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Las concentraciones de Candida determinaron después de la cultura enjuague bucal concentrado reflejan signos clínicos orales

 

Resumen Antecedentes

La candidiasis oral es una infección causada por un hongo tipo levadura llamada Candida
. Varios métodos se pueden utilizar para aislar Candida
de la cavidad oral. Sin embargo, es difícil de diagnosticar correctamente y satisfactoriamente candidiasis oral porque Actualmente no hay normas microbiológicas o de laboratorio basados ​​en muestras de la cavidad oral están disponibles. El objetivo de este estudio es establecer una prueba de laboratorio fiable para el diagnóstico de la candidiasis oral
Métodos
hisopo bucal, enjuague y enjuague muestras concentradas se obtuvieron de 200 pacientes ambulatorios consecutivos (103 varones y 97 pacientes de sexo femenino;. Edad media, 47,2 años, rango de edad, 9-89 años). Candida
colonias de muestras cultivadas se enumeraron para comparar las sensibilidades y especificidades de los métodos de muestreo anteriores, y se examinaron las asociaciones entre Candida
detección o la concentración y los signos clínicos orales.
Resultados
La media el número de colonias fueron 263 ± 590 UFC /hisopo para el método de hisopo, 2894 ± 6705 UFC /100 l para el método de enjuague y 9245 ± 19.030 UFC /100 l para el método de lavado concentrado. Los números promedio fueron 23 UFC /hisopo para el método de hisopo, 56 UFC /100 L para el método de enjuague, y 485 UFC /100 L para el método de lavado concentrado. Candida
se detectó en la cavidad oral de 33,5% y 52,0% de los pacientes externos por el método de la esponja y el enjuague concentrado, respectivamente. Candida
concentraciones determinadas por el enjuague concentrado estaban estrechamente relacionados con la gravedad de los signos clínicos orales. Conclusiones Los valores predictivos positivos del resto radicular, enrojecimiento de la mucosa bucal, prótesis, Glosalgia, sequedad de boca, y trastornos del gusto fueron predictores útiles de la candidiasis oral.
Toma de muestras de enjuague
concentrado es adecuado para la evaluación de la candidiasis oral, y Candida
concentraciones examinadas usando este método fuertemente asociada con los signos orales asociadas con Candida
infección.
Palabras clave
concentrado método Swab método de enjuague oral la candidiasis oral Candida
Antecedentes
la candidiasis oral es una común infección oportunista de la cavidad oral y es causada por la levadura de la Candida
género, principalmente Candida albicans
. Clínicamente se manifiesta de muchas formas, incluyendo pseudomembranosa (aguda /crónica), eritematosa (aguda /crónica), la placa-como (crónica), y nodular (crónica) formas [1]. Sin embargo, Candida
especies son frecuentemente aisladas de la cavidad oral en individuos sanos de todas las edades, con una prevalencia de 15-75% [2-4], por lo que es difícil diferenciar la candidiasis oral por parte del Estado por comensal detección microbiológica de la Candida
especies en la cavidad oral. Además, la candidiasis oral a menudo se ha diagnosticado sobre la base de los hallazgos clínicos, independientemente de si se ha detectado un Candida
especies. Por lo tanto, se requieren criterios microbiológicos adicionales para diagnosticar la infección oral Candida
correctamente.
Varios métodos se pueden utilizar para aislar Candida
de la cavidad oral, incluyendo frotis, hisopos de civil, las culturas de impresión, la toma de saliva entera, concentrado enjuagues bucales, y biopsias de la mucosa [5, 6]. De estos, el método de enjuague bucal concentrada es una de las técnicas más adecuadas para la determinación de Candida
concentraciones en la cavidad oral [7]; Sin embargo, este método es inadecuado para la detección de la Candida
sitio de la infección. Candida
concentraciones menores de 600 UFC /ml en muestras de enjuague concentrados han sido reportados para el transporte saludable comensal [8], mientras que los individuos con Candida
concentraciones superiores a 2-3 x 10 3 UFC /ml están predispuestos a la vía oral Candida
infección [7]. Sin embargo, White et al. informó de que los niveles de Candida
hasta 9 × 10 3 UFC /ml se observaron en los controles sanos y que estos niveles eran en ocasiones superiores a los de los pacientes con candidiasis oral [9].
La candidiasis oral se produce con frecuencia en individuos inmunocomprometidos, incluyendo los pacientes con VIH y SIDA, los receptores de trasplante de órganos, y los pacientes de quimioterapia [10]. De hecho, la enfermedad es a menudo la señal inicial de varias enfermedades de inmunodeficiencia, y su importancia clínica como un biomarcador se ha reconocido en los últimos años [11]. Sin embargo, es difícil de diagnosticar correctamente y satisfactoriamente candidiasis oral porque Actualmente no hay normas microbiológicas o de laboratorio basados ​​en muestras de la cavidad oral están disponibles. En este estudio, se examinaron las asociaciones entre los hallazgos clínicos orales y métodos de diferencias para la obtención de muestras de la cavidad oral para determinar qué criterios podrían ayudar a diferenciar la candidiasis oral de la presencia de Candida Hoteles en el estado comensal.
Métodos
Las muestras obtenidas de 200 pacientes ambulatorios consecutivos (103 varones y 97 pacientes de sexo femenino, la edad media, 47,2 años, rango de edad, 9-89 años) que consultó a un dentista en el hospital Aizawa de marzo 2011 a junio 2011 se participó en este estudio. También se utilizaron sin síntomas orales y signos clínicos de la candidiasis muestras de 30 voluntarios (rango de edad, 23-43 años 17 hombres y 13 mujeres; edad media, 30,1 años),. En todos ellos, un diente no estaba roto y los dientes cariados fueron tratados por completo. El consentimiento informado se obtuvo de todos los pacientes, los padres de los menores de edad, y los voluntarios. El Comité de Ética del Hospital Aizawa aprobado este protocolo de estudio con el número de homologación H22-14. Preparación de la muestra
y la determinación de UFC
Los 3 métodos de muestreo utilizados en el estudio fueron los siguientes.
Método Swab 1.
: los materiales se obtuvieron en muestras de secreciones de la superficie dorsal de la lengua con 5 golpes (alrededor de 2 cm de longitud) de un bastoncillo de algodón (Hakujuji Co Ltd. de Tokio, Japón), y luego la torunda se inoculó directamente en medio CHROMagar Candida (Kanto Chemical Co. Ltd., Tokio, Japón)
2. enjuague método
:. Después de una muestra se ha obtenido utilizando el método de hisopo, una muestra de la solución de enjuague oral se recogió enjuagando la boca con 10 ml solución salina estéril, que se celebró en la boca durante 5 s antes de ser recogida en un recipiente estéril. Cien microlitros de la solución de enjuague se inoculó en el medio CHROMagar Candida
3. Concentrado método de enjuague
:. La cavidad oral se enjuaga con 10 ml de solución salina estéril, y 7 a 10 ml se recogió como la solución de enjuague . La solución de aclarado concentrada se preparó por centrifugación que en 2300 × g
durante 20 min. Después de eliminar el sobrenadante, el sedimento celular se resuspendió en 500 l, que se inoculó en medio CHROMagar Candida en alícuotas de 100 mL. Candida
se contaron las colonias después de incubación a 37 ° C durante 48 h. Si hay
eran demasiados Candida
colonias para ser contados, la Candida
soluciones se diluyeron diez veces. Las asociaciones entre la presencia de Candida
especies y signos clínicos orales
A continuación, examinó las asociaciones entre el presencia de Candida
especies y signos orales clínicos utilizando muestras obtenidas mediante el método de hisopo y el método de lavado concentrado. Las asociaciones entre Candida
recuentos de colonias (Candida
concentraciones) y signos clínicos orales fueron entonces establecidos con muestras obtenidas mediante el método de lavado concentrado. La Tabla 1 muestra los signos clínicos orales utilizados en este estudio y sus grading.Table 1 signos clínicos orales y su clasificación

Grade


Signs

0

1

2

3


Glossalgia

Negative

Slight

Moderate

Severe


Taste trastorno
negativos
Leve Moderado

La severa
La boca seca
Negativo

Leve Moderado

La severa
enrojecimiento de la mucosa oral
La negativas
La Leve

Moderado severo

Enrojecimiento de la lengua
negativos
la Leve Moderado

la grave
lengua sucia
negativo
Leve Moderado

La severa
queilitis angular
negativo
unilateral
bilateral
ulceración
negativo
individual

múltiple
raíz residual
negativo
individual
múltiple

dentadura
negativo
unilateral
bilateral
evaluaciones orales
signos clínicos orales se clasificaron de la siguiente manera. Glosalgia se clasificó utilizando la Escala Analógica Visual (negativo: 0 mm; ligera: 1 mm; moderada: 30 mm; severa: más de 54 mm) [12, 13]. trastornos del gusto se clasificó utilizando los Criterios de Terminología Común para Eventos Adversos v3.0 publicado por el Instituto Nacional del Cáncer (negativo: ningún cambio en el sabor; ligera: Alteración del gusto, pero ningún cambio en la dieta; moderada: Alteración del gusto con el cambio en la dieta o nocivas o sabor desagradable; graves: pérdida del gusto) [14]. La boca seca se clasificó utilizando la clasificación proporcionada por Kakinoki et al. (Negativo: no seca; ligera: la saliva muestra la viscosidad; moderada: la saliva que muestra pequeñas burbujas en la lengua; severa: la lengua seca y sin viscosidad, poco o nada de saliva) [15]. Enrojecimiento de la mucosa bucal se clasificó utilizando la Guía Eilers oral Evaluación (negativo: no hay enrojecimiento de la mucosa oral; ligeras: localizado del área de enrojecimiento y sin ulceraciones; moderadas: enrojecimiento en toda la mucosa oral sin ulceraciones; graves: ulceraciones con o sin sangrado) [ ,,,0],16]. saburra
se calificó mediante las puntuaciones visuales desarrollados por Kojima et al. (Negativo: menos de 1/3 de la lengua ligeramente recubierto; ligera: aproximadamente 2/3 de la lengua ligeramente recubiertos o cerca de 1/3 de la lengua grueso recubrimiento; moderada: aproximadamente 2/3 de la lengua densamente recubierto; severa: . más de 2/3 de la lengua densamente recubierto [17] el enrojecimiento de la lengua se calificó de manera similar (negativo: menos de 1/3 de la lengua que muestra un ligero enrojecimiento, ligera: aproximadamente 2/3 de la lengua que muestra un ligero enrojecimiento o alrededor 1/3 de la lengua mostrando un fuerte enrojecimiento; moderada: aproximadamente 2/3 de la lengua mostrando un fuerte enrojecimiento; severa:. más de 2/3 de la lengua mostrando un fuerte enrojecimiento)
la determinación de los límites normales de transporte comensal saludable
examinamos 30 voluntarios sin signos clínicos de candidiasis orales para la presencia de Candida
especies. Se utilizó el más alto recuento de colonias obtenido a partir de su bastoncillo y muestras de enjuague concentradas como el umbral para la candidiasis oral distintiva del estado comensal oral de Candida
especies. La Candida
relación de detección, se determina entonces las asociaciones entre los signos clínicos orales y Candida
detección, y las asociaciones entre los signos clínicos y el número de Candida
colonias obtenidas utilizando el método de esponja y el método de lavado concentrado. La sensibilidad y especificidad de cada signo clínico fueron examinados cuando se detectaron Candida
especies.
El análisis estadístico se utilizó el
χ página 2 de prueba para determinar la significación de la diferencia entre las tasas de Candida positivo
detección utilizando el método de hisopo bucal y el método de enjuague bucal concentrado. Los valores de la mediana del número de Candida detectado
que se obtuvieron de individuos idénticos se compararon mediante la no paramétrica de Wilcoxon firmado prueba de rangos. La importancia de las relaciones entre la mediana de Candida
concentraciones y los grados de cada signo clínico por vía oral se analizó mediante la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis
La significación estadística se estableció en p & lt
.; 0,05 para todos los métodos de análisis. Además, se utilizó la prueba de Bonferroni para adoptar de comparación múltiple. Todos los análisis estadísticos se realizaron con el programa SPSS versión 22 (SPSS, Chicago, IL, EE.UU.).
: Resultados de la A fin de establecer los métodos necesarios ante todo el análisis, se realizó una prueba piloto en las primeras 10 muestras . Los recuentos de colonias obtenidas a partir de los primeros 10 pacientes ambulatorios utilizando el hisopo, enjuague, y los métodos de enjuague concentrados se muestran en la Fig. 1. La mediana y rango intercuartil eran 23 CFU (rango intercuartil, de 3 a 96 UFC) /hisopo para el método de hisopo, 56 CFU (rango intercuartil del 11 al 900 CFU) /100 L para el método de enjuague, y 485 UFC (intercuartil gama, desde 210 hasta 6.981 CFU) /100 l para el método de aclarado concentrada en los primeros 10 pacientes ambulatorios. Los primeros 10 pacientes ambulatorios se ensayaron usando los tres métodos; sin embargo, se utilizó el método de lavado concentrada para exámenes posteriores, ya que cedió más de Candida
colonias. Los recuentos medianos de la Candida
colonias obtenidas utilizando el método de lavado concentrada fueron significativamente más altos que los obtenidos usando los otros dos métodos, respectivamente (p Hotel & lt; prueba de 0,01, Wilcoxon de los rangos con la prueba de Bonferroni). El método de lavado concentrado fue la más sensible, ya que podría detectar Candida
especies cuando el método de hisopo o el método de enjuague no lo hicieron. Por lo tanto, entenderse que el método de lavado concentrado era apropiado para los exámenes posteriores. Higo. 1 Comparación de la sensibilidad del método de hisopo, el método de aclarado, y el método de aclarado concentrado (n
= 10). Los puntos que representan datos de un mismo paciente están conectados por líneas
Hemos identificado presuntamente Candida
especies del color de las colonias crecidas en CHROMagar Candida. Utilizando este método, se observaron los siguientes perfiles de Candida
en 68 pacientes, 12 pacientes, uno de los pacientes, nueve pacientes, siete pacientes, cinco pacientes, uno de los pacientes, y uno de los pacientes, respectivamente: C. albicans
, C. tropicalis
, C. glabrata
, C. albicans
+ C. glabrata
, C. albicans
+ C. tropicalis
, C. albicans
+ C. glabrata
+ C. tropicalis
, C. albicans
+ C. krusei
+ no identificados Candida
especies, y C. glabrata
+ C. tropicalis
+ sin identificar Candida
especies. No hubo diferencias significativas en los signos clínicos orales entre los 68 pacientes con C. albicans
y el 12 con C. tropicalis
. Las tasas de detección
y los recuentos de colonias obtenidas por el método de esponja y el método de enjuague bucal concentrado se muestran en la Tabla 2. Candida
especies se detectaron en la cavidad oral en 67 de 200 pacientes (33,5%) por el método de esponja y en 104 de 200 (52%) por el método de aclarado concentrado. El recuento de colonias CFU promedio fue de 7 (rango intercuartil, de 2 a 37 UFC) /hisopo para el método de hisopo y 141 UFC (rango intercuartil, del 14 al 1001 CFU) /100 L para el método de lavado concentrado. Los ratios de detección (p Restaurant & lt; 0,01, χ
2 pruebas) y recuentos de colonias (p Restaurant & lt; 0,01, Wilcoxon-rank test) obtenidos por el método de lavado concentrada fueron significativamente mayores que los obtenidos utilizando los method.Table 2 las tasas de detección de frotis y recuentos de colonias para la torunda y muestras de enjuague concentrados de pacientes (n = 200
)
* χ página 2 de prueba (p Hotel & lt; 0,01) ; ** Signo de Wilcoxon-rank test (p Hotel & lt; 0,01)
asociaciones entre los signos clínicos orales y Candida
detección utilizando el método de hisopo se resumen en las Tablas 3 y 4. Cuando Candida
se detectó usando el método de hisopo, la sensibilidad de la lengua sucia, sequedad de boca, dentadura, enrojecimiento de la lengua, y la raíz residual fueron 41.8, 46.3, 40.3, 34.3 y 29.9%, respectivamente, y las especificidades de enrojecimiento de la mucosa oral, queilitis angular , raíz residual, Glosalgia, trastornos del gusto, de la dentadura, y ulceración fueron 97,7, 99,2, 92,5, 94,0, 93,2, 88,0, y 92,5%, respectivamente. Los valores predictivos positivos del resto radicular, enrojecimiento de la mucosa bucal, prótesis, Glosalgia, sequedad de boca, y trastornos del gusto fueron 66.7, 66.7, 62.8, 52.9, 54.4 y 35.7%, respectively.Table 3 Índices de signos clínicos y la detección orales de Candida fotos: por el método de hisopo
Asociación entre signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de hisopo

Candida

P-valor

signos clínicos orales gratis (+) gratis (-) gratis (χ
2 test)


Glossalgia

(+)

9

8

0.08


(−)

58

125


Taste disorder

(+)

5

9

0.85


(−)

62

124


Dry mouth

(+)

31

26

<0.01


(−)

36

107


Redness de la vía oral mucosa

(+)

6

3

<0.05


(−)

61

130


Redness del tongue

(+)

23

25

<0.05


(−)

44

108


Coated tongue

(+)

28

42

0.15


(−)

39

91


Angular cheilitis

(+)

2

1

0.22


(−)

65

132


Ulceration

(+)

5

10

0.98


(−)

62

123


Residual root

(+)

20

10

<0.01


(−)

47

123


Denture

(+)

27

16

<0.01


(−)

40

117


Cuadro 4 Índices de signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de hisopo
sensibilidad, especificidad y valor predictivo positivo entre los signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de hisopo

signos clínicos orales
Sensibilidad Especificidad

valor predictivo positivo
Glosalgia
13,4%

94,0% 52,9%

trastorno del gusto
7,5%
93,2% 35,7%


La boca seca
46,3%
80,5% 54,4%

enrojecimiento de la mucosa oral

9,0%
97,7% 66,7%

Enrojecimiento de la lengua
34,3% 81,2%

47,9%
recubierto lengua
41,8% 68,4%

40,0%

queilitis angular
3,0%
99,2% 66,7%

ulceración
7,5%

92,5% 33,3%

raíz residual
29,9% 92,5%

66,7%

dentadura

40,3
88,0% 62,8%

Federaciones de entre los signos clínicos orales y Candida
detección utilizando el método de lavado concentrado se resumen en las Tablas 5 y 6. Cuando Candida
se detectó utilizando el método de lavado concentrada, la sensibilidad de la lengua sucia, sequedad de boca, dentadura, enrojecimiento de la lengua, y la raíz residual fueron 45.2, 42.3, 34.6 , 29.8 y 26.0%, respectivamente, y las especificidades de enrojecimiento de la mucosa oral, queilitis angular, raíz residual, Glosalgia, trastornos del gusto, de la dentadura, y ulceración fueron 99,0, 99,0, 96,9, 96,9, 95,8, 92,7 y 91,7% , respectivamente. Los valores predictivos positivos del resto radicular, enrojecimiento de la mucosa bucal, prótesis, Glosalgia, sequedad de boca, y trastornos del gusto fueron 90,0, 88,9, 83,7, 82,4, 77,2 y 71,4%, respectively.Table 5 Índices de signos clínicos y la detección orales de Candida fotos: por el método de lavado concentrada
Asociación entre signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de lavado concentrada

Candida

P-valor

signos clínicos orales gratis (+) gratis (-) gratis (χ
2 test)


Glossalgia

(+)

14

3

<0.01


(−)

90

93


Taste disorder

(+)

10

4

0.13


(−)

94

92


Dry mouth

(+)

44

13

<0.01


(−)

60

83


Redness de la vía oral mucosa

(+)

8

1

<0.05


(−)

96

95


Redness del tongue

(+)

31

17

<0.05


(−)

73

79


Coated tongue

(+)

47

23

<0.01


(−)

57

73


Angular cheilitis

(+)

2

1

0.60


(−)

102

95


Ulceration

(+)

7

8

0.66


(−)

97

88


Residual root

(+)

27

3

<0.01


(−)

77

93


Denture

(+)

36

7

<0.01


(−)

68

89


Tabla 6 Índices de signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de lavado concentrada
sensibilidad, especificidad y valor predictivo positivo entre los signos clínicos orales y detección de Candida fotos: por el método de lavado concentrada

signos clínicos orales
Sensibilidad Especificidad

valor predictivo positivo
Glosalgia
13,5%
96,9% 82,4%

trastorno del gusto
9,6%
95,8% 71,4%

La boca seca
42,3% 86,5%

77,2%
enrojecimiento de la mucosa oral

7,7%
99,0% 88,9%

Enrojecimiento de la lengua
29,8% 82,3

% 64,6%
lengua sucia
45,2% 76,0%

67,1%

queilitis angular
1,9%
99,0% 66,7%

ulceración
6,7%

91,7% 46,7%

raíz residual
26,0% 96,9%

90,0%

dentadura
34,6% 92,7%

83,7%

las diferencias entre los grados de cada signo clínico bucal y el número de colonias obtenidas utilizando el método de hisopo se muestran en la Tabla 7. alta Candida
recuentos se asociaron significativamente con la boca seca. Las diferencias entre los grados de cada signo y concentraciones de colonias orales clínicos obtenidos con el método de lavado concentrado se muestran en la Tabla 8. Alta Candida
recuentos se asociaron significativamente con la boca seca, enrojecimiento de la lengua, lengua sucia, y denture.Table 7 las diferencias entre los grados de cada signo clínico bucal y Candida
números por el método de hisopo
signos clínicos orales
Grado


0
1
2
3
P *

Glosalgia

Mediana
0
1
0
6,5
0,068
(n
)
183
9
6
2
trastorno del gusto

La mediana
0
0 0

116
0,282

(n
)
186
9
4
1
La boca seca La mediana

0
0,5
6
98
& lt; 0,001
gratis (n
)
143
36
20
1

El enrojecimiento de la mucosa oral
La mediana
0
24
0 0

0,015

(n
)
191
8
1
0

Enrojecimiento de la lengua
la mediana
0 0

36,5
0

0,002
(n
)
152
40
8
0

Coated lengua
La mediana
0
0 0

7

0.138
(n
)
130
57
12
1
queilitis angular
La mediana
0
58
3
NAb
0,402
(n
)
197
2
1