la zona adyacente a Diaket (M) a los 60 días; aumento original x 100. (f) predominio de linfocitos en el grupo Diaket a los 60 días; aumento original x 50.
una diferencia estadísticamente significativa se encontró en la suma de las células inflamatorias entre los tres periodos de prueba para este grupo. La suma más alta de las células inflamatorias se registró para el grupo de 7 días y el más bajo para el grupo de 60 días. Sin embargo, no se encontraron diferencias significativas sólo entre el grupo grupo de 7 días y 60 días, y entre el grupo de 30 días y el grupo de 60 días.
Diaket grupo
En secciones obtenidas a los 7 días, por licuefacción extensa necrosis rodeada por tejido de granulación inflamado altamente vascularizado se detectó (Figura 2.c). Las células inflamatorias predominantes eran PMNs, células plasmáticas y macrófagos. A los 30 días después de la implantación, la reacción inflamatoria disminuyó con un aumento de células gigantes y los infiltrados de macrófagos (Figura 2.d). En el día 60, la inflamación era leve a moderada (Figura 2.e), y dominado por linfocitos y células plasmáticas (Figura 2.f). No se observó necrosis. El aumento de la actividad fibroblástica También se observó, pero no fue tan pronunciado como en los grupos de control y WMTA
Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre la suma de las células inflamatorias entre los tres periodos de prueba. (P & lt; 0,05). La única diferencia estadísticamente significativa se encontró era el que entre los periodos de 7 días y 60 días (P & lt; 0,05), con el período de 7 días que presenta el valor medio más alto para la suma de las células inflamatorias, seguido por el 30-día . entonces los períodos de 60 días
comparación entre los grupos página 7 días
Hubo diferencias estadísticamente significativas (KW = 7,78, p & lt; 0,05) en el número de células inflamatorias entre los tres grupos. La puntuación mediana de células inflamatorias en el grupo Diaket (puntuación media de 2) fue significativamente mayor que en el WMTA (mediana de puntuación de 1) y el grupo control (media de puntuación de 1) grupo (p & lt; 0,05). Se observó necrosis en todos los especímenes en el grupo Diaket y en tres especímenes en el grupo WMTA
30 días
Hubo diferencias estadísticamente significativas. (KW = 6,84, p & lt; 0,05) en el número de células inflamatorias entre los tres grupos . La puntuación de células inflamatorias mediana en el grupo Diaket (puntuación media de 2) fue significativamente mayor que en el grupo control (puntuación mediana de 1), (p & lt; 0,05). No se encontraron otras diferencias significativas. Se observó necrosis en un solo ejemplar en el grupo Diaket y un espécimen en el grupo WMTA
60 días
Hubo diferencias estadísticamente significativas (KW = 6,43, p & lt; 0,05). en el número de células inflamatorias entre los tres grupos . Las puntuaciones de células inflamatorias en el grupo Diaket (mediana de la puntuación de 1) fueron significativamente mayores que en el WMTA (mediana de la puntuación de 0) y el grupo control (media de puntuación de 0). Necrosis no se detectó en cualquier espécimen obtenidos 60 días después de la implantación.
Discusión
La respuesta histológica a los materiales de endodoncia implantados en el tejido conectivo subcutáneo de ratas proporciona una fuente preliminar de la información en su biocompatibilidad que es relativamente sencillo y adecuado para el análisis de rutina de los materiales de endodoncia [29, 30]. Los primeros experimentos en las pruebas de implantación involucrados inserción directa del material ensayado en los tejidos blandos de los animales experimentales [31, 32]. La desventaja de este método es que un área relativamente grande de material estaba en contacto con el tejido y, por lo tanto, la reacción inmediata podría ser grave. Por lo tanto, se recomienda la implantación del material de ensayo en el interior de un vehículo [12, 13]. Cuando se compara con la aplicación directa del material, este método ayuda a estabilizar el material en su lugar, y lograr una interfaz material tejido normalizado [13].
Algunos estudios anteriores utilizados de silicio [30], teflón [29, 31], y polietileno [13, 33]. En este estudio, los tubos de dentina se utilizaron para la implantación subcutánea de acuerdo con otros estudios previos, para hacer que la investigación actual más clínicamente relevante [12, 34]. Una desventaja del uso de raíces humanos como portadores es la dificultad de estandarización del tamaño de los tubos. Además, se puede producir una reacción inmunológica a las proteínas extranjeras [31]. Sin embargo, la reacción de los tubos vacíos de dentina estaba de acuerdo con los informes anteriores que encontraron que los tubos vacíos de dentina indujeron una leve inflamación y la formación de cápsulas fibrosas [12, 34]. Los tubos vacíos de dentina se utilizaron como control para excluir cualquier aumento en los recuentos de células inflamatorias causadas por la reacción a la dentina [7, 12].
Los materiales estudiados se utilizaron en el estado desarmado para imitar la situación clínica. WMTA es difícil de manejar, y esta es una de sus desventajas, ya que tiende a manchar y contaminar el área de trabajo. Por lo tanto, se practicó una meticulosa atención durante la colocación de WMTA en los tubos de dentina. En la situación clínica, WMTA tiene que ser manejado con cuidado para minimizar este problema.
La reacción observada en el grupo control fue de acuerdo con informes anteriores [12-14]. Hubo una disminución continua significativa en la respuesta inflamatoria acompañada de un aumento en la actividad fibroblástica. A pesar de los PMN predominan en el 7º día, se presentaron una media más baja en comparación con el recuento grupos Diaket y WMTA. Este valor medio se redujo significativamente a los 30 y 60 días, lo que indica que los tubos de dentina vacíos pueden haber inducido una reacción inflamatoria inicial. La respuesta inflamatoria a los 7 días puede ser debido a los efectos tóxicos de los materiales implantados, o para el trauma producido durante la colocación de los tubos, mientras que a los 30 y 60 días, la respuesta inflamatoria puede ser atribuido a los efectos acumulativos de la toxicidad de los materiales de prueba.
La reacción tisular a WMTA era comparable a los resultados de estudios anteriores [12-14]. Los resultados de siete días mostraron una reacción de cuerpo moderado y exterior que disminuyó a los 30 días y disminuyó significativamente a los 60 días, y fue acompañado por un aumento pronunciado en la actividad fibroblástica. Esto indica un aumento en el proceso de reparación y la tolerabilidad por el tejido conectivo. Además, el material osteoide similar observado en el día 60 es algo comparable a los resultados anteriores que describen la formación de distrófico calcificación [13].
Los principales compuestos presentes en MTA son silicato tricálcico, aluminato tricálcico, óxido tricálcico y óxido de silicato de [ ,,,0],2]. Después de la reacción con los fluidos del tejido, óxido de calcio produce hidróxido de calcio. El hidróxido de calcio se disocia posteriormente en Ca
+ y OH -. Los iones hidroxilo difundidos aumentar el pH y promover la alcalinización en los tejidos adyacentes, lo que favorece la curación [7]. Por otra parte, la biocompatibilidad de MTA también se atribuyó a su propensión a la liberación de calcio, y su capacidad para formar hidroxiapatita [35].
Diaket causó una reacción grave inicial, pero ambas de 30 y 60 días de resultados mostró que la reacción inflamatoria disminuido a una respuesta leve a moderada. Estas observaciones son similares a los resultados de una investigación anterior [31]. Por otra parte, se detectó una disminución significativa en el valor medio de la suma de las células inflamatorias en el día 60, acompañado de un aumento mínimo de la actividad fibroblástica.
Esto puede indicar que Diaket tiene una tendencia a inducir inflamatoria inicial más grave y aguda reacción con una extensa necrosis y /o supuración por licuefacción de WMTA. A los 30 días, los grupos WMTA y Diaket demostraron recuentos de células inflamatorias medias comparables. La gravedad reacción inflamatoria disminuyó significativamente en el día 60. Se obtuvieron resultados similares en un estudio en animales anterior a pesar de las diferencias en las metodologías expuestas en comparación con la actual investigación [21]. México La respuesta inflamatoria severa inicial al Diaket podría haber sido causado por la posible liberación inicial de los componentes materiales, y cuando hubo una disminución en la cantidad de estas sustancias lixiviables, la inflamación se redujo en gravedad y el material fue más tolerado por los tejidos.
Conclusiones
en conclusión, el inflamatoria inicial respuesta causada por WMTA fue más favorable que la respuesta provocada por Diaket. Sin embargo, con el paso del tiempo, hubo una reducción pronunciada en la severidad de la respuesta inflamatoria, y un aumento en la actividad fibroblástica en ambos materiales. Experimentos adicionales son necesarios para confirmar estas observaciones
abreviaciones
WMTA:. sobre White mineral trióxido agregado
EDTA:
etilendiamina-tetra- ácido acético
PMN:
leucocitos polimorfonucleares
Declaraciones
Agradecimientos y financiación
la investigación fue financiada por el decanato de investigación en Jordan Universidad de Ciencia y Tecnología de la subvención número 53/2006.
los autores originales presentados archivos de imágenes
a continuación se presentan los enlaces a los autores originales presentados archivos de imágenes. 'archivo original de la figura 1 12903_2010_185_MOESM2_ESM.pdf autores 12903_2010_185_MOESM1_ESM.pdf Autores archivo original para la figura 2 Conflicto de intereses México La autores declaran que no tienen intereses en competencia.
contribuciones de los autores
AW participó en el desarrollo de la metodología de la investigación, la asistencia en la preparación de las muestras, la redacción del manuscrito y el análisis estadístico. AM lleva a cabo el trabajo experimental, con la asistencia en la redacción del manuscrito y en el examen de los especímenes. HH participó en el desarrollo de la metodología de la investigación, y ha preparado y examinado las muestras. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final
