Resumen Antecedentes
Francia El propósito de este estudio in vitro en-fue investigar el potencial de la eliminación de la biopelícula en las regiones interproximales de los dientes utilizando interválica la limpieza con un irrigador oral o un cepillo de dientes sónico.
Métodos
biopelículas de tres especies (Streptococcus mutans
(OMZ 918), Streptococcus oralis
SK 248 (ZMO 60), Actinomyces naeslundii gratis ( OMZ 745)) se cultivaron en discos de hidroxiapatita durante 3 días en medio de cultivo. Cada 24 h, las muestras se incubaron durante 15 min en una solución de resazurina (es decir, medio de cultivo y 10% v /v AlamarBlue®) para medir la actividad metabólica con un espectrofotómetro de fluorescencia en unidades de fluorescencia relativa (RFU) en la línea base. A continuación, las muestras fueron fijadas en dispositivos de sujeción interproximales y se sometieron a tratamiento con un irrigador oral (WF; Waterpik® Sensonic WP-100E), un cepillo de dientes sónico activa (WPA), o un cepillo de dientes sónico inactiva (WPI; Waterpik® Sensonic SR-3000E) durante 10 s (n =
18 /grupo). biopelículas no tratados sirvieron como controles (CO). Después del tratamiento, se volvió a medir la actividad bacteriana, y las muestras se volvieron a cultivar en medio fresco durante 24 h hasta el próximo procedimiento de limpieza. En total, la limpieza se repitió en intervalos de tres días de tratamiento (d1, d2, d3). Después de d3, se tomaron imágenes de SEM (n =
8) y se midió CFU (n
= 3). La actividad metabólica se analizó para cada disco separado, los valores de RFU se promediaron para d1 para comparar la estabilidad inicial biofilm, y se compararon las proporciones de los valores basales y post-tratamiento. Los resultados se analizaron mediante ANOVA con la prueba post-hoc de Scheffé o Kruskal-Wallis con post-hoc test de Mann-Whitney.
Resultados
RFU-valores de línea de base mediana de d1 dieron lugar a 7.821,8 RFU (rango intercuartil = 5.114,5) . Mayor reducción de la actividad metabólica se registró de manera significativa para el irrigador oral que se usa durante 10 s (actividad residual por día D1: WF 17,9%, WPA 58,8%, WPi 82,5%, CO 89,6%; d2: WF 36,8%, WPA 85,2%, WPi 82,5%, 90,0% de CO; d3:. WF 17,2%, WPA 79,6%, 96,3% WPi, CO 116,3%). imágenes de SEM de las muestras no tratadas (CO) y las muestras tratadas con el cepillo de dientes sónico (WPA y IPM) mostraron grandes cantidades de biofilm, mientras que los especímenes de irrigadores orales tratadas (WF) revelaron apenas ninguna bacteria. datos CFU confirmaron las graduaciones entre los grupos.
Conclusiones
de limpieza de las regiones interproximales logra más éxito con un irrigador oral en comparación con el uso de un cepillo de dientes sónico. (350/350 palabras)
Palabras clave
alamarBlue eliminación ensayo intervallic biofilm oral interproximal sistema de riego material complementario de Sonic cepillo de dientes electrónico biopelícula
La versión en línea de este artículo (doi:. 10 1186 /s12903-015- 0079-6) contiene material complementario, que está disponible para los usuarios autorizados.
Antecedentes
caries y la periodontitis son causadas por biopelículas bacterianas, que se acumula en las superficies de los dientes y los tejidos blandos de la boca. Como la mayoría de los dispositivos de higiene oral no alcanzan suficientemente todos los nichos y ángulos en la cavidad oral mecánicamente, las regiones interproximales son a menudo sólo afectados por las propiedades de suspensión de pasta de dientes y de las fuerzas hidrodinámicas producidas durante el cepillado de dientes. Para determinar los efectos hidrodinámicos más altos, muchos estudios investigaron el efecto de dientes sónico y manual de cepillado en las biopelículas, así como las diferencias dentro de diferentes tipos de cepillos de dientes sónicos. Dependiendo del tipo de los cepillos de dientes sónicos ', cepillos de dientes de lado a lado resultan más a menudo en una mayor reducción de la biopelícula del 50%, mientras que los cepillos de dientes multidimensionales eliminan menos de biopelículas [1-3]. Comparando diferentes de lado a lado de los cepillos de dientes sónicos entre sí muestra diferencias significativas entre los modelos oscilan entre el 9 y el 80% [4]. Sin embargo, hasta ahora, la mayoría de las investigaciones sobre el llamado 'sin contacto eliminación de biofilm' no se llevaron a cabo utilizando dispositivos interproximales, pero por ejemplo, cepillos de dientes sónicos, instalados con distancias definidas directamente ajustadas hacia el centro de la superficie del disco revestido de biopelículas [3-7]. Usando este enfoque, las fuerzas hidrodinámicas, formados por los dispositivos orales tienen acceso directo a la superficie de la biopelícula y huelga, dependiendo de la distancia, con plena intensidad. Aunque la descripción de un enfoque de cepillado sin contacto, todavía podría diferir de situaciones interproximales reales. Adams et. al [1] investigó el efecto de la eliminación de una sola especie-biopelícula utilizando un modelo interproximal con varias distancias de las puntas de las cerdas. El análisis de los emergentes velocidades de burbuja de los diferentes cepillos de dientes sónicos, estimaron valores de esfuerzo de cizallamiento entre 0,5 y 0,9 Pa, lo que resulta en la reducción de biofilm hasta 57% para el lado-a-lado y 16% para los cepillos de dientes oscilantes-rotación en una distancia de 0 - 5 mm. Frey (2012) desarrolló un dispositivo de dientes interproximal con un sensor de tensión de corte integrado y se analizó la tensión de cizallamiento en distancias interproximales de 0,2 mm utilizando diferentes cepillos de dientes de lado a lado [8]. Dependiendo del tipo de cepillo de dientes y su modo de acción, se midieron los valores de tensión de cizallamiento de hasta 10 Pa. Sin embargo, los valores de esfuerzo cortante más pronunciadas con una mayor eliminación de biopelículas pueden ser evaluados por un mayor flujo de líquido producido por los sistemas de irrigación oral (SRO). Los estudios que investigan el uso de chorros de agua dentales indicaron mediadores proinflamatorios reducidos, como la IL-1ß y PGE
2 y la eliminación del biofilm de placa salivar más del 99%, independientemente de la punta del chorro de agua que se utiliza [9-11]. Mientras ORS se analizaron principalmente en ensayos clínicos, la determinación del resultado en la reducción de la hemorragia, la gingivitis y la biopelícula de placa, eliminación de biofilm interproximal no se investigó aún [12, 13].
Por lo tanto, el objetivo de este estudio in vitro en-era investigar el efecto de un irrigador oral y un cepillo de dientes de lado a lado en múltiples especies de eliminación de biofilm utilizando un dispositivo de dientes interproximal. Por otra parte, los ciclos de tratamiento que utilizan las sales de rehidratación oral o Cepillo dental sónico se repiten en intervalos de 24 h para simular y analizar el efecto de la repetición de patrones de higiene oral.
Métodos
La formación de biopelículas bacterianas
cepas se obtuvieron del Instituto para la administración oral biología, Sección de Microbiología Oral e Inmunología general, Universidad de Zürich, Zürich, Suiza. Antes de la formación de biopelículas, las cepas de Streptococcus mutans (
ZMO 918, oralis
ZMO 607, Actinomyces Naeslundii
ZMO 745) se obtuvo a partir de cultivos previos sembró sobre agar sangre Columbia ovejas placas (CSBA) (bioMérieux, Marcy l 'Etoile, Francia). Las colonias se propagan planctónica en un sustrato compuesto de 30% de solución de saliva y 70% modificado medio fluido universal (Mfum) [14] por separado en un agitador a 37 ° C en frascos utilizando gas-Paks para crear condiciones anaeróbicas (anaer Genbox y anaer GENbag , bioMérieux, Marcy l'Etoile, Francia). Por lo tanto, saliva fresca se obtuvo por un donante sano y se centrifugó dos veces durante 30 min por 13.400 rpm. Tras el dictamen del Comité de Ética del Cantón de Zurich, Suiza, no se requiere la aprobación ética para la donación de la saliva como se explica más arriba (n. 0324/2013 y no. 50/14). El sedimento se retira cada vez y el sobrenadante restante se diluyó 1: 2 en cloruro de sodio (0,9% NaCl) antes de la filtración estéril (filtros syrenge TPP con 0,2 micras poros, Faust, Schaffhausen, Suiza). La solución resultante se utilizó saliva en todos los experimentos. FUM, un medio de caldo de triptona-levadura basado bien establecida fue descrita por Loesche et al. [15]. FUM contenía (por litro de agua destilada): 10 g de triptona, 5 g de extracto de levadura, 3 g de glucosa, 2 mg de hemina, 1 mg de menadiona, 0,5 g de hidrocloruro de cisteína, 0,1 g de ditiotreitol, 2,9 g de 0,9% de NaCl, 0,5 g de Na 2CO 3, 1 g de KNO 3, 0,45 g de K 2HPO 4, 0,45 g de KH 2 PO 4, 0,9 g de (NH 4) 2SO 4, y 0,188 g de sulfato de magnesio 4 * 7h20. Fue modificada completándolo /l de tampón de Sørensen 67 mmol a un pH final de 7,2. La glucosa se reemplazó por 3 g de una mezcla 1: 1 de la glucosa y la sacarosa. La modificación utilizada en este estudio se adoptó a partir de los protocolos de Zurich biofilm [14]. Después de aproximadamente 6-7 h las soluciones bacterianas se ajustaron a la densidad óptica (DO550) de 1 y se mezclaron en un tubo como inóculo. Para cuantificar los inóculos por ml, unidades formadoras de colonias (CFU) se sembraron en placas de CSBA y se incubaron anaeróbicamente en frascos utilizando gas-Paks (t = 2 d). Mientras tanto, los discos de hidroxiapatito sinterizado estériles (Ø 5 mm, Clarkson Chromatography los productos, South Williamsport, EE.UU.) se incubaron en 800 l de solución de no estimulado saliva durante 4 horas a una agitación suave para formar una película (100 rpm a temperatura ambiente) . Para la formación de biopelículas, los discos peliculares recubiertos se colocaron entonces en nuevas placas de cultivo celular de poliestireno de 24 pocillos y se incubaron con 1 ml de los inóculos preparados durante la agitación suave durante 24 h en frascos a 37 ° C usando gas-Paks (anaer Genbox y GENbags anaer, bioMérieux, Marcy l'Etoile, Francia). El medio se actualiza todos los días antes de los procedimientos de tratamiento y directamente después del tratamiento mediante la transferencia de las muestras en las nuevas placas llenos de medio fresco (solución de saliva 30% + 70% Mfum). El pH se controló a diario en el medio durante la noche directamente después del primer cambio de medio utilizando un medidor de pH (Mettler-Toledo Fácil Cinco, Mettler-Toledo AG, Schwerzenbach, Suiza).
tratamiento
Las muestras se dividieron en cuatro grupos. Tres experimentos independientes se realizaron para obtener n =
18 animales cada uno (primer experimento n = 4
, segundo
n = 6, último experimento n
= 8 animales cada uno). Cada experimento consistió en tres días de tratamiento (d1, d2, d3). Antes de cada tratamiento, se realizaron mediciones de la actividad metabólica de obtener valores de línea de base para cada muestra. A continuación, las muestras se colocaron cuidadosamente en un dispositivo interproximal con 2 muestras en una distancia de la cara de 0,5 mm a cara (Fig. 1). El dispositivo de cepillado de dientes eléctricos, fue construido en una cooperación entre el Instituto de Dinámica de Fluidos, ETH Zürich y el Departamento de Odontología Preventiva, Periodoncia y Cariología de la Universidad de Zurich, Suiza. Para experimentación, 25 ml de agua de 36 ° C se pipeteó en el dispositivo para cubrir las regiones interproximales y las muestras. Para la WF-grupo, el irrigador oral (Waterfloss, Waterpik® Sensonic WP-100E) se ajustó mediante el JT-100E clásico Jet punta en un ángulo de 90 ° hacia la región interproximal como se describe en la información del fabricante. El control de la presión se colocó en el nivel 10 (la más alta presión de agua) y se activa durante 10 s. Después, las muestras se tomaron cuidadosamente desde el dispositivo interproximal y restauradas en placas con 0,9% de NaCl. Para el WPA-grupo, el cepillo de dientes sónico (Waterpik® Sensonic SR-3000E) se ajustó en el dispositivo usando la cabeza del cepillo norma correspondiente con una carga de la cabeza del cepillo interproximal en la región de & lt; 0,9 N, medida para cepillos de dientes sónicos (carga total de 70 ± 5 g) [2, 16]. El cepillado se llevó a cabo durante 10 s en condiciones estáticas. Para las muestras del IPM-grupo, los procedimientos se repitieron para los cepillos inactivadas (APAGAR). Las muestras sin tratamiento se utilizaron como grupo de control (CO). Higo. 1 Un borrador del dispositivo de sujeción se utiliza con una carga regulable (*); interproximal posición de la muestra dentro de la cámara (flecha). Los dispositivos orales pueden colocarse perpendicularmente a los especímenes fijado, como se ilustra en b) para el cepillo de dientes sónico y c) para el irrigador oral
ensayo alamarBlue y unidades formadoras de colonias
Antes de la experimentación, el ensayo fue validado en alamarBlue preliminar pruebas [véase la disposición 1]. El inóculo descrito anteriormente se diluyó 1: 2 en solución salina tamponada con fosfato en siete series. Las muestras de cada serie de dilución se determinaron mediante unidades formadoras de colonias, lo que resulta en serie de dilución 5,5 a 350 × 10 6 CFU /ml. Diez muestras de cada serie se utilizaron para mediciones cinéticas. Por lo tanto, las muestras se incubaron en los pocillos que contenían 10% en vol. De la célula alamarBlue Viabilidad reactivo de ensayo (Life Technologies, Zug, Suiza) y se midió en un espectrofotómetro con lector de placas a 560 nm de excitación /585 nm de emisión a 37 ° C (Spectramax M2, Molecular Devices, Bucher Biotec, Basilea, Suiza). Las mediciones se realizaron cada 15 minutos durante 2 h. Las unidades de fluorescencia relativa medidos de cada dilución se representaron frente al tiempo de incubación. Los resultados de estas pruebas preliminares mostraron tasas iniciales constantes de la reacción enzimática a una distancia de aproximadamente el 30% de la conversión total de sustrato para cada curva de dilución [véase la disposición 1]. Para obtener mediciones dentro de la gama de aumento lineal de las experimentaciones actuales, el tiempo de incubación en la solución de alamarBlue se fijó a 15 min.
Para la experimentación, los discos de hidroxiapatita recubiertos de biopelícula se almacenaron primero en una nueva placa de pocillos con 0,9% NaCl para evitar un mayor crecimiento durante el tratamiento. A continuación, las muestras se transfirieron cuidadosamente en placas de 96 pocillos y se incubaron en 300 l solución alamarBlue que contiene medio fresco (30% de solución de saliva + 70% Mfum) con 10 vol.% AlamarBlue en condiciones anaeróbicas. Además, dos pocillos se llenaron con una solución en blanco alamarBlue (sin muestras) y un pocillo se llenó con bacterias centrifugados de los inóculos planctónicas en solución alamarBlue para obtener valores para la actividad metabólica máxima. Después de 15 min, 200 l de cada solución de alamarBlue se pipeteó en nuevas placas de 96 pocillos y la actividad metabólica se midió en un espectrofotómetro con lector de placas a 560 nm de emisión nm de excitación /585. Las unidades de fluorescencia relativa (RFU) resultantes se definieron como los valores de línea de base o RFU pre-tratamiento. Después de las mediciones, las muestras se almacenaron en 0,9% de NaCl y otros experimentos se llevaron a cabo (tratamientos utilizando los diferentes dispositivos orales). Entonces, los valores de post-tratamiento se obtuvieron usando el ensayo de alamarBlue como se ha descrito antes. Después de RFU-mediciones, las muestras se transfirieron a sustrato fresco para permitir que el nuevo crecimiento y se retiraron con los procedimientos idénticos 24 h más tarde. Por lo tanto, las muestras se distribuyeron en los mismos grupos. En total, cada muestra se sometieron a tres ciclos de tratamiento (d1, d2, d3).
Después del último tratamiento y la medición usando alamarBlue (d3), tres muestras de cada grupo se analizaron adicionalmente usando CFU. Por lo tanto, las muestras se sometieron a vórtice en 1 ml 0,9% de NaCl durante 2 min y se trató con ultrasonidos durante 5 s. Cada suspensión bacteriana se diluyó en NaCl al 0,9% y se sembró sobre agar sangre de oveja Columbia (CSBA) placas (bioMérieux, Marcy l'Etoile, Francia). CSBA placas fueron incubadas en frascos a 37 ° C, utilizando -paks gas (anaer GENbag, Biomeriux, Marcy l'Etoile, Francia) durante 2 días.
electrónica de barrido microscópico análisis
Para SEM, dos muestras por grupo (n = 8
) fueron utilizados después del último ciclo de tratamiento (d3). Las muestras se lavaron con solución de NaCl al 0,9% y se fijaron en solución de glutaraldehído al 4% (en tampón 0,1 M de sodio fosfato de potasio, pH 7,0) durante al menos 24 h. La deshidratación se logró gradualmente (2 × 15 min en etanol al 50% en vol., 2 × 15 min en etanol al 70% en vol., 2 × 15 min en etanol al 80% en vol., 2 × 15 min en etanol 90%, 3 × 20 min en etanol al 96% y 2 x 60 min en etanol absoluto). Antes de oro por bombardeo iónico el recubrimiento de la secado de punto crítico se realizó. Las muestras de todos los grupos se examinaron después de la última etapa de tratamiento repetido periódicamente (d3). Adicionalmente se tomaron imágenes de especímenes sin bacterias. Aumentos de 45x fueron llevados a la imagen de las superficies de las muestras y 500x para mostrar las características más detalladas de la superficie.
El análisis estadístico
se analizó la actividad metabólica de cada disco separado, y la relación de post-tratamiento a los valores basales se compararon dentro de la días de tratamiento (d1, d2, d3). El análisis de los datos se realizó mediante ANOVA con la prueba post-hoc de Scheffé o Kruskal-Wallis con post-hoc test de Mann-Whitney.
Resultados
RFU-valores de línea de base mediana de d1 (todos los grupos) resultaron en 7821.8 (rango intercuartil = 5.114,5) RFU. RFU-valores basales de d2 (RFU pre-tratamiento) mostraron mayor actividad metabólica que D1, independientemente del grupo de tratamiento (media ± SD, WF: 12045 ± 4414, WPA: 11832 ± 4331, WPi: 10600 ± 3362, CO: 10508 ± 3153). RFU-valores basales de d3 reveló reducción de la actividad metabólica en comparación con D1 y D2 (media ± SD, WF: 5864 ± 3974, WPA: 6768 ± 3753, WPi: 6531 ± 4490, CO: 6878 ± 4093, Tabla 1). -valores RFU post-tratamiento se relacionaron con los valores de referencia de la RFU para calcular la actividad metabólica residual en porcentaje. Significativamente más alto se demostró reducción de la actividad metabólica con respecto a la línea de base para el grupo WF-(irrigador oral) durante 10 s para todos los ciclos de tratamiento (D1: 17,9%, 36,8%: d2 y d3: 17,2%). El WPA-grupo (Cepillo de dientes acústico activo) demostraron una reducción significativa en la actividad metabólica d1, mientras que ninguna reducción significativa se midió en D2 y D3 ciclo de tratamiento (d1: 58,8%, d2: 85,2%, d3: 79,6%). Las muestras tratadas con el cepillo de dientes sónico inactivo (WPI) y las muestras no tratadas (CO) no mostraron una reducción significativa en la actividad biofilm en absoluto (d1: WPi 82,5%, CO 89,6%; d2: WPi 82,5%, CO 90,0%; d3: WPi 96,3 %, CO 116,3%; Fig. 2). electrónicos de barrido imágenes microscópicas de la WF-grupo revelaron superficies casi libre de biopelículas con bacterias residuales y matriz parcialmente despojado-off en las áreas externas (Fig. 3 a y b). Las imágenes de la WPA, WPi- y compañeros de grupo mostraron enormes cantidades de biopelícula con picos de islas bacterianas y agregados (Fig. 3). La mediana de los datos CFU resultó en 1.0 × 10 ^ 6 (WF), 2.2 × 10 ^ 9 (WPA), 1.1 × 10 ^ 11 (WPI) y 1,8 x 10 ^ 11 (CO). Dos ejemplares del grupo CO-fueron innumerables (& gt; 10 ^ 11; Fig. 4) .Tabla 1 Media ± SD de tratamiento previo y posterior en unidades relativas de fluorescencia [] RFU para los diferentes dispositivos en puntos de tiempo d1-d3
días de tratamiento
Grupos
pretratamiento [RFU] media ± SD
post-tratamiento [RFU] media ± DE
d1
WF
7077 ±
2564
1.498 ± 1.484
WPA
7384 ±
2434
4715 ±
2841
WPi
6832 ±
3202
5944 ±
3244
CO
6669 ±
3157
5930 ±
2845
d2
WF
12045 ± 4414
4540 ±
2451
WPA
11832 ± 4331
9966 ±
3414
WPi
10600 ± 3362
8953 ±
3788
CO
10508 ± 3153
9609 ±
3564
d3
WF
5864 ±
3974
885 ± 564
WPA
6768 ±
3753
4627 ±
2087
WPi
6531 ±
4490
4757 ±
1832
CO
6878 ±
4093
5979 ±
2318
WF
irrigador oral, WPA
Cepillo dental sónico activa, inactiva WPi
Cepillo dental sónico, CO
control
Fig. 2 Boxplots de actividad residual metabólico en RFU% de los valores basales de diferentes condiciones experimentales con la mediana (línea horizontal interna), 1º y 3º cuartil (inferior y línea de cuadro superior) y 10 y el percentil 90 (bigotes). WF = irrigador oral; WPA = Cepillo dental sónico, activa; WPi = Cepillo dental sónico, inactiva; CO = Control. Las diferencias significativas se ilustran por encima de los diagramas de caja correspondiente
Fig. 3 imágenes de SEM de todos los grupos después del último tratamiento (d3). Las muestras después del tratamiento con el WF irrigador oral (a, b), el cepillo de dientes sónico activa WPA (c, d), el cepillo de dientes sónico inactiva WPi (e, f), el grupo de control CO sin tratamiento (g, h) y las muestras sin bacterias (i, j). Las zonas con biofilm esquilada-off se muestran en a) yb). Magnificaciones de 45x (a, c, g, e, i, barra de escala = 100 m) y 500x (b, d, f, h, j; barra de escala = 10 micras) se utilizaron
Fig. 4 Boxplots de bacterias residuales después de d3 en ln UFC /ml (n = 3
por grupo). Dos muestras del grupo CO revelaron placas incontables (& gt; 10 ^ 11). El UFC mediana (línea horizontal interior) dio lugar a 1,0 x 10 ^ 6 (WF), 2.2 × 10 ^ 9 (WPA), 1.1 × 10 ^ 11 (WPI) y 1,8 x 10 ^ 11 (CO). WF = irrigador oral; WPA = Cepillo dental sónico, activa; WPi = Cepillo dental sónico, inactiva; CO = Control
Discusión
actividad metabólica residual más baja de las biopelículas interproximales en d1, d2 y d3 se logró utilizando el irrigador oral. Reducción significativa de la actividad también se demostró después de los tratamientos en D1 con el cepillo de dientes sónico activo. CFU datos de las muestras después del tratamiento en el espejo d3 las mismas graduaciones entre los grupos. Sin embargo, el análisis de los patrones de tratamiento intervallic (D1-D3) resaltado, independiente de los diferentes procedimientos de tratamiento, la alta tasa de re-crecimiento en cada muestra después de 24 h. Considerando sólo la actividad metabólica de los diferentes grupos después de 24 h (línea de base de d2 o d3, Tabla 1), parece no hay diferencias en absoluto. reducción de biopelículas de más de 63 a 83% usando un orales resultados de irrigadores en biofilm misma actividad como en el grupo de control (CO) con ningún tratamiento, después de 24 h. Sin embargo, este estudio investigó principalmente la actividad metabólica de las biopelículas. no se analizaron diferencias en la patogenicidad de biofilms tratados o no tratados. Además, los resultados del tratamiento de intervalos solamente se muestran durante un período de tres días. rebrote de biopelículas y la resistencia al tratamiento pueden cambiar después de períodos prolongados de limpieza. Francia El tiempo de aplicación del irrigador oral se fijó en 10 s. Sin embargo, se midió la actividad residual en un rango de 17 a 37%. En cuanto a las imágenes de SEM con el irrigador oral, se muestran las regiones de la matriz y enrasadas-off y áreas de biopelícula residuales en las regiones exteriores del disco. Esto puede explicarse por el chorro de agua central del irrigador oral, que parece estar muy definido y no golpea toda la superficie de los discos de biopelícula recubierto en la misma medida. regiones marginales del disco, que no estaban en contacto directo con el chorro de agua puede dar lugar a una mayor cantidad de bacterias residuales debido a la fuerza de cizallamiento menos. Además, el uso de las biopelículas de lote conduce a la adherencia bacteriana en todas las superficies del disco. Los lados de los discos no se alcanzaron por los dispositivos orales y podrían albergar bacterias residuales. El irrigador oral se aplicó perpendicular al espacio interproximal, dando lugar a un chorro tangencial a la superficie biofilm. bacterias individuales en los lados de los especímenes pueden haber permanecido sin tratamiento, sin embargo, su influencia parece bastante insignificante debido a su menor cantidad. actividades de biopelículas de 59 - 85% se mantuvo después de la limpieza sin contacto con el cepillo de dientes sónico durante 10 s. Estudios previos han informado de no contacto eliminación de biopelículas de más de 50% en los cepillos de dientes de lado a lado [1, 2, 17-19]. La mayoría de estos estudios se analizaron microscópicamente después de la tinción con un microscopio de escaneo láser confocal. áreas seleccionadas de las superficies tratadas fueron escaneados y los volúmenes de biopelícula restantes fueron calculados y configurados en relación con los grupos de control. En contraste con la metodología utilizada en el presente estudio, las áreas de superficie tratados sólo se incluyeron para el análisis. Sin embargo, estos estudios no para comparar cada muestra por separado antes de y después de cada tratamiento. El análisis microscópico sólo proporciona una visión de las muestras después del tratamiento, debido a los procedimientos de tinción irreversibles. El uso de alamarBlue permite mediciones repetibles. Cada muestra se pueden analizar en diferentes puntos de tiempo y los efectos de los tratamientos de intervalos se puede observar usando el espécimen idénticas. Su aplicación para la cuantificación de biofilm se ha investigado en varios estudios antes de [20, 21]. También fue validado para la biopelícula de tres especies utilizadas en los experimentos (véase la disposición 1).
Como la mayoría de las investigaciones sobre el llamado 'sin contacto eliminación de biofilm' fueron realizadas por dispositivos orales directamente posicionados hacia el centro de la biofilm recubierto superficies del disco en lugar de utilizar los dispositivos interproximales, y debido a la alta variedad de tiempo de aplicación, la distancia a la probeta superficies y modelos biofilm utiliza, las comparaciones entre los estudios individuales deberán efectuarse solamente con mucho cuidado.
diferencias entre los modelos de biopelículas también pueden se observa con referencia a la superficie del material usado como sustrato. secciones esmalte humano a menudo son sustituidos por titanio [4], vidrio [1, 3, 6, 17] o discos de hidroxiapatita [2, 14, 18]. El presente estudio se realizó con discos de hidroxiapatita como análogo de esmalte de los dientes para evitar posibles patrones de adhesión bacteriana no homogéneas a lo largo de grietas y fisuras del esmalte. Vaya con respecto al mejor desempeño del irrigador oral en comparación con la forma activada de un cepillo de dientes sónico tiene que tener en cuenta que en ambos casos sin pasta de dientes estaba involucrado, aunque mediante el uso de un cepillo de dientes que esto es raramente el caso. El uso adicional de la pasta de dientes junto con el cepillo de dientes sónico activado puede tener lugar a la eliminación adicional de biofilm debido a un efecto mecánico de las partículas de la pasta de dientes, y también debido a otros ingredientes, por ejemplo, tensioactivos. Por lo tanto, para estudios posteriores se debe investigar la influencia adicional de la pasta de dientes, también. Sin embargo, fue la intención de este estudio para investigar la influencia específica de los dispositivos sin interferencia de otros factores. Para la investigación adicional, el efecto de los procedimientos de limpieza de intervalos más largos ayudaría a entender el efecto a largo plazo de diferente patrón de higiene bucal en los biofilms interproximales. La comparación de no contacto de cepillado por los dispositivos interproximales y por no contacto cepillado por los dispositivos orales directamente posicionado hacia los biofilms podría facilitar las comparaciones entre diferentes modelos de estudio.
Conclusiones
Basándose en los resultados, la limpieza de las regiones interproximales por hidrodinámico flujo de un irrigador oral puede conseguir una eliminación más eficaz de biopelícula interproximal en comparación con los cepillos de dientes sónicos
abreviaciones
UFC:.
unidades formadoras de colonias
CO:
control de muestras (muestras de biofilm recubierto sin tratamiento)
d1:
primer día de tratamiento
d2:
Segundo día de tratamiento
d3:
tercer día de tratamiento
Mfum: Read modificado medio fluido universal
NaCl:
cloruro de sodio
ORS:
sistemas de riego Oral
RFU:
unidades de fluorescencia relativa
SEM: microscopio electrónico de barrido
WF:
Waterpik® Sensonic WP-100E: irrigador oral
WPA:
Waterpik® Sensonic SR-3000E: Cepillo dental sónico, activa
WPi:
Waterpik® Sensonic SR-3000E: Cepillo dental sónico, inactiva
Declaraciones
Reconocimiento
los autores desean agradecer a Beatriz Sener de la Clínica de Odontología Preventiva, Periodoncia y Cariología por su gran apoyo con el SEM imágenes
acceso abierto Este artículo se distribuye bajo los términos de la licencia Creative Commons Atribución. (http: //creativecommons. org /licencias /por /4. 0), que permite el uso irrestricto, la distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que la obra original esté debidamente acreditado. La renuncia Creative Commons Public Domain Dedication (http: //creativecommons org /publicdomain /cero /1 0 /.) Se aplica a los datos facilitados en este artículo, a menos que se indique lo contrario
adicional. presentar
archivo adicional 1: Validación del ensayo alamarBlue. (DOCX 194 kb) Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses en competencia.
Contribuciones de los autores Dr.
Tawakoli concebido esta investigación y el investigador principal en este estudio. La señora Sauer y el Sr. Becker ayudaron en la realización del estudio y de las cuestiones metodológicas. El Dr. Buchalla y el Dr. Attin supervisado el estudio y la revisión crítica del manuscrito. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.
