ABSTRACTTitle:. La eficacia de la clorhexidina sin alcohol en la reducción de los niveles de Streptococcus mutans
Objetivo:. Para comparar las propiedades antimicrobianas de clorhexidina sin alcohol con otros enjuagues bucales antimicrobianos
Métodos: Streptococcus mutans (cepa GS5), se cultivó en agar, y se resuspendieron en un medio tripticasa caldo de soja de cultivo estéril (TSB) suplementado con extracto de levadura. Cuatro experimentos únicos se llevaron a cabo añadiendo cada inóculo de la suspensión bacteriana a los antimicrobianos de prueba
Resultados:. Experimento 1: Crecimiento de S. mutans fue totalmente inhibida a 5% y 1% de las concentraciones libre de alcohol clorhexidina (AFC) y clorhexidina que contiene alcohol (CHX). El crecimiento bacteriano se produjo en todos los demás diluciones con el más notable en el 1% Biotene & registro; (OD max = 1.383 nm), seguido de 0,01% Biotene & registro; (OD max = 1,328). El tiempo de duplicación mayor fue de 0,01% CHX en 2,1013 h
Experimento 2:. El tiempo de generación y OD max fueron similares para todas las diluciones de los diferentes reactivos
Experimento 3: 5. Minuto corta exposición -term de CHX sin diluir inhibió el crecimiento de S. mutans. AFC inhibe el crecimiento de bacterias durante 6 horas. El diámetro exterior máximo y el tiempo de duplicación fueron 1,288 y 1,1213, respectivamente hr. El diámetro exterior máximo y el tiempo de generación de Biotene & registro; eran 0,891 y 1,5516, respectivamente hr
Experimento 4:. 5 minutos de exposición a corto plazo de CHX sin diluir y AFC inhibió el crecimiento de S. mutans. El crecimiento bacteriano se produjo en todos los demás diluciones con los más notables de toda su fuerza Biotene & registro; (OD max = 1,629), seguido de% de etanol 1 (OD max = 1,598). El tiempo de duplicación mayor era 5% de etanol a 1.706 hr
Conclusiones:.. Clorhexidina sin alcohol es eficaz para suprimir el crecimiento bacteriano de S. mutans y, por lo tanto, es una alternativa viable a la clorhexidina que contiene alcohol
INTRODUCTIONAntimicrobial soluciones de enjuague bucal se utilizan en muchas situaciones clínicas, tanto para fines profilácticos y terapéuticos (1). Más específicamente, enjuagues bucales han convertido en un procedimiento adyuvante importante para una buena higiene oral mecánica o en la prevención de infecciones posteriores a las bacterias de los procedimientos quirúrgicos intraorales o la inmunosupresión debido a la radiación a la cabeza /neck.1,4,5
< p> gluconato de clorhexidina (CHX), un agente antibacteriano de amplio espectro, es uno de los agentes antisépticos más utilizados en care.5 dental integral eficaces tanto contra los microorganismos Gram-positivos y Gram-negativas, hongos y algunos virus, ha sido demostrado que inhiben la formación de placa, reducir la inflamación gingival y prevenir caries.3,5 dental por otra parte, en el uso oral, CHX está libre de toxicidad sistémica, y la resistencia microbiana o alteraciones de la microbiota orales no occur.8,11 sin embargo, el prolongado uso de CHX es limitada debido al desarrollo de los dientes y la lengua decoloraciones extrínsecos, así como alteraciones en el gusto que reduzca la compliance.2,3,5,7,9,11 paciente por lo tanto, la mayoría de los odontólogos no recomendamos a largo -term uso diario de CHX como una boca-rinse.11 gingival y la descamación de la mucosa dolorosa también se han reportado en cases.1,5 severa
la literatura actual apoya el uso diario de 0.12% o 0.2% CHX como antiséptico agentes. Sin embargo, un factor limitante adicional es que se utilizan rutinariamente clorhexidina enjuagues bucales contienen alcohol, lo que puede causar dolor, irritación y ser perjudicial para los pacientes con mucositis, los pacientes sometidos a radioterapia de cabeza /cuello, los niños pequeños, pacientes inmunocomprometidos, o alcohólicos en recuperación. efectos potencialmente adversos de CHX que contiene alcohol de enjuague bucal condujo a la formulación de una nueva 0,12% CHX sin alcohol (AFC) boca-rinse.1,2,11
Biotene & registro; es una boca de enjuague libre de alcohol que puede mejorar muchos de los síntomas de la xerostomía inducida por radiación. Actúa mediante la producción de un sistema de enzima antimicrobiana en la cavidad oral que penetra en las paredes celulares de las bacterias formadoras de placas, la destrucción de ellos sólo gingival a la gumline.12 Este sistema enzimático se compone de proteínas de defensa salival humanos innatos; lisozima, la lactoferrina y la peroxidasa. La lactoferrina es una glicoproteína de fijación del hierro que muestra una actividad bactericida contra una variedad de bacterias en forma libre de hierro, apo-LF, y bacteriostático través sequestration.6,10 hierro
Tanto AFC y Biotene & registro; son agentes antimicrobianos disponibles comercialmente que se utilizan para mejorar la higiene oral y prevenir la infección bacteriana. Sin embargo, pocos estudios se han centrado en la eficacia de la AFC como un antimicrobiano de enjuague bucal viable.
El objetivo de esta investigación fue comparar las propiedades antimicrobianas de gluconato de clorhexidina sin alcohol con otros enjuagues bucales antimicrobianos.
Métodos y materiales
especies de bacterias ópticos de medidas de densidad:. A medida que crecen los microorganismos, que aumentar la turbidez de su medio de crecimiento Mediante la medición de la turbidez de este medio a través del tiempo, una curva de densidad óptica se pueden generar. La curva refleja el crecimiento (aumento de la concentración) del organismo de interés en BIOSCREEN PREPARACIÓN:. En el primer experimento cuatro diluciones, 5%, 1%, 0,1% y 0,01% en TSB, cada uno de AFC, CHX y Biotene & registro; fueron hechos. Las mismas diluciones se hicieron con agua destilada como control. Los inóculos de la suspensión bacteriana se añadieron a los reactivos diluidos y se agitan brevemente. El segundo experimento probó la exposición a corto plazo de los dos grados de dilución, 5% y 1% en TSB, cada uno de AFC, CHX y Biotene & registro ;. Una dilución de 5% se hizo con agua destilada como control. Inóculos (1000 UL) de la suspensión bacteriana se centrifugaron durante 1 minuto a 13 ~ 000 rpm. Los reactivos de ensayo (1000 UL) A continuación se añadieron al sedimento bacteriano y vortex. Todas las diluciones se dejaron fijar a temperatura ambiente durante 30 minutos. A cada uno se centrifugan a continuación, seguido de la eliminación de reactivos, lavado de MTSB, vortex y centrifugar. El sedimento formado se suspendió en 1000 uL MTSB y se agitó Los reactivos en el tercer experimento fueron sin diluir (100%) las soluciones de AFC, CHX, Biotene & registro.; y agua destilada. En el cuarto experimento eran soluciones diluidas de la AFC, CHX, Biotene & registro; y agua destilada y cuatro diluciones, 1%, 5%, 11,6% y 15%, cada una de alcohol. En ambos ensayos inóculos (1000 UL) de la suspensión bacteriana se centrifugaron durante 1 minuto a 13 ~ 000 rpm. Los reactivos de ensayo (1,000 uL) fueron entonces añadidos a la sedimento bacteriano, vortex y todas las diluciones se dejaron fijar a temperatura ambiente durante 5 minutos. A cada uno se centrifugan a continuación, seguido de la eliminación de reactivos, lavado de MTSB, vórtice y finalmente se centrifuga. Esto se repite entonces, completando un segundo lavado con MTSB, una centrífuga final y, por último, la suspensión en 1000 uL de MTSB La preparación Bioscreen final en los experimentos 1, 2, 3, y 4 consistían en partes alícuotas (200 uL) de las bacterias en combinación con los enjuagues bucales orales, AFC, CHX, Biotene y registro ;, agua destilada y TSB se coloca en los pocillos de nido de abeja (Fig. 2), proporcionando 90, 40, 25 y 45 muestras respectivamente. Cada alícuota se dispensó cinco veces, en diferentes pozos, para asegurar la uniformidad y la reproducibilidad. El aceite mineral, (0,1 ml) gotas fueron luego dispensó en cada pocillo para evitar la evaporación. Los pozos de nido de abeja se colocaron después en el analizador Bioscreen crecimiento microbiológico durante 24 horas a una amplia gama de longitudes de onda de banda de 420 nm a 580 nm para monitorizar los cambios en la densidad óptica. a continuación, se calcularon curvas de crecimiento y el tiempo de duplicación RESULTSExperiment # 1: crecimiento de S. mutans fue completamente inhibida a 5% y 1% concentraciones de AFC y CHX (figuras 3 & amp; 4).. Las bacterias murieron y no se observaron cambios significativos en la densidad óptica (DO). En las mismas condiciones, el crecimiento bacteriano se produjo en todos los demás diluciones (figuras 5 & Amp;. 6). El crecimiento más notable se produjo en el 1% Biotene & registro; dilución con un OD max = 1,383 y un tiempo de duplicación (Td) = 1,4734 hr. Esto fue seguido por el 0,01% Biotene & registro; dilución con un OD max = 1.328 y un hr Td = 1,3053. El tiempo de duplicación mayor fue de 0,01% CHX en 2,1013 h. Las diluciones de AFC y CHX enjuagues bucales que eran ineficaces en la inhibición de la proliferación de bacterias tenían un diámetro exterior de aproximadamente 1,3 nm, que era similar a la DO de Biotene & registro; y los controles Experimento 2:. El tiempo de generación y OD max fueron similares para todas las diluciones de los diferentes reactivos. El crecimiento se inició a aproximadamente dos horas para cada dilución. Parece que ha habido cierta inhibición del crecimiento en comparación con el experimento inicial de incubación, sin embargo, los reactivos no fueron efectivos, y las bacterias crecieron todavía (Fig. 7) Experimento 3:. La controles, H2O y TSB, no matar a las bacterias y tampoco lo hizo Biotene & registro; con un tiempo máximo de OD y la generación de 0,891 y 1,5516 h, respectivamente. La exposición a corto plazo de CHX sin diluir completamente el crecimiento inhibido de S. mutans. AFC inhibe el crecimiento de bacterias SM durante seis horas, momento en el que parecía que había crecimiento bacteriano. El diámetro exterior máximo y el tiempo de duplicación fueron 1,288 y 1,1213 h, respectivamente. El diámetro exterior máximo y el tiempo de generación de Biotene & registro; eran 0,891 y 1,5516 h, respectivamente (Figura 8) Experimento 4:. Cinco minutos de exposición a corto plazo de la AFC sin diluir y CHX inhibió el crecimiento de S. mutans. El crecimiento bacteriano se produjo en todos los demás reactivos y disoluciones de alcohol con el crecimiento más notable se produce en diluir Biotene & registro; (OD max = 1,629), seguido de% de etanol 1 (OD max = 1,598). El tiempo de duplicación mayor era 5% de etanol a 1.706 hr (Fig.9) DISCUSSIONThe observaciones y resultados en esta investigación sugieren que la clorhexidina sin alcohol es una boca de enjuague eficaz en la supresión del crecimiento de S. mutans . El primer experimento ensayó el crecimiento de bacterias en presencia de diferentes diluciones (5%, 1%, 0,1%, 0,01%) de los reactivos probados. Desde el primer experimento, se observó que tan bajo como 1% AFC y CHX fueron eficaces en la inhibición del crecimiento de las bacterias. Biotene & registro; no inhibió el crecimiento microbiano y el resultado de los controles, agua destilada y MTSB, fueron como se esperaba, no se produjo ninguna muerte. Después de la primera prueba, la segunda consistió en la investigación de los resultados de la exposición de las bacterias a 1% y 5% diluciones de enjuagues bucales antimicrobianos durante 30 minutos. tiempo de generación y OD max fueron similares para ambos diluciones de los diferentes reactivos. Por otra parte, no parece haber sido una inhibición del crecimiento en comparación con el experimento de incubación inicial como se retrasó el crecimiento de las bacterias. Sin embargo, los reactivos no fueron efectivos, y el S. mutans todavía crecieron. La intención para el tercer experimento fue simular una situación más clínica. El S. mutans fueron expuestos a los no diluidos enjuagues bucales antimicrobianos, AFC, CHX, Biotene y registro ;, y agua destilada durante 5 minutos. La CHX sin diluir que contiene alcohol inhibe completamente el crecimiento de S. mutans. Por el contrario, la AFC inhibe el crecimiento de bacterias durante 6 horas, momento en el que parecía que había un crecimiento de las bacterias. En este punto, la contaminación de otros microbiota se sospechó en la Conferencia Americana de enjuague bucal. Por esta razón, se repitió el experimento. Además, si es o no el alcohol era una variable de confusión debía ser determinado. Este cuarto ensayo demostró que después de la exposición de 5 minutos a no diluidos enjuagues bucales antimicrobianos y diferentes diluciones de alcohol no hubo crecimiento bacteriano en ya sea el reactivo AFC o el reactivo de CHX. Además, las diluciones de alcohol no inhibieron el crecimiento de los S. mutans Aunque el último ensayo demostró que no hay diferencia en la eficacia entre el AFC y CHX que contiene alcohol, son necesarios más estudios.; (1) para determinar la diferencia en la formulación y (2) los mecanismos que causan la inhibición de las bacterias entre la AFC y CHX que contiene alcohol; y clínicamente prueba y confirmar la consistencia de los resultados mostrados en este estudio. Los datos actuales sugieren que sólo hay un ensayo clínico que demuestra la eficacia de AFC con respecto a la inhibición de la placa. Los resultados de ese estudio fueron consistentes con éste En la comparación de Yokoyama y rsquo;. S estudio (2009), Biotene & registro; se encontró que era eficaz en la inhibición del crecimiento de actinomycetemcomitans Aggregatibacter, una especie diferente de bacterias. Sin embargo, en este proyecto de investigación fue ineficaz frente a S. mutans. Tal vez Biotene es eficaz contra las especies bacterianas que son principalmente anaeróbico y se encuentra debajo de la encía. Si este fuera el caso, se puede postular que Biotene sería mejor ser servido como un antibacteriano de enjuague bucal para la enfermedad periodontal, mientras que, CHX enjuagues bucales deben ser reservados principalmente para la prevención de caries. CONCLUSION1) Sin Alcohol la clorhexidina es eficaz en suprimir el crecimiento bacteriano de S. mutans y, por lo tanto, es una alternativa viable a la clorhexidina que contiene alcohol. 2) alcohol no contribuye a las propiedades antimicrobianas de Chlorhexidine.OH Rebecca Cohen, DDS, Paed Cert, FRCD (C), Clase de 2011; Profesor Asesor, Casey Chen, BDS, PhD, DDS Agradecimientos:. Dr. Casey Chen por su aliento y Jason Jee y Christine Hwang por su ayuda y apoyo. Este trabajo de investigación se ha preparado en cumplimiento parcial de los requisitos para la realización del Programa de Odontología Avanzada Pediátrica de la Facultad de Odontología Ostrow Herman de la USC. referencias1. SJ Bolanowski, Gescheider GA, Sutton SV. Relación entre el dolor oral y la concentración de etanol en los enjuagues bucales. J periodontal Res 30: 192-197, 1995. 2. Eldridege et al. La eficacia de un alcohol libre de enjuague bucal de clorhexidina como agente antimicrobiano. 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: las bacterias seleccionadas para este estudio se encuentra en la saliva por vía oral, las superficies de los tejidos blandos y dentro de la biopelícula dental; Streptococcus mutans (GS5 deformación)
el crecimiento de microorganismos pueden ser medidos por el Sistema de Análisis de la curva de crecimiento Automatizado Bioscreen C (Fig. 1). Bioscreen C es una incubadora /lector /agitador controlado por ordenador. Cuenta con 8 filtros que van desde 405 nm a 600 nm que incluye un filtro de banda ancha y utiliza una microplaca de nido de abeja para medir los cambios en la densidad en función del tiempo para producir curvas de crecimiento microbiológico óptica.
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Cuatro experimentos se llevaron a cabo las pruebas únicas 0,12% de clorhexidina sin alcohol (AFC), 0,12% de gluconato de clorhexidina (CHX), y Biotene y registro ;, orales enjuagues bucales. Todos los reactivos microbianas se filtraron con 0.22mm filtro de microporos. Se usó agua destilada como control negativo, mientras que un medio de cultivo estéril, caldo de soja tripticasa (TSB) suplementado con extracto de levadura, se utilizó como control positivo. S. mutans (SM deformación GS5) se cultivó en 1,5% de tripticasa de caldo de soja suplementado con 0,3% de extracto de levadura, 0,75% de Bacto-agar y inactivado por calor suero de caballo 2,5% y se incubaron durante 24 horas a 37 y el grado; C. MTSB frescas (900 uL) fue inoculado con la bacteria (100 uL) y las suspensiones se añadieron a los agentes microbianos y prueba de agua destilada.
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