de casos y controles
Resumen Antecedentes
Streptococcus mutans (S. mutans
) es el principal agente etiológico de la caries dental. Sortase es una transpeptidasa que ancla varias proteínas de la superficie para el S. mutans
pared celular y se ha demostrado que desempeñan un papel importante en la cariogenicidad. El propósito de este estudio fue explorar los polimorfismos genéticos del gen sortase (srta
) y los factores sociales de comportamiento asociados con la caries dental en niños con S. mutans
.
Métodos En este
estudio de casos y controles, 121 cepas de S. mutans
fueron seleccionados por separado de los niños libres de caries y alta severidad de caries los niños para la secuenciación del gen
srta. Los datos sociales y de comportamiento se recogieron mediante cuestionarios autoadministrados. ADN genómico fue extraído de cepas de S. mutans
y amplificado por PCR para obtener la srta
gen. Los productos de PCR purificados se secuenciaron y analizaron para mutaciones con software Reportero ABI Variant. La distribución de las mutaciones sin sentido y la media de los factores sociales y conductuales se compararon entre los grupos. Un modelo de regresión logística múltiple se utilizó para controlar los factores de confusión.
Resultados
Las frecuencias de mutación en los loci 168 (P = 0,023
) y 470 (P = 0,032
) fueron significativamente diferentes entre los grupos . El mejor modelo ajustado mostró que una mayor edad, las altas frecuencias de consumo de azúcar sólido, la lactancia prolongada, una alta proporción de placa visible, y S. mutans
con una T en el locus 168 de la srta
genes estaban asociados con alta severidad de caries en los niños (P Restaurant & lt; 0,05). Los niños que llevan una G en el locus 168 de S. mutans
tuvo una disminución del riesgo de caries de pérdidas muy graves (OR = 0,32; IC del 95% = 0,12-0,86) en comparación con aquellos que llevan un
T. Conclusiones
el presente estudio sugiere que el locus 168 missense mutación del gen srta
puede correlacionar con la susceptibilidad a la caries en los niños con S. mutans
. Además, la edad, la duración de la lactancia materna, el consumo de azúcares en estado sólido, y la mala higiene oral contribuyó a esta compleja enfermedad.
Palabras clave
caries polimorfismos de genes srta
Streptococcus mutans
Li Xia Yu y Ye Tao contribuido igualmente a este trabajo.
Antecedentes
la caries dental es la destrucción localizada de los tejidos duros dentales por sub-productos ácidos de la fermentación bacteriana de carbohidratos de la dieta [1]. microorganismos orales, los hábitos dietéticos y la susceptibilidad del huésped interactúan en el inicio y desarrollo de la caries dental [2]. En general, las variables socio-demográficas generales, las características de desarrollo, la educación en general, la salud bucal de comportamiento, higiene bucal y las bacterias se conocen factores de riesgo para el desarrollo de la caries dental en niños [3]. Es una enfermedad en todo el mundo común que afecta a la salud infantil y el bienestar [2,4,5], especialmente en China. La tercera encuesta Nacional de Salud Oral en China mostró que la prevalencia de la caries infantil en el grupo de edad de 5 años de edad, fue tan alta como 66% y que el número medio de dientes cariados, perdidos y los dientes obturados (CPO) fue de 3,5 [6] .
Streptococcus mutans gratis (S. mutans
) es el agente etiológico principal de la caries dental [7]. Aunque la asociación entre S. mutans
y la caries dental parece convincente, algunos niños con S. mutans
no manifiestan la enfermedad, lo que sugiere que S. mutans
pueden variar en su capacidad para iniciar la caries. Una característica importante de S. mutans
en el desarrollo de la caries dental es su capacidad de adherirse a la superficie del diente. Pac es una de las proteínas de la superficie de la pared de la anclado celulares identificados en S. mutans
, y es responsable de mediar la adherencia de S. mutans a superficies de los dientes
[8]. Sortase A (srta), codificados por el gen srta
, se ha demostrado que es un transpeptidasa localizado en la membrana que une covalentemente la proteína Pac con una señal de clasificación a la pared celular y posee importantes funciones adherentes que se han asociado con cariogenicidad [ ,,,0],9,10]. S. mutans
con una srta
gen mutado se muestra para dar lugar a una marcada reducción en el potencial de la adhesión de S. mutans
y la frecuencia de la caries dental [11]. Debido a que una función importante de srta
es la adhesión de S. mutans
a la superficie del diente, la hipótesis de que la srta
gen de S. mutans
podría poseer polimorfismos genéticos relacionados con diferentes condiciones de caries.
Teniendo en cuenta la compleja etiología de la caries dental, la virulencia y la colonización de S. mutans
puede ser modulada por factores conductuales, sociales y ambientales [12,13]. En este estudio, que tuvo como objetivo explorar los polimorfismos genéticos de la srta
genes y los factores sociales de comportamiento asociados con la caries dental en niños con S. mutans
.
Métodos
Cálculo del tamaño de la muestra de estudio
un diseño de grupos de casos y controles se aplicó en este estudio. De acuerdo con el diseño del estudio, las fórmulas utilizadas para calcular la secuenciación capacidades de ejemplo se muestran a continuación [14]
Fórmula 1:. \\ (N = \\ frac {N ^ {\\ hbox { '}}} {4} {\\ izquierda (1+ \\ sqrt {1+ \\ frac {4} {N ^ {\\ hbox { '}} \\ delta}} \\ right) ^ 2} \\)
Fórmula 2: \\ ( {N}^{\\hbox{'}}=\\frac{{\\left[{Z}_{\\alpha}\\sqrt{\\left(1+1/C\
ight){\\pi}_c\\left(1-{\\pi}_c\
ight)}+{Z}_{\\beta}\\sqrt{\\pi_2\\left(1-{\\pi}_2\
ight)+{\\pi}_1\\left(1-{\\pi}_1\
ight)/C}\
ight]}^2}{{\\left({\\pi}_2-{\\pi}_1\
ight)}^2} \\)
Fórmula 3: \\ ({\\ pi} _c = \\ frac {\\ pi_2 + {\\ pi} _1} {2} \\)
Fórmula 4: δ =
| π
1 - π
2 |
se estableció el número de niños que ser iguales en los grupos de casos y controles. Por lo tanto, el valor de C
era 1,0. El valor de α se fijó en 0,05, y el valor de β se fijó en 0,15. Los valores de π
1 y π
2 se refiere a las tasas de mutación de sentido erróneo predichos de srta
en los grupos de control y de casos en el presente estudio, respectivamente. Sobre la base de las tasas de cada locus mutación sin sentido en el, se requería libres de caries y grupos de caries activas de nuestro trabajo previo [15], el tamaño de la muestra más grande cuando π
1 = 0,6 y π
< sub> 2 = 0,4, respectivamente. Por consiguiente, se calculó que el tamaño de la muestra debe ser 121 niños de cada grupo. Todas las pruebas estadísticas fueron de dos caras.
Debido a que este estudio dirigido principalmente para explorar las conexiones entre las mutaciones de sentido erróneo de srta
y la severidad de caries en los niños con los S. mutans
, sólo los niños que lleva a S. mutans
fueron analizados. Para satisfacer el tamaño requerido de la muestra, se calculó el número de niños que se requieren para la encuesta epidemiológica. La tasa de prevalencia de caries (68%) y los no-caries (32%) en los niños pequeños [16], además de la tasa de prevalencia de S. mutans
en el grupo libre de caries (37,5%) y la caries se consideraron grupo activo (75%), [17]. Por lo tanto, el número mínimo de hijos necesarios para investigar se calculó en 1.009. Investigación de campo
una encuesta epidemiológica se llevó a cabo en el distrito de Huadu de Guangzhou, en el sur de China desde octubre de 2012 hasta junio de 2013. El protocolo de estudio fue aprobado por el Comité de Ética de la Escuela Guanghua de Estomatología, Universidad de Sun Yat-sen (ERC- [2012] -13). El Distrito Huadu es un nuevo distrito urbano que consta de cuatro calles y seis ciudades. Había 114 escuelas infantiles en este distrito. Una técnica de muestreo aleatorio por conglomerados se utilizó para seleccionar 19 escuelas de acuerdo con el número de niños que necesitamos para reclutar. Sólo aquellos niños que tenían entre 36-47 meses de edad, habían vivido en el barrio durante más de seis meses, no informó de la enfermedad sistemática, y no informó la ingesta de antibióticos durante al menos un mes anterior fueron incluidos en el estudio. Todas las escuelas participantes fueron informados de y consintieron en el estudio. Se obtuvo el consentimiento de los padres después de escrita, todos los niños de 3 años de edad elegibles en las escuelas participantes fueron incluidos en el estudio.
el desarrollo de caries, hipoplasia del esmalte y la acumulación de placa visible se determinaron mediante un solo dentista (L.X. Yu). sondas IPC, espejos bucales desechables, y fuentes de luz LED intraorales se utilizaron para los exámenes. El estado de las caries dentales se registran de acuerdo con los criterios de la Organización Mundial de la Salud utilizando índices cao [18]. En resumen, la presencia de caries dental se registró cuando había una lesión obvia en una fosa o fisura o en la superficie lisa de un diente. Una pared suavizada detectable o esmalte socavado también se registró como la caries dental. La hipoplasia del esmalte fue grabado usando los criterios recomendados por la Federación Dental Internacional (FDI) para las encuestas epidemiológicas generales [19]. La hipoplasia del esmalte incluye tres tipos de defectos: pozos, surcos o esmalte que falta. La higiene oral se evaluó mediante el índice de placa visible (VPI) [20]. Cuatro sitios de distal, midmost y mesial de superficies bucales y la midmost de la superficie lingual de cada diente se examinaron para grabar el VPI. Se calculó el porcentaje de los sitios examinados con placa visible. Aproximadamente el 10% de los sujetos fueron examinados para evaluar la fiabilidad intra-examinador. Las muestras combinadas de la placa dental de cada niño fueron recogidas con hisopos de algodón estériles de las superficies vestibulares de los dientes maxilares. Las muestras se dispersaron en un (FT) Medio de tioglicolato fluido estéril y se llevaron al laboratorio en hielo dentro de las 4 h de la colección. Se recogieron
datos mediante un cuestionario autoadministrado que se administró a los cuidadores. El cuestionario consta de cuatro partes: las características socio-demográficas (por ejemplo, la edad y el sexo de los niños, la ocupación y el nivel de educación de los padres), características de desarrollo (por ejemplo, la edad gestacional, tipo de parto, peso al nacer y la hipoplasia del esmalte), educación amplia la historia (por ejemplo, la alimentación con biberón experiencia y duración de la lactancia) y el comportamiento de la salud oral (por ejemplo, el consumo de azúcares en estado sólido, la frecuencia de cepillado y el uso de pasta de dientes).
aislamiento de S. mutans
muestras de placa se mezclaron y se sonicaron durante 30 s y se dispersaron para obtener una serie de dilución de 10 -3 diluciones. Para cada muestra, 50 l de diluyente se extendió sobre--bacitracina Mitis Salivarius agar (MSB), suplementado con 20% de sacarosa y 0,2 unidades /ml de bacitracina y se incubaron en condiciones anaerobias (85% N 2, 5% de CO 2, y 10% H 2) a 37 ° C durante 3 d [21]. Se seleccionaron al azar dos colonias de cada niño de acuerdo con la morfología de la colonia y a prueba las colonias por su capacidad para fermentar el manitol, sorbitol, rafinosa, melibiosa, y esculina y por su capacidad para hidrolizar arginina [22]. Las cepas bacterianas identificadas posteriormente se sembró en agar MSB y conservados en un 50% de glicerol a -80 ° C antes de su uso.
La definición de los grupos de casos y controles
a explorar y comparar los polimorfismos genéticos en el gen srta
de S. mutans
, los niños con caries distintas experiencias se han tenido en consideración. Un total de 121 niños libres de caries con S. mutans
fueron seleccionados al azar como el grupo libre de caries, y 121 niños con cpod ≥6 que estaban S. mutans-
positivos fueron seleccionados para formar la alta severidad caries grupo. La puntuación cpod de la alta gravedad grupo estaba de acuerdo con la categoría utilizada en un estudio anterior [23].
Extracción de ADN cromosómico de S. mutans
cepas fueron cultivadas en 2 ml de cerebro y corazón caldo de infusión y se incubó a 37 ° C en condiciones anaerobias durante 18 h. Las células centrifugadas de los cultivos BHI se suspendieron en 5% Chelex100, se trata con 10 l de 20 mg /ml de proteinasa K a 37 ° C durante 1 min, y luego se digirieron a 56 ° C durante 1 h, seguido de ebullición durante 10 min. Los tubos se congelaron en hielo durante 3 min, y la suspensión se centrifugó a 12.000 rpm durante 10 min. Se obtuvo el sobrenadante para la PCR. La calidad y cantidad de muestras de ADN se midieron con un espectrofotómetro de UV a 260 nm y 280 nm. Todos los ADN se almacenó a -20 ° C antes de su posterior análisis.
Amplificación y secuenciación del gen srta
Los cebadores de PCR diseñados por ABI Primer V3.0 diseñador que se utilizaron para amplificar el UA159 srta
gen se enumeran en la Tabla 1. Un fragmento de ADN de 1.035 pb que lleva la srta
gen se amplificó a partir de cepas de S. mutans
. Debido a la limitación de la longitud de la secuenciación lee, amplificado y secuenciado el gen en tres fragmentos que contenían sections.Table cebadores 1 de PCR de solapamiento utilizados para la detección del gen srta en S. mutans
Primer
secuencia (5'-3 ') guía empresas tamaño del producto (pb)
Pair1-F
GACGTTTGGCAACTGGTGTG
557
Pair1-R
CCAAGCAATTAGGGCATTTC
Pair2-F
CAATGAAAAAAGAACGTCAATCTA
448
Pair2-R
TGTGAAGATCCGGTCATACCA
Pair3-F
CGGAATTGCCATTCCAGACT
721
Pair3-R
TCCGAAACTATCAAAGCAACAT
La reacción de PCR se llevó a cabo en un volumen de reacción de 25 l. Los componentes de la reacción de PCR (conc. Final) fueron 2,5 l de 10 x tampón de PCR, 0.2 mM de mezcla dNTP, MgCl 1,5 mM 2, 0,2 M de cada cebador, 100 a 400 ng de ADN genómico como plantilla, y 2U de Platinum® Taq ADN polimerasa (Invitrogen, CA, EE.UU.). El templado se precalentó a 95 ° C 5 min. El ciclo de PCR fue como sigue: desnaturalización a 95 ° C durante 30 s, hibridación a 60 ° C durante 30 s, y elongación a 72 ° C durante 50 s. Se realizó un total de 50 ciclos, seguido de una etapa de elongación final a 72 ° C durante 5 min. Cinco microlitros de cada productos amplificados se analizaron mediante electroforesis en un gel de agarosa al 1,5%. Los productos de PCR se purificaron usando un kit de extracción de gel QIAquick (Qiagen, Hilden, Alemania). En última instancia, los productos fueron secuenciados por el Shanghai Life Technologies Compañía de Biotecnología (Life Technologies, Shanghai, China). Reportero de software variante se utilizó para analizar los resultados de la secuenciación, y la srta
secuencia de S. mutans UA159
fue seleccionado como una secuencia de referencia.
El análisis estadístico
análisis de los datos se realizó con el programa SPSS 16.0 software. Las variables categóricas y continuas se compararon mediante una prueba de Chi-cuadrado y una T muestras
prueba independiente, respectivamente. Análisis bivariados y logística multivariante se utilizaron para calcular la odds ratio (OR) con sus intervalos de confianza del 95% (IC) correspondientes e identificar los factores asociados con la caries de pérdidas muy graves. estado de la caries fue tratado como la variable dependiente (0 = caries grupo libre, 1 = alto gravedad de la caries grupo). Las variables independientes fueron los factores que pueden haber influido en el estado de la caries. Esas variables independientes con P Hotel & lt; 0.2, basado en un análisis logístico de dos variables, se ensayaron adicionalmente en un modelo de regresión logística múltiple. AP
valor. & Lt; 0,05 para todas las pruebas estadísticas de dos caras se consideró significativo
Resultados
El análisis estadístico de las características demográficas y socioeconómicas factores de desarrollo se muestran en la Tabla 2. En los indicadores sociales, encontramos significativamente diferentes distribuciones de las edades (en meses) entre los grupos (P Hotel & lt; 0,001). Entre las variables que representan el comportamiento de los niños de la salud bucal (Tabla 3), la duración de la lactancia materna (p = 0,09
), la frecuencia de consumo de azúcar sólido (P Hotel & lt; 0,01) y la proporción de VPI (P
& lt; 0,01) se asociaron significativamente con la caries risk.Table análisis bivariante 2 de las características demográficas, socioeconómicas y de desarrollo en relación con el estado de caries
variables
Controles (n = 121)
Los casos (n = 121)
x 2
valor P *
COR (IC del 95%)
valor P
n (%)
n (%)
Parte 1 Las características demográficas y socioeconómicas
Sexo
1,345 0,246
Los varones †
59 gratis (48.8)
69 gratis (57,0)
hembras
62 gratis (51.2)
52 gratis (43,0) guía empresas
0,72 (0,43-1,19)
0,198
escolarización
de la madre
1.369
0.242
≥ 12 años †
74 gratis (61,2)
65
gratis (53,7)
& lt; 12 años
47 gratis (38.8)
56 gratis (46.3)
0,74 (0,44-1,23)
0,242
escolarización del padre
3.615
0,057
≥ 12 años †
87 gratis (71,9) guía empresas 73 gratis (60.3)
& lt; 12
años 34 gratis (28.1)
48 gratis (39.7)
0,59 (0,35-1,02 )
0,058
ocupación de la madre
1.813
0,404
0,413
Employer/Professional †
8 gratis (6.6)
14 gratis (11.6)
Employee/Non-profesional
88 gratis (72,7)
84
(69.4)
0.55(0.22-1.37)
0.196
Unemployed
25
(20.7)
23
(19.0)
0,53 (0,19-1,48)
0,224
ocupación
del padre
3.503
0,173
0,181
Employer/Professional †
22 gratis (18.2)
29 gratis (24,0)
Employee/Non-profesional
92
(76.0) guía empresas 90 gratis (74,4)
0.74(0.40-1.39)
0.350
Unemployed
7
(5.8)
2
(1.7)
0,22 (0,04-1,15)
0,072
Media (DE)
Media (DE)
t
prueba
Edad (meses)
41.6
(2.9)
43.4
(3.6)
−4.285
<0.001**
1.18(1.09-1.28)
<0.001
edad de la madre al nacimiento del niño
27.1
(3.8)
26.4
(3.8)
1.517
0.131**
0.95(0.89-1.02)
0.132
Parte 2 Características del desarrollo
edad gestacional
0,066 0,797
≥37 semanas †
58 gratis (47.9) guía empresas 60 gratis (49.6)
& lt; 37 semanas
63 gratis (52,1 )
61 gratis (50.4)
0,94 (0,57-1,55)
0.797
El tipo de parto
0,281 0,596
nacimiento
vaginal †
73 gratis (60.3)
77 gratis (63,6) guía empresas
parto por cesárea
48 gratis (39.7)
44 gratis (36.4)
0,87 (0,52 -1.46)
0,596
Peso al nacer
2.381
0,123
≥2500 g †
118 gratis (97,5)
113 gratis (93,4)
Hotel & lt; 2.500 g
3 gratis (2.5)
8
gratis (6.6)
2,79 (0,72-10,76)
0.138
hipoplasia del esmalte
- - Wooel.com
Sin †
121 gratis (100,0 )
120 gratis (99,2)
Sí
0
(0.0) guía empresas 1 gratis (0,8)
Perfil - -
* prueba de Chi-cuadrado, ** T para muestras independientes
prueba.
COR (odds ratio crudo), IC (intervalo de confianza), † Referencia Categoría.
Tabla 3 análisis bivariante de la educación general y el comportamiento de la salud oral en relación con la caries estado
variables
Controles (n = 121)
casos (n = 121)
x 2
valor P *
COR (IC del 95%)
valor P
n (%)
n (%)
Parte 1 crianza general entre 0-3 años
la alimentación con biberón experiencia
0,764
0.382
Sí †
22 gratis (18.2)
17 gratis (14,0 )
Sin
99 gratis (81,8)
104
(86.0)
1,36 (0,68-2,71)
0,383
Duración de la lactancia materna
9,382 0,009
0,012
Nunca amamantado †
22
gratis (18.2)
9 gratis (7.4)
& lt; 1 año
84 gratis (69,4) guía empresas 84 gratis (69,4)
2,44 (1,06-5,62)
0,035
≥1 año
15 gratis (12.4)
28 gratis (23.1)
4,56 (1,68-12,37)
0,003
Parte 2 comportamiento de la salud oral en la edad de 3
sólido el consumo de azúcar
19.492
& lt; 0,001
Hotel & lt; 1 vez por † día
86 gratis (71.1)
52 gratis (43,0)
≥1 vez al día
35 gratis (28.9)
69 gratis (57,0) guía empresas
3,26 (1,91-5,56)
& lt; 0,001
frecuencia de cepillado
0,154
0.695 de tiempo,
≥1 por día †
73 gratis (60.3)
70
(57.9)
& lt; 1 vez por día
48 gratis (39,7 )
51 gratis (42.1)
1,11 (0,66-1,85)
0,695
El uso de pasta de dientes
0.000
1.000
1.000
siempre †
70 gratis (57.9)
70 gratis (57.9)
A veces
29 gratis (24,0)
29 gratis (24,0)
1.00(0.54-1.84)
1.000
Never
22
(18.2)
22
(18.2)
1,00 (0,51-1,97)
1.000
Media (DE)
Media (DE)
t
prueba
índice de placa visible (%)
46.2
(20.9)
75.7
(15.8)
−12.386
<0.001**
1.08(1.06-1.10)
<0.001
* Prueba de Chi-cuadrado, ** T para muestras independientes
prueba.
COR (odds ratio crudo), IC (intervalo de confianza), † Referencia Categoría.
En la comparación de las secuencias de la srta Red de la clínica con cepas S. mutans UA159
, se encontraron un total de 38 sustituciones de un solo nucleótido, incluyendo 21 sitios de mutación silenciosa y 17 sitios de mutación de sentido erróneo (Figura 1). Se encontró que el grupo libre de caries tener 19 sitios de mutación silenciosa y 11 sitios de mutación de sentido erróneo, mientras que se encontró que el grupo de alta severidad de caries tener 20 sitios de mutación silenciosa y 14 sitios de mutación de sentido erróneo. Sólo diez cepas fueron idénticas a la cepa UA159; De ellos, cinco eran del grupo libre de caries, y cinco del grupo de caries de alta severidad. Ninguno de los srta
genes en las secuencias tenía una base de inserción o deleción. Figura 1 mutaciones puntuales en los aislados clínicos. leyenda detallada: El aislado clínico No. 306 (grupo libre de caries) tiene un punto de mutaciones en 78, 99, 112, 114, 165, 168, 176, 222, 249, 312, y 671 bases locus. El aislado clínico (grupo caries alta severidad) No. 139 tenía una mutación puntual en 78, 150, 165, 168, 176, 671 bases locus. Sitios de mutación
silencio en las cepas clínicas se identificaron en las posiciones 48, 78, 85, 99, 138, 150, 162, 165, 183, 186, 222, 237, 249, 261, 312, 357, 582, 615, 636, 669, y 717. los sitios de mutación de sentido erróneo
en las cepas clínicas fueron identificado en las posiciones 23, 34, 36, 47, 100, 112, 114, 168, 176, 256, 298, 382, 470, 548, 584, 671, y 706. Los transversions de aminoácidos debido a las mutaciones sin sentido se muestran en la Tabla 4. en este caso, sólo se muestran las alteraciones de aminoácidos debido a mutaciones sin sentido, ya que estos cambios podrían afectar la actividad de sortase A.Table 4 transversión de aminoácidos debido a mutaciones sin sentido de acuerdo a los codones sitio
UA159
cepas clinales
Codón
aminoácido Codón
de aminoácidos
23
AGG
Arginine
AAG
Lysine
34
AGT
Serine
GGC/GGT
Glycine
36
AGT
Serine
GGC/GGT
Glycine
47
ACC
Threonine
ATC
Isoleucine
100
CCA
Proline
TCA
Serine
112
GCC
Alanine
ACC/ACT
Threonine
114
GCC
Alanine
ACT
Threonine
168
GAT
Asparaginic ácido
GAG
glutámico acid
176
CAC
Histidine
CGC
Arginine
256
GCT
Alanine
TCT
Serine
298
GAC
Asparaginic acid
AAC
Asparagine
382
GTC
Valine
ATC
Isoleucine
470
CGT
Arginine
CAT
Histidine
548
GTC
Valine
GCC
Alanine
584
CCG
Proline
CTG
Leucine
671
AAT
Asparagine
ACT
Threonine
706
GCT
Alanine
ACT
Threonine
Las frecuencias de distribución de los sitios de mutación de sentido erróneo se enumeran en la Tabla 5. No hubo una diferencia significativa en la frecuencia de mutación en el locus 168 (P = 0,023
); la frecuencia de las mutaciones en este sitio fue significativamente mayor en el grupo libre de caries que en el grupo caries de alta severidad. Por otra parte, las cepas con el locus 470 polimorfismo mostró una tasa significativamente mayor en el grupo de alta severidad de caries en comparación con el grupo sin caries (P = 0,032
) .Tabla 5 de análisis bivariante de la mutación de sentido erróneo tasas en relación con el estado de la caries
mutación missense
Controles (n = 121)
casos (n = 121)
x 2
valor P *
COR (IC del 95%)
valor P
n (%)
n (%)
23 G → A †
5
(4.1)
12
(9.9)
3.100
0.078
2.55(0.87-7.49)
0.087
34 A → G
7
(5.8)
10
(8.3)
0.569
0.450
0.68(0.25-1.85)
0.453
36 T → C
6
(5.0)
11
(9.1)
1.582
0.209
1.92(0.69-5.36)
0.215
47 C → T
8
(6.6)
11
(9.1)
0.514
0.473
1.41(0.55-3.64)
0.475
100 C → T
0
(0.0)
1
(0.8)
—
1.000**
—
1.000
112 G → A
71
(58.7)
71
(58.7)
0.000
1.000
1.00(0.60-1.67)
1.000
114 C → T
65
(53.7)
56
(46.3)
1.339
0.247
0.74(0.45-1.23)
0.248
168 T → G
26
(21.5)
13
(10.7)
5.166
0.023
0.44(0.21-0.90)
0.025
176 A → G
63
(52.1)
68
(56.2)
0.416
0.519
1.18(0.71-1.96)
0.519
256 G → T
1
(0.8)
0
(0.0)
—
1.000**
—
1.000
298 G → A
1
(0.8)
0
(0.0)
—
1.000**
—
1.000
382 G → A
1
(0.8)
0
(0.0)
—
1.000**
—
1.000
470 G → A
7
(5.8)
17
(14.0)
4.625
0.032
2.66(1.06-6.68)
0.037
548 T → C
0
(0.0)
1
(0.8)
—
1.000**
—
1.000
584 C → T
0
(0.0)
1
(0.8)
—
1.000**
—
1.000
671 A → C
115
(95.0)
116
(95.9)
0.095
0.758
0.83(0.25-2.78)
0.758
706 G → A
0
(0.0)
1
(0.8)
—
1.000**
—
1.000
* Prueba de Chi-cuadrado. ** La prueba exacta de Fisher.
† G → A, G representa la base 23 locus en UA159, A representa la base 23 locus en las cepas clínicas.
COR (odds ratio crudo), CI (intervalo de confianza).
para controlar los factores de confusión, se realizaron varios análisis de regresión logística, y los resultados (Tabla 6) mostraron que una mayor edad (p = 0,027
), las altas frecuencias de consumo de azúcares en estado sólido (P Hotel & lt; 0,001 ), la lactancia materna prolongada (P = 0,028
), una alta proporción de placa visible (P Hotel & lt; 0,001), y S. mutans
cepas con una T en lugar 168 de la srta
gen (P = 0,023
) se asociaron significativamente con la caries de pérdidas muy graves en los niños. Un menor riesgo de caries alta severidad (AOR = 0,32, IC del 95% = 0,12 hasta 0,86) se encontró en los niños que llevan a S. mutans
cepas con una G en el locus 168 de la srta
gen en comparación con T. Sin embargo, después de controlar los factores de confusión, la mutación en el locus 470 fue excluido de la model.Table 6 Resumen de los resultados de la regresión logística múltiple
variables
B ‡
sE
P
AOR
IC del 95% para AOR
Baja
superior
Las mutaciones en el locus 168
Sin †
Yes
−1.156
0.510
0.023
0.32
0.12
0.86
Duration de la lactancia materna
0,028
Nunca amamantado †
& lt; 1 año
1.273
0,651 0,050
3,57
1.00
12.79
≥1 año
2.058
0,772 0,008
7,83
1,73
35.54
consumo de azúcar sólido
< (months)
0.131
0.059
0.027
1.14
1.02
1.28
Visible (%)
0.090
0.012
<0.001
1.09
1.07
1.12
Constant
−16.110
3.263
<0.001
0.00
