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Miel - un agente potencial contra Porphyromonas gingivalis: un in vitro study

 


abstracto de fondo en
La miel se ha discutido como una opción terapéutica en la cicatrización de heridas desde la antigüedad. Podría ser también una alternativa a los antimicrobianos utilizados comúnmente en el tratamiento de periodontitis. El estudio in vitro en-tuvo como objetivo determinar la eficacia antimicrobiana contra Porphyromonas gingivalis
como periodontopathogen importante.
Métodos
Uno de Manuka y una miel apicultor doméstica han sido seleccionados para el estudio. Como una proyección, se determinaron MIC de las mieles contra 20 cepas de P. gingivalis
. Se determinaron los contenidos de metilglioxal y peróxido de hidrógeno como los potenciales compuestos antimicrobianos. Estos componentes (hasta 100 mg /l), propóleos (hasta 200 mg /l), así como los dos mieles (hasta 10% w /v) se ensayaron frente a cuatro cepas de P. gingivalis
en el crecimiento y planctónicas en una sola especie de biopelículas.
resultados página 2% de la miel de abeja inhibió el crecimiento de un 50% de la planctónicas P. gingivalis
, los respectivos CIM 50 de la miel apicultor alemán fue del 5% . La miel de Manuka contenía 1,87 mg /kg de peróxido de hidrógeno y el interno de miel 3,74 mg /kg. Se encontró que la cantidad de metilglioxal a ser de 2 mg /kg en la miel doméstica y 982 mg /kg en la miel de Manuka. MICs de peróxido de hidrógeno eran 10 mg /l - 100 mg /l, por metilglioxal 5-20 mg /l, y para propolis 20 mg /l - 200 mg /l. 10% de ambos tipos de miel inhibe la formación de P. gingivalis
biofilms y redujo el número de bacterias viables a menos de 42 h de edad biofilms. Tampoco se encontró una prevención total de la formación de biopelículas, ni una erradicación completa de una biopelícula 42 h de edad, por cualquiera de los compuestos ensayados y las mieles.
Conclusiones
miel actúa contra P. gingivalis antibacteriano
. Los pronunciados efectos observados de la miel de abeja contra las bacterias planctónicas, pero no dentro de la biopelícula se pueden atribuir a metilglioxal como el componente antimicrobiano característica.
Gingivalis Palabras clave
miel Porphyromonas
Biofilm metilglioxal mínima concentración inhibitoria material complementario sobre The Electronic versión en línea de este artículo (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-24) contiene material complementario, que está disponible para los usuarios autorizados
Antecedentes
la periodontitis es una inflamación crónica que se produce en respuesta a. la presencia de bacterias subgingivales. Un número limitado de especies bacterianas se han asociado con periodontitis, y una fuerte evidencia de que se ha acumulado para implicar a Porphyromonas gingivalis
, una bacteria gram-negativa anaeróbica en la patogénesis [1-3]. Por otra parte P. gingivalis
fue postulado que es un patógeno piedra angular en el desarrollo de la enfermedad periodontal [4], la virulencia es el más asociado con su alta actividad proteolítica [5].
Sobre la base de los efectos de los agentes patógenos, el régimen es un antiinfeccioso componente importante en cualquier tratamiento de la periodontitis. En la prevención de la recolonización de las bacterias, digluconato de clorhexidina (CHX) es un agente utilizado ampliamente en el tratamiento de la periodontitis [6, 7]. Se recomiendan los antibióticos para los casos graves [8, 9]. El desarrollo de resistencia a los antibióticos y los efectos secundarios de los medicamentos implican la búsqueda de alternativas. Entre otros, la terapia a base de plantas incluyendo la combinación con antibióticos o el uso de la miel podría ser una opción [10, 11].
Honey es un tratamiento antiguo de la herida y se volvió a introducir en la terapia médica moderna debido a su antimicrobiana y curación de heridas promoviendo la eficacia [12]. Se encontró peróxido de hidrógeno para ser un constituyente antibacteriana de la miel [13]. Durante un par de años un especial interés se ha centrado en la miel de Manuka que se deriva del árbol de Manuka (Leptospermum scoparium
) que crece en Nueva Zelanda. En la miel de Manuka, que tiene una actividad alta no peróxido, metilglioxal fue identificado como el componente antibacteriano dominante [14]. La miel se ha demostrado ser eficaz en el tratamiento del herpes simplex recurrentes lesiones [15], se queman las heridas [16], postoperatorias heridas infectadas [17]. Se encontró que era reducir el número de estreptococos mutans en la saliva de los pacientes xerostómicos [18]. En pacientes con gingivitis y la placa, la miel de Manuka fue capaz de reducir el sangrado y la cantidad de placa [19].
Otro producto importante de abeja que tiene una actividad antimicrobiana es propóleos, una sustancia resinosa que las abejas utilizan para el sellado de sus peines [ ,,,0],20]. Como aditivo a las cremas dentales [21] o la irrigación [22], el propóleos puede promover la salud periodontal.
Nuestro estudio tuvo como objetivo determinar el efecto de dos tipos de miel y de su más conocido de peróxido de hidrógeno y compuestos antimicrobianos metilglioxal, así como de los propóleos sobre P. gingivalis
tensiones en el crecimiento del plancton y en un biofilm de una sola especie.
Métodos
Porphyromonas gingivalis cepas

Veinte P. gingivalis
cepas de la colección de cepas del Laboratorio de Microbiología Oral (Universidad de Berna, Departamento de Periodontología) se incluyeron en los experimentos de cribado para determinar la concentración inhibitoria mínima (MIC) valores de las mieles. Las cepas fueron incluidos dos cepas de laboratorio (ATCC 33277, W83) y 18 en bancos como los aislados de muestras de periodontitis (BGH40-2, D2-4-3, D5-2-2, J358-1, J361-1, J362-1, J374 -1, J378-1, J424-1, J426-1, J430-1, J435-1, J439-1, M5-1-2, Marl, PL55, PL110, PL126). En los experimentos de seguimiento se utilizaron el tipo de cepa ATCC 33277 y otras tres cepas (M5-1-2, Marl, J361-1). La selección se basa en la diferente morfología de las colonias. formas de deformación M5-1-2 colonias lisas, Marl los muy ásperas y colonias J361 similares a las formadas por el tipo de cepa. La identidad fue confirmada por análisis de secuencias de ADNr 16S.
Todas las cepas se mantuvieron congeladas antes de los experimentos. Ellos fueron transferidos y se cultivaron en condiciones anaerobias (10% H 2, 5% de CO 2, el 85% de N 2) en Schaedler placas de agar (Oxoid, Basingstoke, GB) que contiene 8% de sangre de oveja 24 h antes comenzar los experimentos a 37 ° C.
las mieles, sus compuestos potencialmente antimicrobianas y propóleo
un local (alemán) Multifloral flores de miel de un apicultor y una miel de Manuka de Nueva Zelanda (Nueva Zelanda Manuka Health Ltd, Te Awamutu, Nueva Zeeland) fueron seleccionados para los experimentos. Las pruebas de cultivo de las dos mieles en condiciones anaeróbicas no mostró ningún crecimiento microbiano; por lo tanto, no se aplicó la irradiación gamma. Todos los medios de comunicación en los experimentos con miel contenían 0,1% (v /v) de Tween 20 para aumentar la solubilidad de la miel.
El contenido de peróxido de hidrógeno se midió por medio de permanganato de potasio [23] y se determinó los de metilglioxal por inversa fase, la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC-RP) de acuerdo con Mavric et al. [14]. Metilglioxal y peróxido de hidrógeno (ambos de Sigma-Aldrich, Steinheim, Alemania) estaban disponibles como 40% y una solución 30% en agua. El propóleos se obtuvo como una dilución en etanol 20% a partir de un apicultor local. Por lo tanto, en todos los propóleos pruebas experimentos, se añadió la cantidad respectiva de etanol.
Determinación de las concentraciones inhibitorias mínimas
Las susceptibilidades se determinaron por la técnica de dilución de caldo de micro-siendo una técnica estándar en microbiología [24]. 17 partes (170 l cada una) de caldo de Wilkins-Chalgren (Oxoid) se mezclaron con 1 parte de suspensión bacteriana (10 l) y 2 partes de la miel diluida en cloruro de sodio 0,9% (20 l cada uno). Las concentraciones finales oscilaron entre 1 y 10% (w /v) de miel. Del mismo modo, se determinaron las CIM de metilglioxal y peróxido de hidrógeno. Las concentraciones a ensayar se entre 0,1 y 100 mg /l. El propóleos se puso a prueba en el intervalo de 20 - 20.000 mg /l. solución de cloruro sódico 0,9% sirvió como control de crecimiento. Después de un tiempo de incubación de 42 h, las CMI se determinaron visualmente. Los resultados se confirmaron mediante el subcultivo de cada uno 10 l de caldo en placas de agar Schaedler. La MIC se definió como la concentración más baja reprimir el crecimiento visible.
Single-especies biofilms
Las cepas bacterianas se precultivaron en caldo de Schaedler (Oxoid) añadida por 8% durante la noche de sangre de oveja lisadas. Para determinar los efectos sobre la formación de biofilm un ensayo, los portaobjetos se colocaron en pocillos de placas de 24 pocillos y se han cubierto de saliva artificial (250 ml cada una) para 1 h a 37 ° C para crear una película. 1 l de la saliva (ISO 10993) contenía 0,7 g de cloruro de sodio, 0,26 g de fosfato disódico, 0,33 g de tiocianato de potasio, 1,2 g de fosfato de dihidrógeno de potasio 1,5 g de hidrógeno carbonato de sodio y 1,2 g de cloruro de potasio; esta solución se suplementó con 4 g porcino mucina de tipo II y 50 g de albúmina. Después de la eliminación de la saliva artificial, se transfirieron 1,8 ml de suspensión bacteriana a los pocillos, seguido de 200 l de miel en diferentes diluciones. Las concentraciones finales de miel en las mezclas eran 1 y 10% (w /v). El control negativo fue una solución de cloruro sódico al 0,9%. Después de 6 h y 24 h de incubación en una atmósfera anaeróbica a 37 ° C, se retiraron los portaobjetos, poco se sumerge en una solución de cloruro sódico al 0,9% para eliminar las bacterias no adherentes y luego se coloca dentro de otros tubos que contienen solución de cloruro sódico 0,9%. Los tubos han sido expuestas a tratamiento con ultrasonidos de 160 W (SONOREX Súper RK102H, Bandelin, Berlín, Alemania) durante 1 minuto. Después de una agitación posterior de 1 min, los números de P. gingivalis viables
se determinaron como unidades formadoras de colonias (CFU) después de la siembra de 100 l de la suspensión en placas de agar Schaedler y el cultivo.
Más, los efectos de se probaron las mieles de un biofilm 42 h de edad. En estos experimentos, las suspensiones bacterianas se colocaron en los pocillos después de crear la película artificial. Cuarenta y dos horas después de comenzar la incubación, los sobrenadantes se retiraron cuidadosamente y se sustituyen por las soluciones de caldo y miel de nutrientes. Las concentraciones finales usadas en estos experimentos fueron también 1% y 10% (w /v) de miel. Después de un tiempo de incubación adicional de 6 hy 24 h, el número de bacterias viables se determinaron como se ha descrito anteriormente.
En experimentos de seguimiento, peróxido de hidrógeno y metilglioxal se pusieron a prueba en lugar de miel. Las concentraciones finales fueron 5, 20 y 100 mg /l de peróxido de hidrógeno y metilglioxal respectivamente. El propóleo se puso a prueba en las concentraciones finales de 20 mg /ly 200 mg /l. MyBestPlay Todos los experimentos se realizaron en tres repeticiones independientes por lo menos. El análisis estadístico se realizó mediante la prueba t de Student para muestras independientes con el programa SPSS v.17.0 Estadísticas (IBM, Chicago, IL). Las muestras de ensayo fueron cada uno en comparación con los controles. El nivel de significación se fijó en p & lt; 0.05.
Resultados
contenido de compuestos potencialmente antimicrobianas comentario El miel de abeja contenía 1,87 mg /kg de peróxido de hidrógeno y los nacionales de miel 3,74 mg /kg. Se encontró que la cantidad de metilglioxal a ser de 2 mg /kg en la miel doméstica y 982 mg /kg en la miel de Manuka.
concentraciones inhibitorias mínimas Hoteles en los ensayos de selección que incluye 20 P. gingivalis
cepas, la concentración inhibitoria mínima contra 50% de las cepas incluidas (MIC 50) fue 5% para la miel apicultor doméstica local y 2% para la miel de Manuka. La miel doméstica no inhibió el crecimiento de las tres cepas de hasta 10% de la miel, mientras que el crecimiento de sólo una cepa no fue suprimido por 10% (w /v) de miel de Manuka.
En experimentos que continúan se incluyeron cuatro cepas . El crecimiento de P. gingivalis
cepas fue inhibida por 10 mg /l de metilglioxal con la excepción de la cepa de referencia (ATCC 33277) en el que el MIC era 100 mg /l del compuesto. La gama de los micrófonos de peróxido de hidrógeno fue de entre 5 y 20 mg /l. El propóleos era inhibidor del crecimiento en el rango de 20 mg /l (M5-1-2 cepa) a 200 mg /l (Marl cepa) (Tabla 1) .Tabla 1 mínimas concentraciones inhibitorias (MIC) de las mieles, su potencial antimicrobiano componentes y propóleo contra cuatro cepas de Porphyromonas gingivalis
Porphyromonas gingivalis cepa

MIC de mieles (% w /v) guía empresas MIC de los componentes (mg /l)

CIM de propóleo (mg /l)
Manuka
local
El peróxido de hidrógeno metilglioxal
ATCC 33277

2

5

10

100

40


M5-1-2

2

5

5

10

20


MaRL

2

10

20

10

200


J361-1

2

5

5

10

40


Efectos de la miel en los biofilms
miel inhibieron la formación de P. gingivalis
biopelícula de una sola especie. Seis horas después de comenzar los experimentos, no hubo diferencias eran visibles. En el momento 24 h, ambos tipos de miel reducen dependiente de la concentración el número de bacterias viables. Cuando se utilizó la concentración más alta de 10%, el número de bacterias en la biopelícula (media de todas las cepas) fueron significativamente inferiores (cada p & lt; 0,05) que en los controles sin adición de miel (Figura 1). Figura 1 Efecto de la miel en la formación, así como en un 42 h de edad biofilms individuales de cuatro cepas de Porphyromonas gingivalis. La miel de Manuka y una miel de la zona alemán se añadieron en dos concentraciones en el comienzo de la formación o en una ya 42-h de edad biofilm. Se determinaron las unidades formadoras de colonias de cada 6 hy 24 h después de la adición de las mieles (CFU conteos dentro de la biopelícula; * p & lt; 0,05; ** p & lt; 0,01 en comparación con los controles en el momento respectivo) guía de adición de las mieles. a un 42 h de edad biofilm resultó también en una reducción de los recuentos medios de P. gingivalis
cepas dentro del biofilm 6 h y 24 h después de la exposición (6 h 1% de producción local de miel p & lt; 0,05, todos los demás p & lt; 0,01). Las diferencias entre los dos tipos de miel no fueron significativas dentro de la misma concentración ni en los experimentos de prueba el efecto sobre la formación de biopelículas, ni si se estudió un biofilm 42 h de edad (Figura 1).
Al analizar los efectos dependientes de la tensión, los aislados clínicos eran más susceptibles en comparación con la cepa de tipo (control). Las diferencias fueron significativas (p & lt; 0,05) para 1% (w /v) de miel de Manuka 6 h después de comenzar la formación de biopelículas. En los experimentos de prueba los efectos de mieles en 42 h de edad biofilms, 10% de la miel de Manuka (p & lt; 0,05), así como 1% y el 10% de la miel de producción local (cada p & lt; 0,01) mostró una fuerte eficacia antibacteriana en cepas clínicas que en la cepa de referencia 6 h después de la adición de las biopelículas existentes. 24 h después de la adición de las mieles a ambos tipos de los experimentos, las diferencias dependientes de deformación no eran visibles por más tiempo (Figura 2). Figura 2 Las relaciones individuales de biopelículas Porphyromonas gingivalis después de la adición de mieles con los controles no tratados cada uno (unidades formadoras de colonias).
Efectos de metilglioxal y peróxido de hidrógeno en biofilms
La adición del peróxido de hidrógeno y compuestos metilglioxal antibacteriano no cambió los recuentos de UFC de P. gingivalis
dentro de biofilm en cualquier punto de tiempo, ni en el biofilm de formación ensayos ni en los experimentos utilizando 42-h de edad biofilms (Figura 3). Además, no se detectaron diferencias dependientes de tensión (datos no mostrados). Figura 3 Efecto de los compuestos antimicrobianos potenciales de la miel en la formación, así como en unas 42 h de edad, las biopelículas de una sola especie existentes de cuatro cepas de Porphyromonas gingivalis. Metilglioxal siendo el compuesto antimicrobiano potencial de miel de Manuka y peróxido de hidrógeno como el compuesto antimicrobiano potencial de la miel local alemán se añadieron en tres concentraciones en el comienzo de la formación o en una ya 42-h de edad biofilm. Se determinaron las unidades formadoras de colonia de cada 6 h y 24 h después de la adición de los compuestos (CFU recuentos dentro de la biopelícula; * p & lt; 0,05; ** p & lt; 0,01 cada comparación con los controles en el momento respectivo) guía Efecto de propóleos. en las biopelículas
una concentración de propóleos de 20 mg /l redujo los recuentos de CFU en el biofilm que forma después de 24 h (p & lt; 0,05). No se encontraron efectos mediante pruebas de la mayor concentración de 200 mg /l. Además de los propóleos a un biofilm 42 h de edad, no cambió el número de bacterias después de 6 h. Después de 24 h la menor concentración de 20 mg /l de propóleos fue eficaz en la reducción de los recuentos de CFU; de nuevo, 200 mg /l no mostró ningún efecto (Figura 4). La cepa más resistente fue la cepa Marl; en el biofilm formando así en el 42 h de edad, biofilm, un mayor número de CFU se encontraron en comparación con las otras cepas después de 24 h adición de 200 mg /l propolis (datos no mostrados). Figura 4 Efecto de los propóleos sobre la formación, así como en unas 42 h de edad, las biopelículas de una sola especie de cuatro cepas de Porphyromonas gingivalis. Propolis se añadió en dos concentraciones en el comienzo de la formación o en una ya 42-h de edad biofilm. Unidades formadoras de colonias se determinaron cada 6 hy 24 h después de la adición de los propóleos (CFU cuenta dentro de la biopelícula; * p & lt; 0,05; ** p & lt; 0,01 en comparación con cada uno de los controles en el momento correspondiente). Discusión
la miel actúa antibacteriana contra cepas de P. gingivalis
, el efecto está siendo más pronunciada en el caso de la miel de Manuka en comparación con una miel apicultor de producción local. Los valores de CIM obtenidos están en el rango o por debajo de los reportados para otras especies. .
Por ejemplo, 10 - 50% de miel eran inhibidora del crecimiento contra varios enterobacteriacae y estafilococos, diferentes tipos de miel, sólo hubo diferencias en la eficacia antimicrobiana bajas [25-27]. Contradictorios son los resultados relativos a los microbios orales. En una MICs de estudio de 12,5 a 25%, se determinaron frente a estreptococos orales [25], mientras que otros encontraron 0.1% inhibidor del crecimiento contra estreptococos orales y anaerobios [28]
La miel contiene diferentes compuestos antimicrobianos.. En este estudio, peróxido de hidrógeno y metilglioxal se ensayaron por separado. El contenido de metilglioxal dentro de la miel de abeja era casi 1 g /kg, ligeramente superior a la determinada por otros [29, 30]. A raíz de la CIM de las mieles y metilglioxal, este compuesto podría ser responsable de la actividad antimicrobiana de la miel de Manuka contra los P. gingivalis planctónicos
cepas. El contenido de peróxido de hidrógeno fue mayor en la miel doméstico que en la miel de Manuka. Otros No se encontró ninguna peróxido de hidrógeno dentro de la miel de abeja [30]. Sin embargo, otro estudio en el que la eficacia antimicrobiana se redujo cuando el peróxido de hidrógeno se eliminó de la miel de abeja implica también un contenido de esa sustancia dentro de la miel. Nuestros resultados obtenidos por un método ampliamente utilizado puede ser falsa influenciados positivamente por los compuestos orgánicos de la miel [23]. Sin embargo, las concentraciones medidas de peróxido de hidrógeno dentro de ambos tipos de miel eran demasiado bajos para una acción antimicrobiana frente a las cepas de P. gingivalis
incluidas en nuestro estudio. Pero curiosamente, la cepa que presenta la mayor resistencia contra el peróxido de hidrógeno también era menos sensible a la miel producida localmente. Otro compuesto antimicrobiano potencial no se ha estudiado en la miel es el azúcar, pero no ejerce o antibacteriano efecto limitado [25, 26]. Por otra parte, de origen natural péptidos antimicrobianos podrían contribuir a la eficacia antimicrobiana de las mieles, recientemente una defensina de abeja ha sido descubierto en un médico (fuente Revamil®) miel [30]. Además, un efecto de una disminución del pH no puede ser completamente excluida, ya que 10% de la miel redujo el pH de aproximadamente pH 0,3 como se mide en el caldo. Propóleo actúa antibacteriana frente a diversos microorganismos anaerobios orales entre ellos P. gingivalis
[31]; MIC de propóleo contra P. gingivalis ATCC 33277
se informaron en dos estudios como los comprendidos entre 64 y 512 mg /l (diferentes tipos de propóleos provenientes de Brasil y Turquía han sido probadas) [32, 33]. En nuestro estudio, sólo se incluyó un tipo de propóleos procedentes de una región de tierras bajas en Alemania se caracteriza por un clima templado. MIC contra P. gingivalis ATCC 33277
se encontró que era ligeramente inferior a la reportada antes. CIMs contra los aislados clínicos no eran únicos; el intervalo fue 20 - 200 mg /l
Biofilms son conocidos por ser más resistente contra antimicrobianos que las bacterias planctónicas crecimiento;. antibióticos son 100 veces menos sensible frente a P. gingivalis Hoteles en biopelículas [34]. Por lo tanto, mieles, incluyendo sus compuestos potencialmente antimicrobianas también fueron probados en un P. gingivalis
biopelícula. El modelo utilizado fue una simple usando saliva artificial para simular las condiciones orales. Pero tiene que tener en cuenta que la placa dental representa un mucho más complejo biofilm altamente organizada [35, 36] que consta de hasta 7000 a nivel de especie phylotypa [37], donde la comunicación se produce dentro de las diferentes especies [38]. Aquí, hemos querido mostrar un efecto potencial sobre la formación de una biopelícula que representa la situación in vivo después de la rotura mecánica de una biopelícula y en una biopelícula 42 h de edad. La eficacia de la miel y sus compuestos en P. gingivalis
biopelículas fue limitada. Ninguno de los dos vio la erradicación completa de una biopelícula 42 h de edad, ni la prevención total de la formación de biopelículas. Sólo el 10% de ambos tipos de miel, así como 20 mg /l propóleos fueron capaces de reducir los recuentos de CFU dentro de biofilm 24 h después del inicio de la formación de biopelículas. Sorprendentemente, los efectos de la miel eran más notable en un biofilm 42 h de edad. En nuestro estudio la acción de la miel de abeja, especialmente frente a P. gingivalis
biopelículas parece ser no sólo debido a un efecto bactericida de metilglioxal tal cual era en sí misma no efectiva en esas condiciones. Una interacción potencial con P. gingivalis
cápsula puede desempeñar un papel en la interrupción de las biopelículas sugeridas por el hallazgo de que en contraste con la mayoría aislados clínicos los más resistentes ATCC 33277 cepa se caracteriza por falta formación de la cápsula [39, 40]. Recientemente, se informó de que alrededor del 25 - 50% de la miel era bactericida para S. aureus
incluyendo cepas resistentes a la meticilina y Pseudomonas aeruginosa durante la noche
biofilm de una sola especie, al contrario de la mayoría de los antibióticos que no mostraron ningún efecto [41]. Otro estudio encontró 6 - 12% de la miel de abeja y un 12 - 25% de una miel de bosque noruego preventiva en la formación de biopelículas de estafilococos y aerobios gram-negativas [42]. Sólo un estudio examinó el efecto de metilglioxal en la formación de biopelículas, 1,05 mg /ml metilglioxal eran bactericida frente a 30 h de edad, S. aureus
biopelículas [29]. Curiosamente, este valor fue también más alto que los medidos en su respectivo miel [29] que implica que metilglioxal no es el único compuesto bactericida que actúa. En estos estudios, las concentraciones ensayadas de miel y metilglioxal fueron más altos que en los ensayos de los nuestros. Tuvimos que garantizar unas condiciones adecuadas de crecimiento de P. gingivalis
que requerían una cantidad suficiente de medios nutrientes. Además en la cavidad oral, un efecto de dilución por la saliva y el flujo crevicular gingival tiene que ser considerada. Sin embargo, estudios posteriores deben probar las concentraciones más altas de metilglioxal también.
En experimentos usando el propóleo, un efecto inhibidor sólo en la concentración de 20 mg /l fue encontrado, la mayor concentración probada del propóleos no tenía ningún efecto sobre los cargos de bacterias viables dentro de las biopelículas. Probablemente, el efecto limitado de propóleo es no sólo debido a las acciones directas antimicrobianos. El propóleos interactúa negativamente con S. aureus
adhesión y la formación de biopelículas mediante la inhibición de los factores de virulencia en baja concentración [43].
Además de su actividad antibacteriana, se han descrito efectos immunmodulatory de miel. Honey estimula la liberación de citoquinas inflamatorias a partir de monocitos [44], la expresión de ARNm de TGF-β como una curación de heridas promoviendo citoquina es upregulated [45]. El propóleos no tiene una alta citotoxicidad contra las células del ligamento periodontal [46]. Se suprime la síntesis de citoquinas inflamatorias, mientras que se aumenta el TGF-β1 [47].
En un estudio in vitro se demostró que la clorhexidina actúa más que la miel antibacteriana [48]. Sin embargo, la adición de miel o sus componentes como los productos naturales a enjuagues bucales, pastas de dientes puede ser discutido como una opción beneficiosa en la prevención y terapia de periodontitis. Una irrigación subgingival con propóleos extraxt mejoró los parámetros clínicos y redujo los recuentos de P. gingivalis
[22]. En un estudio piloto incluyendo pacientes gingivitis, el uso de una goma de mascar que contiene miel de Manuka reduce las variables inflamatorias y la placa-score en comparación con una goma de mascar sin miel [19].
Conclusiones
En conclusión, la miel especialmente la miel de Manuka actúa inhibidor del crecimiento de la P. gingivalis
como periodontopathogen importante.
Este efecto sobre las bacterias planctónicas pero no dentro de la biopelícula se basa en la metilglioxal ingrediente. La miel puede destruir las biopelículas que contienen P. gingivalis
. Por lo tanto, una adición de miel o sus compuestos a los productos para el cuidado de la salud oral puede tener potencial en la prevención y el tratamiento de la periodontitis. Se necesitan más estudios para verificar específicamente el efecto de la miel y sus compuestos en las especies orales asociados con la periodontitis.
Declaraciones
Reconocimiento
Agradecemos a Claudia Ranke (Hospital Universitario de Jena) para obtener ayuda excelente en la realización de la in ensayos in vitro. Los autores desean agradecer a Wilfried Dolz y Martín Kramesberger por darnos la miel apicultor local y el propóleos. Juergen W. Einax '(Universidad de Jena) consejos útiles para determinar el contenido de peróxido de hidrógeno dentro de las mieles son muy apreciados. Estamos en deuda Richard Miron (Universidad de Berna) para las correcciones de lenguaje y Walter Bürgin (Universidad de Berna) para el asesoramiento estadístico. Este estudio fue financiado institucionalmente. No se proporcionó financiación externa.
los autores originales presentados archivos de imágenes
A continuación se presentan los enlaces a los autores originales presentados archivos de imágenes. 'archivo original para la figura 1 12903_2013_363_MOESM2_ESM.tif autores 12903_2013_363_MOESM1_ESM.tif Autores archivo original de' archivo original de la figura 3 12903_2013_363_MOESM4_ESM.tif autores figura 2 12903_2013_363_MOESM3_ESM.tif Autores archivo original de la figura 4 Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.
autores
SE participó en la planificación y el diseño del estudio, así como en el análisis de datos. GS realizó el trabajo de laboratorio microbiológico. JK participó en el diseño del estudio y análisis de datos. JA y TH realizaron análisis de las mieles. WP participó en la planificación y diseño del estudio. Todos los autores participaron en la redacción del manuscrito; que han leído y aprobado el manuscrito final.