Abstract
Antecedentes
Candida albicans
es una levadura diploide que de alguna circunstancias pueden causar infecciones orales o de la orofaringe. Esta investigación dirigido a estudiar la prevalencia de Candida spp
. y analizar los genotipos ABC de 76 aislamientos clínicos de C. albicans
obtenido de la cavidad oral de pacientes con trasplante renal a partir de dos regiones geográficas distintas de Brasil.
Métodos
hemos escrito 48 cepas con ABC genotipificación y Microsatelitte usando el cebador M13 y probados tres factores de virulencia in vitro:. actividad fosfolipasa, la morfogénesis y la capacidad de evadir la fagocitosis por los neutrófilos polimorfonucleares
resultados
C. albicans
fue la especie más frecuente (86,4%), seguido de C. tropicalis gratis (4,5%). C. albicans
genotipo A fue la más frecuente (58 aislamientos; 76,4%), seguido por el genotipo C (15 aislamientos; 19,7%) y genotipo B (3 aislamientos; 3,9%). Cuando se aplicó la técnica de microsatélites con el cebador M13, 80% de los aislamientos del Sur se colocaron dentro de la misma agrupación. La mayoría de las cepas del genotipo C se agruparon en dos grupos diferentes. El genotipo C se consideró más resistentes a los PMN ataque que los genotipos A y B. Las cepas aisladas del sur de Brasil mostraron también una mejor capacidad para combatir los PMN fagocitosis.
Conclusiones
se encontró una alta tasa de C. albicans
genotipo C cepas aisladas de la cavidad oral de este grupo de pacientes. En este estudio se caracteriza C. albicans orales
cepas aisladas de receptores de trasplante renal y contribuirán a una mejor comprensión de la patogénesis de la candidiasis oral.
Factores Palabras clave
Candida
candidiasis oral receptores de trasplante de riñón spp Genotipado de virulencia material electrónico complementario
la versión en línea de este artículo (doi:. 10 1186 /1472-6831-14-20) contiene material complementario, que está disponible para los usuarios autorizados
Antecedentes
a pesar del hecho. que la Candida spp
. pertenecer a la microbiota oral normal, que vive en la lengua, encías, paladar y la saliva de individuos sanos como levaduras comensales, que pueden causar infecciones orales o de la orofaringe [1, 2]. Candida spp
. se han aislado de 40 a 60% de bocas sanas, mientras que la candidiasis oral es más común en individuos inmunodeficientes, aquellos con enfermedades subyacentes graves, y portadores de prótesis superiores [3, 4].
A pesar del hecho de que otros Candida menos virulenta
especies como C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei y C. dubliniensis
también se han aislado de la saliva de los pacientes con o sin candidiasis oral, C. albicans
sigue siendo las especies más frecuentes asociados con lesiones orales [5].
Hay varios factores que pueden contribuir a la transición de las levaduras patógenas comensales a las formas que están relacionadas con alteraciones del sistema inmune del huésped asociada a la virulencia del microorganismo. Los principales factores de virulencia de C. albicans
incluyen Bud-a-hifa de transición (también llamada morfogénesis), la adhesión a células epiteliales humanas y células endoteliales, la formación de biopelículas, la capacidad de secretar enzimas hidrolíticas (principalmente proteinasas y fosfolipasas), el cambio fenotípico (transición blanco-opaco), así como la evasión de acogida células inmunes [6, 7].
Algunos estudios han evaluado C. albicans
genotipos ABC aisladas de la cavidad oral de diferentes individuos y los resultados parecen ser muy variables, de acuerdo con la población evaluada. Por ejemplo, un estudio con 11 pacientes diabéticos con periodontitis reveló que el 51,6% subgingivales C. albicans
aislados pertenecían al genotipo B [8], el genotipo, mientras que otra investigación ha encontrado un carácter preponderante [9]. La prevalencia de
la candidiasis oral en pacientes con trasplante renal que se describen en los rangos de la literatura del 9,4% al 46,7% [10-12]. Un estudio realizado en México por De La Rosa-García et al [11], informa el 18,7% de los casos de candidiasis oral en un total de receptores trasplantados renales 90.
Nuestro grupo ha publicado previamente una comparación de algunos factores de virulencia (biofilm la producción, la adhesión a células epiteliales bucales humanos y la actividad de proteinasa) entre C. albicans y no
C. Candida albicans
aislamientos obtenidos a partir de la cavidad oral de los receptores de trasplante renal de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil [13]. Este estudio es un seguimiento de esta publicación anterior incluyendo otras cepas pertenecientes a otra región geográfica de Brasil. Además, se investigaron otros atributos de virulencia. Por lo tanto, los objetivos del presente estudio fueron determinar la distribución de especies de Candida
y para caracterizar genotípicamente 48 C. albicans
cepas aisladas de la cavidad bucal de 154 receptores de riñón trasplantado de dos regiones geográficas diferentes de Brasil (Nordeste y Sur ). Además, las cepas se caracterizaron fenotípicamente por la capacidad de expresar los siguientes factores de virulencia in vitro:. La secreción de la fosfolipasa, la transición de células de levadura para las hifas (morfogénesis) y la capacidad de resistir a la fagocitosis por los neutrófilos polimorfonucleares
Métodos las cepas
selección
durante un período de 3 meses, 154 pacientes de dos regiones geográficas diferentes de Brasil (111 de Natal, Rio Grande do Norte y 43 de Maringa, Paraná) se sometieron a un examen clínico de la cavidad oral para diagnóstico de la candidiasis, de acuerdo con los criterios establecidos para las lesiones orales en pacientes con VIH recomendadas por el EC-Centro de Información y las clasificaciones de la Organización Mundial de la Salud [14]. Sólo los pacientes que accedieron a participar en un estudio confidencial de vigilancia, de conformidad con el comité local de Ética de Investigación del Hospital Universitario Onofre Lopes, aprobada bajo el número 152/07, se inscribieron en este estudio. Las cepas aisladas de la colonización oral (sin síntomas) o durante los episodios de candidiasis oral se evaluaron en este estudio. Para los estudios de genotipado y de virulencia, se seleccionaron al azar 48 cepas clínicas de C. albicans gratis (38 de Natal, Rio Grande do Norte y 10 de Maringa, Paraná). Todos los aislados se describen en la Tabla 1. Las muestras se almacenan en YPD glicerol (/L de extracto de levadura 10 g, 20 g /L de peptona, 20 g /l de dextrosa y 3% de glicerol) a -80 ° C en el Laboratorio de Micología Médica e Molecular, Universidad Federal do Rio Grande do Norte, Brasil. C. albicans
ATCC90028 y SC5314 se incluyeron en este estudio como referencia strains.Table 1 Datos demográficos de los receptores de trasplante renal de Natal, RN y Maringa, PR, Brasil, de acuerdo con el género, la edad y la enfermedad subyacente
Variables
Natal (n,%) guía empresas Maringa (n,%) guía empresas total (n,%)
Hombre
64 (73,6) guía empresas 23 (26.4)
87 (100)
Mujer
47 (70,1) guía empresas 20 (29.9)
67 (100)
Edad
12-18 años
6 (85,7)
1 (14,3) guía empresas 7 (100)
19-34 años
44 (81,5) guía empresas 10 (18.5)
54 (100)
35-64 años
59 (64,8) guía empresas 32 (35.5)
91 (100) guía empresas
65 años de edad o más
2 (100) guía empresas 0 (0)
2 (100)
Subyacente enfermedad
La nefropatía diabética
8 (66,7)
4 (33,3)
12 (100)
La hipertensión arterial
47 (85,4) guía empresas 8 (14,6)
55 (100)
glomerulonefritis
23 (76,7)
7 (23,3)
30 (100)
enfermedades del riñón poliquístico
6 (66.7)
3 (33,3)
9 (100)
Otros
27 (56.25) guía empresas 21 (43.75)
48 (100)
recogida y levaduras muestras de identificación
las muestras que contienen 2 ml de saliva se obtuvieron de todos los pacientes, por la estimulación previa con las gomas de mascar. Cuando las lesiones estaban presentes, un hisopo estéril se frota sobre la superficie de la mucosa de la cavidad bucal. Posteriormente, 100 l de células se inocularon suspensiones en la superficie de Sabouraud Dextrosa Agar (SDA; Oxoid, Reino Unido) que se añade 300 g /ml de cloranfenicol (Park-Davis), mediante el uso de un bucle Drigalsky. Las placas se incubaron a 37 ° C durante 48 h. Las colonias de levadura se sembraron en CHROMagar Candida® (CHROMagar Microbiología, París, Francia) para comprobar la pureza y la detección de diferentes colonias de color. La identificación de especies se basa en las características de las células observadas microscópicamente después del cultivo en agar de harina de maíz añadido Tween 80, así como sistema de asimilación y pruebas de fermentación y ID32C (bioMérieux Marcy l'Etoile, Francia), siempre que fuera necesario [15]. Las cepas pertenecientes a la especie Candida parapsilosis
complejos se identificaron previamente con métodos moleculares [13].
C. albicans
extracción de ADN de C. albicans
células se cultivaron durante la noche en medio líquido YPD ( dextrosa 20 g /L, peptona 20 g /L, extracto de levadura 10 g /L) se incubaron a 30 ° C hace girar a 200 rpm en un agitador giratorio (TE-420, Tecnal ® Piracicaba, Brasil). Se extrajo el ADN utilizando el reactivo PrepMan Ultra preparación de muestras (Applied Biosystems, Foster City, CA) según las instrucciones del fabricante. La concentración de ADN genómico y la pureza se comprobaron con un instrumento NanoDrop (Thermo Scientific; Amersham Pharmacia Biotech, Wilmington, DE, EE.UU.).
microsatélites PCR y escribiendo ABC genotipificación de microsatélites
tipificación se realizó mediante el cebador M13 (5 'GAGGGTGGCGGTTCT --3 ') (IDT) como se describe anteriormente [16]. ABC genotipificación se realizó con los siguientes cebadores: CAINT- L (5'-ATAAGGGAAGTCGGCAAAATAGATCCGTAA-3 ') y CA-INT-R (5'-CCTTGGCTGTGGTTTCGCTAGATAGTAGAT-3') [17]. Brevemente, 1,0 l de ADN 40 ng /l se añadió a 29 PCR Master Mix (Promega) en un volumen final de 25 mL. Las muestras se amplificaron en un termociclador (Amplitherm TX96, EE.UU.), utilizando los siguientes parámetros de ciclo: un ciclo inicial de 94 ° C durante 3 min, seguido de 30 ciclos de 1 min a 94 ° C, 1 min a 57 ° C, 1 min a 72 ° C y un ciclo final de 5 min a 72 ° C. Para microsatélites mecanografía, 1,0 l de ADN 40 ng /l, 2,5 l de 10 x tampón de PCR (100 mM Tris-HCl, pH 8,3, KCl 500 mM, MgCl 3,5 mM 2), 5 l de dNTPmix (100 mM cada dNTP), 1,0 l de cada cebador (50 pmol /l), 0,13 l de tween 20 y 1,0 unidad de ADN polimerasa Taq se añadieron a un volumen final de 25 mL. Cuarenta y cinco ciclos de amplificación se realizaron utilizando los mismos parámetros de ciclo descritos anteriormente, excepto que la temperatura de hibridación fue 36 ° C para el tipado de microsatélites. Productos de PCR fueron de tamaño separaron por electroforesis en gel de agarosa, y el gel se tiñó en una /bromuro de etidio solución tampón 0,5 g ml (TAE).
de análisis de datos de microsatélites asistida por ordenador
Gel imágenes se analizaron con el GelCompar II software, la versión 4.5 y BioNumerics (Applied Maths, Kortrijk, Bélgica). Las similitudes entre los perfiles se calcularon utilizando el coeficiente de dados para generar las matrices de coeficientes de similitud a dendrograma construcciones. Para el perfil de agrupamiento, se utilizó el método de agrupamiento de pares no ponderado con promedios aritméticos con una tolerancia de 2%.
Las pruebas para la formación de hifas
una cantidad inicial de 10 6 células /ml en YPD + 20% de FBS (suero bovino fetal, Sigma-Aldrich®, Brasil) se incubó a 37 ° C, con agitación giratoria a 200 rpm. Después de 3 h de incubación, las muestras de los cultivos se mezclaron con un volumen igual de 10% de formaldehído para detener a un mayor desarrollo y la media del índice de morfología (MI) se determinó [18]. Los valores cercanos a 1 indican una población de células de levadura esferoidales y valores cercanos al 4 indican una población de células de hifas verdaderas, con valores entre 1 y 4 indican morfologías mixtas o pseudohyphal.
Fosfolipasa ensayo
actividad fosfolipasa fue estimada por el método de yema de huevo agar [19], con inóculos preparado a partir de una noche NGY (Neopeptona (Difco, Detroit, MI) 1 g /L, glucosa 4 g /L y extracto de levadura 1 g /L) culturas estandarizada a 2 × 10 5 células /ml.
Candida albicans
matar por polimorfonucleares neutrófilos
PMN recién aisladas de muestras de sangre de un único voluntario sano en el día del experimento [20] se suspendieron en medio mínimo esencial de Eagle (Gibco) + HEPES 20 mM, pH 7,2, y normalizado a 8 × 10 5 PMN /ml. C. albicans
células cultivadas durante la noche en NGY lavaron y se resuspendieron a 5 x 10 6 levaduras /ml en HEPES-tamponada medio esencial mínimo de Eagle que contiene el volumen de un décimo de plasma humano fresco. Volúmenes iguales de PMN y de levadura suspensiones se mezclaron y se incubaron a 37 ° C durante 3 h con rotación a 50 rpm. La fagocitosis de C. albicans
se establecieron por triplicado contando el número de levaduras dentro o unidos en 100 PMN [21]. El análisis estadístico
Los datos fueron analizados utilizando el software estadístico "GraphPad", versión 3.0 . Los resultados se presentan como media ± desviación estándar, y las diferencias se analizaron mediante la prueba de Mann-Whitney. Para todos los análisis, P se consideró un valor por defecto de 0,05 y el intervalo de confianza del 95%.
: Resultados de la Pacientes datos clínicos y demográficos de datos demográficos
de los pacientes se resumen en la Tabla 1. Para ambas regiones, la mayoría de los pacientes tenían hipertensión arterial como la enfermedad de base más frecuente. Además, el grupo de edad más frecuente fue de 35 a 64 años (Tabla 1).
Microbiología perfiles de Candida spp
. en la candidiasis oral
De las cepas obtenidas de Natal, RN (noreste), fue posible aislar levaduras de 70 de los 111 pacientes (63,1%), mientras que desde Maringa, 12 de 43 (27,5%) Candida
se obtuvieron cultivos positivos spp. Distribución de las especies de ambas regiones se describe en la Tabla 2. C. albicans
fue la especie más predominante que se encuentra en ambas ciudades, seguida por C. tropicalis
. En un solo paciente de Maringa que era posible aislar tres cepas que pertenecen a diferentes especies de Candida
(C. albicans
, C. glabrata
, C. tropicalis
) .Tabla 2 Distribución de las especies de Candida spp. aislado de la cavidad oral de los receptores de trasplante de riñón a partir de dos regiones diferentes geográficas de Brasil: Natal, RN y Maringa, PR
Especies
Natal (n,%) guía empresas Maringá (n,% ) guía empresas total (n,%)
Candida albicans
59 (77,6) guía empresas 17 (22.4)
76 (100)
Candida dubliniensis
2 (100)
0 (0)
2 (100 )
Candida glabrata
2 (66,7)
1 (33,3)
3 (100)
Candida tropicalis
3 (75) guía empresas 1 (25)
4 (100)
Candida orthopsilosis
2 (100)
0 (0)
2 (100)
Candida metapsilosis
página 2 (100) guía empresas 0 (0)
2 (100)
total
69 (78,4)
página 19 (21,6)
88 (100)
Es de destacar que sólo se recolectó una muestra de cada paciente, a excepción de tres pacientes diferentes de la región sur de Brasil. De paciente de 37 años, la cepa 06S fue obtenida de la saliva, mientras que la cepa 06 L de lesión oral. Paciente 38 tenía dos cepas de C. albicans
recogidos de la misma lesión, que muestra dos fenotipos diferentes (10S claras, lisas y 10R, con colonias rugosas). Paciente 40 mostró se obtuvieron dos lesiones diferentes y dos cepas, uno de la lengua y otro de las encías (15 T y 15 g, respectivamente), además de una cepa obtenida a partir de saliva (15S).
ABC tipificación de Candida albicans
ADN de todas las 76 cepas de C. albicans
y las cepas de referencia ATCC90028 y SC5314 fue sometido a ABC a escribir. Genotipo A fue el más prevalente con 58 aislamientos (76,4%) seguido de genotipo C, con 15 cepas (19,27%) y el genotipo B, con 3 aislamientos (3,9%; Tabla 3). Se observó la misma tendencia cuando las cepas obtenidas de cada región se analizaron por separado: En el noreste de Brasil, C. albicans
genotipo A fue la más frecuente, con 42 aislamientos (71,2%), seguido por el genotipo C (n = 14 aislamientos; 23,7%) y el genotipo B, con 3 cepas (5,1%). La mayor incidencia de genotipo A también se encontró en el sur del país con 16 aislamientos (94,1%), seguido por el genotipo C (n = 1 aislar; 5,9%). C. albicans sobre B genotipo no se observó para los aislamientos obtenidos de esta región (Tabla 3) .Tabla 3 pacientes incluidos en este estudio, la región geográfica y la virulencia de genotipificación ABC atributos de Candida albicans
Aislar número
situación clínica
Procedencia
ABC escribiendo
actividad fosfolipasa PZ (cm) guía empresas Morfología Índice (MI) guía empresas de n C. albicans células fagocitadas por 100 PMN * (%)
1
Colonización
Natal
B
0,6 ± 0,07 2,46 ±
0,70
134 ± 15.3
2
Colonización
Natal
Un
0,55 ± 0,04 3,43 ±
0,77
115 ± 14,6
3
Colonización
Natal
Un
0,48 ± 0,06
3,22 ± 0,64
66 ± 7,9
5
La infección
Natal
C
0,58 ± 0,02 2,23 ±
0,57
98 ± 6,7
página 6
Colonización
Natal
Un
0,53 ± 0,01 2,24 ±
0,51
100 ± 12,5
8
Colonización
Natal
Un
0,57 ± 0,04 1,86 ±
0,43
130 ± 19
10
infección
Natal
B
0,56 ± 0,12
2,17 ± 0,62
166 ± 8,4
11
Colonización
Natal
C
0,58 ± 0,08 2,15 ±
0,77
28 ± 3,5
12
infección
Natal
Un
0,54 ± 0,02 2,46 ±
0,56
150 ± 11.1
13
La colonización
Natal
C
0,6 ± 0,03
2,17 ± 0,65
126 ± 31,6
17
Colonización
Natal
Un
0,52 ± 0,03
3,63 ± 0,63
98 ± 20,2
20
Colonización
Natal
Un
0,44 ± 0,01 2,85 ±
0,81
86 ± 21,2
21
Colonización
Natal
Un
0,4 ± 0,06
2,78 ± 0,92
114 ± 21,5
23
Colonización
Natal
C
0,53 ± 0,09 2,45 ±
0,67
101 ± 11,4
24
infección
Natal
Un
0,51 ± 0,10 3,05 ±
0,74
132 ± 13,9
28
infección
Natal
Un
0,55 ± 0,04 2,84 ±
0,80
165 ± 9,5
30
Colonización
Natal
C
0,52 ± 0,04 2,17 ±
0,62
119 ± 20
31
Colonización
Natal
Un
0,49 ± 0,03 2,64 ±
0,82
129 ± 15
32
Colonización
Natal
Un
0,49 ± 0,12
2,81 ± 0,65
123 ± 13.2
34
Colonización
Natal
Un
0,52 ± 0,07
2,36 ± 0,64
156 ± 16,5
37
Colonización
Natal
B
0,57 ± 0,01 3,38 ±
0,80
124 ± 19.1
40
infección
Natal
Un
0,51 ± 0,06
3,7 ± 0,56
142 ± 15,9
41
Colonización
Natal
Un
0,54 ± 0,03
2,7 ± 0,69
172 ± 21,1
44
infección
Natal
Un
0,48 ± 0,03
2,8 ± 0,77
176 ± 11,6
46
Colonización
Natal
Un
0,46 ± 0,04
2,81 ± 0,77
172 ± 20.1
50
Colonización
Natal
Un
0,54 ± 0,04 3,24 ±
0,88
157 ± 36,6
51
Colonización
Natal
Un
0,51 ± 0,02
2 ± 0,43
130 ± 19,5
53
Colonización
Natal
C
0,53 ± 0,09 2,79 ±
0,71
132 ± 15,9
54
Colonización
Natal
Un
0,47 ± 0,02
1,8 ± 0,40
132 ± 9,2
60
Colonización
Natal
C
0,57 ± 0,03
2,15 ± 0,36
146 ± 9
61
Colonización
Natal
Un
0,49 ± 0,01 2,48 ±
0,75
142 ± 9,2
70
Colonización
Natal
C
0,51 ± 0,03
2.99 ± 0.50
140 ± 12,7
72
Colonización
Natal
C
0,46 ± 0,04 2,31 ±
0,61
136 ± 9
82
Colonización
Natal
C
0,55 ± 0,03 3,36 ±
0,93
130 ± 13.2
85
La colonización
Natal
C
0.56 ± 0.04 3.15 ±
0,83
144 ± 9,5
107
Colonización
Natal
C
0,57 ± 0,01
2,39 ± 0,63
156 ± 10.1
06A
Colonización
Maringá
Un
0,5 ± 0,02 2,34 ±
0,71
80 ± 17,4
06 L
infección
Maringá
Un
0,56 ± 0,07
2,94 ± 0,58
75 ± 8,7
10Li
Colonización
Maringá
A
0,55 ± 0,01 2,42 ±
0,70
176 ± 6,1
10S
Colonización
Maringá
Un
0,64 ± 0,01 2,54 ±
0,76
105 ± 14,7
12A
Colonización
Maringá
Un
0,49 ± 0,02
3,3 ± 0,79
59 ± 16,8
12 L
infección
Maringá
Un
0,51 ± 0,05
3,2 ± 0,68
90 ± 13,2
15A
Colonización
Maringá
Un
0,42 ± 0,02 2,96 ±
0,83
116 ± 27,1
15G
infección
Maringá
Un
0,42 ± 0,03
3,13 ± 0,81
86 ± 21,9
15 L
infección
Maringá
A
0,47 ± 0,08 2,58 ±
0,68
76 ± 16,5
18A
Colonización
Maringá
C
0,56 ± 0,11 3,05 ±
0,67
102 ± 11.2
111 L
La colonización
Natal
C
0,55 ± 0,03
2,6 ± 0,70
80 ± 17,4
111R
Colonización
Natal
C
0,6 ± 0,15
4 ± 0,00
11 ± 3,2
ATCC90028
referencia
Un
0,7 ± 0,08
3,82 ± 0,5
158 ± 17,5
SC5314
referencia
Un
0,52 ± 0,04 3,28 ±
0,81
137 ± 20,6
los aislamientos se obtuvieron de la cavidad oral de los receptores de trasplante renal de Natal, RN y Maringa, PR, Brasil.
Candida albicans
tipificación de microsatélites ABC frente genotipado
seleccionaron al azar 48 aislamientos de C. albicans
incluyendo algunas cepas pertenecientes al genotipo a (21 de Natal ya 10 de Maringa) una todas las otras cepas pertenecientes a los genotipos B y C de ambas regiones y realizadas genotipado de microsatélites. El ADN genómico de todos los 48 aislados se amplificó con éxito con el cebador de M13, que se dirige a secuencias repetitivas del genoma. La amplificación de ADN generados patrones de bandas bien definidas, que van desde 100 pb a 2 kb. La técnica de microsatélites mostró suficiente poder discriminatorio para el reconocimiento de la variación intraespecífica (Figura 1). Como se esperaba, las cepas de control externo de C. albicans
, SC5314 y ATCC90028, se colocaron en completamente diferentes grupos por el análisis dendrograma realiza utilizando GelCompar II, lo que demuestra la eficacia de la técnica en la separación de las cepas aisladas de diferentes áreas geográficas. Estas cepas de control mostraron 75% de similitud y se colocan juntos dentro de un grupo diferente de todos los otros aislados clínicos (Figura 1). Figura 1 método de agrupamiento de pares no ponderado con promedios aritméticos dendrograma con el 2% de tolerancia de 50 cepas de Candida albicans aislados clínicos.
no hemos podido detectar ningún grupo determinado de cualquiera de colonizar o infectar cepas. Además, en ambos casos, las cepas se encontraron con 100% de similitud obtenida de diferentes pacientes. En cuanto a las comparaciones de la relación genética de las dos regiones geográficas diferentes de Brasil, pudimos observar un clúster enriquecido para Maringa (sur), donde el 80% de las cepas fueron colocados juntos. Además, que iban desde el 80% hasta el 93% de similitud entre ellos.
Otro hallazgo interesante se asocia con algún grado de correlación observada entre el tipo ABC de C. albicans
y el alto porcentaje de similitud entre estas cepas cuando se utilizó microsatélites cebador M13. En la mayoría de los casos, las cepas con idéntico porcentaje de similitud se determina con el cebador M13, también tenía el mismo genotipo A o C (a excepción de las cepas 02 y 85 de Natal, así como 15 T y 18A de Maringa; genotipos A y C en ambos casos). Además, C. albicans cepas
genotipo C de Natal se colocaron dentro de los dos grupos separados bien definidos con alta relación probada (más de 90% de similitud dentro del mismo grupo). En relación con el genotipo B, dos de cada tres aislamientos mostraron una similitud de 94%, de ser colocado en el mismo grupo (Figura 1).
Además, cuando diferentes cepas se obtuvieron de diferentes muestras del mismo paciente, todos ellos tenían el mismo genotipo ABC (genotipo A). No obstante atributos, microsatélites usando el cebador M13 mostró alto poder de discriminación, ya que estas cepas no fueron considerados idénticos con la última técnica, que muestra un cierto grado de variabilidad genética, cuando se utiliza este método.
La virulencia de Candida albicans
A, B y C genotipos Opiniones sobre todos los factores de virulencia de la prueba, sólo se realizó un análisis estadístico para las comparaciones entre las cepas pertenecientes a los genotipos a y C, debido al bajo número de cepas pertenecientes al genotipo B que se encuentra. En relación con la fosfolipasa producción, todas las cepas fueron capaces de producir la enzima, independientemente de si se obtuvieron de los episodios de la colonización o infección. Para el genotipo A, se obtuvo un Pz Mean de 0,51 ± 0,04, mientras que para el genotipo C, una media de 0,55 ± 0,05, mientras que para el genotipo B, la media Pz era 0,57 ± 0,07. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas cuando se compararon las cepas pertenecientes a los genotipos A y C (Tabla 3).
Cuando se utilizó el índice de morfología (MI) para marcar las células morfología, no hay diferencias claras podían ser observados para los tres diferentes A, B o genotipos C. La capacidad de las cepas para cambiar la morfología de células de las papilas de hifas cuando se cultivan en presencia de YPD + 20% de FBS se verificó para las cepas que pertenecen a los tres genotipos mencionados. Las células se encontraron predominantemente como seudohifas, con una media MI que van desde 2,66 ± 0,61 (genotipo C) a 2,77 ± 0,69 (genotipo A). La media MI aísla del genotipo B fue 2,67 ± 0,71. No se observaron diferencias estadísticas entre los aislamientos (Tabla 3).
también se investigó la capacidad de las diferentes cepas de resistir a la fagocitosis por los PMN. Por lo tanto, se determinó el número de células de C. albicans
fagocitados por 100 PMNs después de tres horas de co-incubación de ambas células. C. albicans
genotipo C fue más resistente al ataque de los PMN. Cepas pertenecientes al genotipo B tenían un promedio de 141.33 ± 14.27 células fagocitadas por 100 PMN. Las cepas que pertenecen al genotipo C fueron significativamente más resistentes al ataque de las células fagocíticas que los aislados que pertenecen al genotipo A (media de 109,93 ± 12,29 frente a 121,67 ± 16,06, respectivamente; Tabla 3). Atributos
virulencia de Candida albicans
cepas obtenidas a partir de dos regiones geográficas diferentes de Brasil (Nordeste y Sur).
Cuando los factores de patogenicidad se compararon entre todas las cepas obtenidas de las dos regiones geográficas, las cepas obtenidas de Maringa (Sur) expresaron de manera más eficiente todos los factores de virulencia evaluado in vitro. Esta diferencia se consideró estadísticamente significativo de la resistencia a la fagocitosis por los PMN (Tabla 4). Curiosamente, el 40% de los aislados obtenidos de Maringa se obtuvieron a partir de lesiones, mientras que sólo el 18,4% de los aislamientos de Natal se infecta (Tablas 3 y 4) los atributos .Tabla 4 de virulencia de Candida albicans aislados obtenidos de la cavidad oral de los receptores de trasplante de riñón 0.05. [30].
