Resumen Antecedentes
La asociación entre las condiciones periodontales, la colonización oral de la levadura y las proteínas salivales en sujetos con diabetes tipo 2 (DM2 ) aún no está documentado. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar la relación entre estas variables en diabéticos tipo 2 con referencia al género.
Métodos
Cincuenta y ocho sujetos con diabetes tipo 2 (23 varones y 35 mujeres) con nivel de glucosa en sangre al azar ≥ 11,1 mmol /L fueron investigados. condiciones periodontales (índice de placa [PI], sangrado al sondaje [BOP], la profundidad de sondaje [EP] (4 a 6 mm y ≥ 6 mm), levaduras orales, salivar inmunoglobulina (Ig) A, IgG y las concentraciones de proteína total, y se determinó el número de dientes presentes
: resultados de la condiciones periodontales (PI [p Hotel & lt; 0,00001]., BOP [p Hotel & lt; 0,01] y PD de 4 a 6 mm [p
& lt; 0,001], salivar IgG (g) /mg de proteína (p Hotel & lt; 0,001) y la concentración de proteínas totales de la saliva (p Hotel & lt; 0,05) fueron mayores en el tipo 2 mujeres diabéticas con Candida albicans gratis ( . C. albicans
) de colonización en comparación con los varones del mismo grupo de Tipo 2 mujeres diabéticas con C. albicans
colonización tenían más dientes en comparación con los hombres del mismo grupo (p
. & lt; 0,0001)
Conclusión
parámetros clínicos y salivales de la inflamación periodontal (BOP e IgG (g) /mg de proteína) fueron mayores en mujeres diabéticas tipo 2 con C. albicans orales
la colonización en comparación con los hombres en el mismo grupo. Se necesitan más estudios para evaluar la asociación del género con estas variables en los sujetos con diabetes tipo 2
material complementario Electrónico
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Antecedentes
Hay una relación positiva entre la inflamación periodontal y la diabetes tipo 2 (DM2) [1]. inflamación periodontal se ha demostrado que es mayor en los individuos diabéticos con nivel de glucosa en sangre al azar (RBGL) ≥ 11,1 mmol /L en comparación con los individuos con RBGL & lt; 11,1 mmol /L [1]. Sin embargo, se ha demostrado que no hay diferencia en el estado periodontal entre los sujetos diabéticos con RBGL) ≥ 11,1 mmol /L y los individuos no diabéticos [1]. Candida albicans orales
(C. albicans
) la colonización se incrementa notablemente en comparación con los individuos diabéticos y no diabéticos hiperglucemia parece jugar un papel importante en este respecto [2, 3]. La diabetes es una enfermedad metabólica caracterizada por hiperglucemia debido a defectos en la producción de insulina, acción de la insulina, o ambos. La diabetes mellitus puede deteriorar la función de los leucocitos polimorfonucleares que puede predisponer a los pacientes diabéticos a un mayor riesgo de enfermedades, incluyendo la enfermedad periodontal e infecciones de candidiasis oral [2]. Hay un papel indistinto de levaduras orales en la etiología y la patogénesis de la inflamación periodontal, sin embargo; C. albicans
ha sido aislado de las cavidades orales de las personas con la inflamación periodontal severa [4]. Se ha informado de que la Candida oral de
colonización es significativamente mayor en mujeres que en hombres; sin embargo, esta relación sigue siendo discutible [5, 6]. Estudios recientes han demostrado que C. albicans
puede colonizar las bolsas periodontales y se asocia significativamente con la inflamación de la mucosa oral en las mujeres [4, 7].
saliva desempeña un papel importante en el mantenimiento de un ambiente oral sana. Aproximadamente el 95% de la salival de inmunoglobulina (Ig) A origina a partir de los inmunocitos de la glándula salival, mientras que, la mayoría IgG entra en la cavidad oral mediante difusión a través de las grietas gingivales [8]. La concentración de IgG en la saliva es normalmente baja, aproximadamente 20 mg /L; sin embargo, es significativamente mayor en los sujetos con la inflamación periodontal [9, 10]. Por lo tanto, se espera una concentración de IgG en relieve en la saliva para reflejar la inflamación periodontal [10, 11]. Los niveles elevados de IgA salival y la IgG se han reportado en las personas con diabetes tipo 2 [12].
Dado que existe una asociación entre la inflamación periodontal claro, la colonización oral de la levadura, diabetes tipo 2 y el género, el presente estudio tuvo como objetivo investigar las condiciones periodontales, oral levaduras colonización y proteínas salivales perfil en sujetos con diabetes tipo 2 con énfasis en el género.
Métodos Francia el estudio fue aprobado por el comité de revisión ética regional en Estocolmo, Suecia y el comité de ética de Altamash Instituto de Medicina Dental, Karachi, Pakistán. Se proporcionó información por escrito (consentimiento informado), impreso en Inglés sencillo y urdu (idioma nativo de Pakistán). individuos que consienten fueron invitados a un centro de cuidado de la salud oral durante un examen periodontal, colección de levaduras oral y las muestras no toda la saliva (UWS) y la medición de RBGL.
criterios de inclusión y exclusión
La residentes de la colonia de Punjab, Karachi, Pakistán con edades comprendidas entre los 45 y 64 años fueron incluidos en el estudio [1, 13]. Se incluyeron los individuos con diagnóstico médico de diabetes tipo 2 y con un RBGL ≥ 11,1 mmol /L. Era obligatorio que los participantes han leído /entendido y firmado el formulario de consentimiento antes de ser incluidos en el estudio.
"Los fumadores" se definen como individuos que fumaban al menos un cigarrillo al día durante al menos seis meses. Dado que el tabaquismo y el uso de antibióticos, no esteroideos fármacos antiinflamatorios no esteroides y la influencia inflamación, así como la colonización por Candida oral, los individuos que admitieron estos comportamientos fueron excluidos del estudio [2, 14, 15].
Estudio de población
Una encuesta se llevó a cabo en la colonia Punjab, en el que un millar de personas fueron entrevistados [1, 13]. Se pidió a los sujetos que informaron tener diabetes para presentar sus registros y /o prescripciones médicas, que confirmó su condición de diabetes. Entre los 1.000 adultos entrevistados, 83 sujetos informaron tener diabetes, de los cuales 79 sujetos habían diagnosticado médicamente DT2. Estos 79 individuos fueron invitados a un centro de cuidado de la salud oral para la medición de RBGL, la recogida de muestras de saliva y levadura orales y evaluación del estado periodontal.
Cincuenta y ocho personas que consienten (23 varones y 35 mujeres) cumplieron los criterios de inclusión y fueron admitidos para el estudio. No hubo diferencias significativas en la edad, raza, etnia, niveles socioeconómicos y los niveles de vida entre la población de estudio.
Medición de sangre al azar los niveles de glucosa
Los individuos recibieron instrucciones de no comer ni beber por lo menos dos horas antes de su RBGL era grabado. Un glucómetro (Accu Chek, sistema Advantage /tiras de confort Sensor, Roche Diagnostics, Mannheim, Alemania) se utilizó para grabar el RBGL que es un método práctico para controlar los niveles de glucemia en personas con diabetes diagnosticada previamente [16-19].
recogida de muestras orales por hongos
Los participantes fueron instruidos para que se abstengan de comer y beber al menos dos horas antes de la recogida de las muestras de levadura. El muestreo se lleva a cabo entre las 10:00 de am y 1:00 pm.
Cada muestra de levadura se recogió por raspado del dorso de la lengua con un hisopo estéril de algodón (COPAN, Amies de carbón solo hisopo, CE 0124, Italia). Los hisopos se devolvieron al tubo de contención inmediatamente después del muestreo. levaduras orales son pre-dominante sobre la superficie dorsal de la lengua; Por lo tanto, raspado superficie de la lengua es un método fiable para detectar Candida
especies [15].
Identificación de las muestras de levadura orales
identificación a nivel de especie se determinó mediante un sistema de identificación de levaduras (API 32-C Sistema de identificación de levaduras Biomeriux programa, Lyon, Francia). Si la identificación no era posible con el sistema API 32, el aislado de la levadura fue sometido a la identificación molecular.
Para el aislamiento de ADN, se suspendieron las células de levadura en 200 l de la polimerasa estéril Chain Reaction (PCR) de agua -Grado y el ADN genómico se preparó usando MagNA puro (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Alemania) de un robot de preparación de DNA [20]. Para la secuenciación de ADN y análisis de PCR, una región (aproximadamente 500 pb) del gen 18S ácido ribonucleico ribosomal se amplificó por PCR usando cebadores universales y DNA AmpliTaq Gold polymarase. Los cebadores y los nucleótidos libres de los productos de PCR fueron retirados a continuación, utilizando el kit de purificación QIAquick PCR (250) (Qiagen, GmbH, Hilden, Alemania). Los productos de PCR purificados fueron procesadas para la secuenciación del ADN por BigDye Terminator Ciclo de Secuenciación usando tecnología de electroforesis capilar en ABI 310 Genetic Analyzer (Applied Biosystems, Foster City, CA). Ambas hebras de fragmentos de ADN amplificados por PCR se secuenciaron para evitar el error de secuenciación [21]. La secuencia de ADN se analizó mediante un software y buscó en la base de datos explosiva ADN para la identificación y tipificación de levadura [22, 23]. COLECCIÓN de muestras de saliva sin estimular enteros
se obtuvieron las muestras inmediatamente después de UWS colección de levaduras orales. Para recoger las muestras de UWS, los participantes se sentaron en una posición inclinada hacia adelante en una silla cómoda y instruidos para escupir durante cinco minutos continuos (sin tragar) en un embudo de plástico limpia conectado a un cilindro de medición [24, 25]. El volumen de saliva se midió inmediatamente y las muestras se congelaron en tubos de plástico desechables de 3,5 ml con tapa (Sarstedt, Lot: 4.071.801, Alemania). Todas las muestras congeladas fueron sellados en una caja aislada que contiene hielo seco y se transfirieron al Hospital de la Universidad Karolinska (División de Inmunología Clínica) Huddinge, Suecia.
Determinación de la saliva de IgG, IgA y las concentraciones de proteína total
Los niveles de la saliva de IgG, IgA y la concentración de proteína total se determinó como se describe anteriormente [11]. En resumen, placas de microtitulación (Corning Inc. NY, EE.UU.) se recubrieron con 100 l por pocillo de IgG anti-humana y anti-IgA humana (DAKO A /S, Dinamarca) en tampón de recubrimiento (tampón carbonato-bicarbonato M 0,05, pH 9,6) y se incubaron a temperatura ambiente durante 24 horas. Después del lavado, 100 l /pocillo de diluido apropiadamente control negativo IgG (Human calibrador de proteína de suero. DAKO A /S, Dinamarca) normas e IgA (calostro humano), control positivo (saliva de un sujeto sano), (saliva de adultos deficientes en IgA sujetos) y saliva muestras se añadieron a los respectivos pocillos de la microplaca. Después de la incubación a temperatura ambiente, las microplacas se lavaron para eliminar las proteínas no unidas. fosfatasa alcalina purificada conjugado IgG anti-humana y IgA (DAKO A /S IgA /AP, Dinamarca) se añadieron (100 l /pocillo), y las microplacas se incubaron durante tres horas a temperatura ambiente. Después del lavado, /pocillo de sustrato (p-nitrofenil fosfato
) en 1,0 M dietanolamina, MgCl 0,5 mM, se añadieron 100 l
2, pH 9,8 (Sigma S-0942). La absorbancia se leyó a 405 nm en un fotómetro de placas de microtitulación (Molecular Devices, Vmax, Sunnyvale, CA, EE.UU.). México La bicinconınico ácido, (BCA ™) Protein Assay Reagent Kit (Producto Nº 23227, Pierce Chemical, Co ., Rockford, IL, EE.UU.), se utilizó para determinar la concentración total de proteína en los sobrenadantes de saliva. El uso de albúmina como estándar, alícuotas de saliva (200 l /pocillo) se colocaron en placas de microtitulación. Se añadió el reactivo de ensayo de proteína, y las placas se incubaron a 37 ° C durante 30 minutos. Las densidades ópticas se leyeron a 550 nm en un fotómetro de placas de microtitulación (Molecular Devices, Vmax, Sunnyvale, CA, EE.UU.).
examen periodontal, número de dientes y dentaduras postizas resistente
Un índice de placa boca llena (PI), sangrado al sondaje (BOP) y la profundidad de sondaje (PD) (4 a 6 mm y ≥ 6 mm) se midieron en cuatro sitios (mesial, distal, bucal y palatal /lingual) de cada diente [1, 26-28]. Los individuos fueron investigados por el número de dientes presentes (con exclusión de terceros molares maxilares y mandibulares) y el uso de prótesis dentales. Los dientes con restos de raíces incrustadas solamente fueron consideradas como desaparecidas. Un porcentaje de los números de dientes presentes también se calculó mediante la siguiente fórmula: El análisis estadístico Francia El análisis estadístico se realizó utilizando STATISTICA v 6.0, (Statsoft, Inc. 1984-2005, Tulsa, OK, EE.UU.).. La significación de las diferencias de las variables dependientes (niveles de Ig, la concentración de proteínas, Candida oral,
colonización, número de dientes y condiciones periodontales) en diabéticos tipo 2 individuos se determinó mediante regresión logística múltiple. Las variables independientes fueron categorizados como variables dicotómicas; por ejemplo, de tipo 2 machos diabéticos con C. albicans
la colonización; 0 y el tipo 2 mujeres diabéticas con C. albicans
la colonización; 1. Para comparaciones múltiples, se realizó post hoc de Bonferroni
prueba.
Resultados
Población de estudio
De los 58 participantes, hubo 29 sujetos (17 varones y 12 mujeres) con C. albicans
colonización. En este grupo, la edad media de los hombres y mujeres era de 50,5 años (rango 45-64 años) y 49,3 años (rango 45-59 años), respectivamente. En los sujetos sin C. albicans
colonización (n = 29), había seis hombres y 23 mujeres. La edad media de los hombres y mujeres en este grupo fueron de 50,6 años (rango 45-56 años) y 51,1 años (rango 47-59 años) de manera correspondiente. México La duración de diabetes tipo 2 en individuos con y sin C. albicans
la colonización fueron 10,5 (rango 8-14 años) y 10,8 años (rango 8-12 años) correspondientemente.
la colonización de levadura oral en sujetos con DM2
orales C. albicans
colonización fue significativamente mayor en los diabéticos tipo 2 machos comparación con las mujeres como se muestra en la Figura 1 (p
& lt; 0,01). Figura 1 colonización oral por Candida (C.) en relación con el género entre los sujetos con diabetes tipo 2. † P Hotel & lt; 0.01. Otros (machos): C. lusitaniae
Otros (hembras): C. kefyr
. † Las diferencias en la orales Candida albicans (C. albicans
) entre la colonización de tipo 2 machos y hembras diabéticas fueron analizadas mediante regresión logística múltiple. Para comparaciones múltiples, se realizó post hoc de Bonferroni
prueba. Prevalencia de prótesis resistente
En diabéticos tipo 2 con C. albicans
la colonización, la dentadura al desgaste fue más frecuente en varones (47% ) en comparación con las mujeres (16,6%). No hubo diferencia en 2 sujetos diabéticos dentadura postiza que llevaba en el tipo y sin C. albicans
colonización (datos no mostrados).
Tasa de flujo salival (SFR), salivar IgG (g) /mg de proteína, IgA (g) /mg de proteína y la concentración de proteínas totales en relación con la colonización de C. albicans, número de dientes y
de género Tipo 2 mujeres diabéticas tenían un SFR menor (media de 0,15 ml /min; intervalo de 0,1-0,3 ml /min) que en hombres con T2D (media de 0,38 ml /min; intervalo de 0,2 hasta 0,5 ml /min) (p
& lt; 0,05).
hembras con C. albicans
colonización tenía niveles más altos de IgG (g) /mg de proteína ( p Hotel & lt; 0,001) y la concentración de proteína total (p Hotel & lt; 0,05) en comparación con los hombres con C. albicans
. Estos resultados se muestran en la Figura 2 y la Figura 3. Las hembras también tenían más dientes (número de teeth19.5 significar; rango de 13 a 21 dientes) en comparación con los machos (número de dientes 12 media, rango 10 a 16 dientes) (p Hotel & lt; 0,0001). Figura 2 salival IgG (g) /mg de proteína e IgA (g) /mg concentraciones de proteína en diabéticos tipo 2 con y sin C. albicans oral de la colonización en relación con el género. # P Hotel & lt; 0,001 indica una mayor concentración de IgG salivar (g) /concentración de proteína en mg tipo 2 mujeres diabéticas en comparación con los hombres con diabetes tipo 2 y C. albicans orales
colonización. Las diferencias en los niveles de IgG salivar (g) /mg de proteína e IgA (g) /mg de proteína en el tipo 2 diabéticos machos y hembras con y sin orales Candida albicans
colonización (C. albicans
) se sometieron a pruebas logística múltiple regresión. Los datos son la media ± 2 desviaciones estándar.
Figura 3 salivales concentraciones de proteína total en diabéticos tipo 2 con y sin C. albicans oral de la colonización en relación con el género. * P Hotel & lt; 0.05. Las diferencias en las concentraciones de proteínas totales de la saliva en los varones diabéticos tipo 2 y las hembras con y sin Candida albicans orales
colonización (C. albicans
) se sometieron a pruebas de regresión logística múltiple. Los datos son la media ± 2 desviaciones estándar. Estar entre los hombres diabéticos tipo 2 y hembras sin C. albicans
la colonización, la saliva de IgG (g) /mg niveles de proteína fueron 32,2 g /mg (rango de 7 a 107,7 g /mg) y 38,6 mcg /mg (rango de 2,8 a 79,3 mg /mg) correspondiente. En estos sujetos, con una media de IgA salival (g) /mg niveles de proteína fueron 364,9 mcg /mg (rango de 155-1489 mg /mg) y 391,8 g /mg (rango de 90 a 1863 mg /mg). Salivales concentraciones de proteína total, en estos individuos, fueron 2181 mg /L (rango de 879,5 a 3812,3 mg /l) y 2569,4 mg /L (rango de 1.914,8 a 3.107,7 mg /L), respectivamente.
Media del número de dientes en diabéticos tipo 2 machos y hembras sin C. albicans
colonización eran 12,1 (intervalo 9-15) y 15,6 dientes (intervalo 9-16) respectivamente.
condiciones periodontales y número de dientes en relación con C. albicans
colonización y
género de tipo 2 mujeres diabéticas con C. albicans
colonización tuvieron mayor PI (p Hotel & lt; 0,00001), BOP (p Hotel & lt; 0,01) y PD (4 a 6 mm) (p
& lt; 0,001) en comparación con los hombres en el mismo grupo. Estas mujeres tenían más dientes (número de dientes 19,5 decir, rango 16 a 26) en comparación con el tipo 2 machos diabéticos con C. albicans
colonización (media de número de dientes 12; rango 10 a 16) (p Hotel & lt; 0,0001). Estos resultados se muestran en la Figura 4. Figura 4 condiciones periodontal en diabéticos tipo 2 con y sin Candida albicans orales (C. albicans) la colonización con respecto al género. Los datos son la media ± 2 desviaciones estándar. * P Hotel & lt; # P 0,00001 Hotel & lt; • 0,01 p Hotel & lt; 0.001. §p Hotel & lt; 0,0001. PI: índice de placa (%). BOP: El sangrado al sondaje (%). PD: profundidad de sondaje (%). Las diferencias entre PI, BOP, PD (4 a 6 mm y ≥ 6 mm) entre los varones diabéticos tipo 2 (n = 17) y mujeres (n = 12) con albicans gratis (C. albicans
) la colonización de Candida eran probado mediante regresión logística múltiple. Los datos son la media ± 2 desviaciones estándar.
Discusión Entre los individuos no diabéticos, C. albicans
la colonización se ha notificado a ser mayor en las mujeres dentados comparación con los hombres [6]. El presente estudio demostró que los parámetros clínicos y salivales de la inflamación periodontal (BOP e IgG por miligramo de la concentración total de proteínas salivales [IgG (g) /mg de proteína]) son elevados en mujeres diabéticas tipo 2 con C. albicans orales
la colonización en comparación con los hombres en el mismo grupo.
se sabe que los individuos diabéticos tienen un SFR reducido en comparación con los controles no diabéticos y es independiente de los niveles de glucemia [29, 30]. En el presente estudio, machos y hembras tenían niveles similares de glucosa plasmática ocasional; sin embargo, el SFR era casi el doble que en los hombres en comparación con las hembras. Una explicación que se ha dado en este contexto es que el tamaño de las glándulas salivales es menor en las mujeres en comparación con los hombres [31]. Una concentración de IgG salivar se ha reportado elevación en pacientes con diabetes tipo 2 [12]. Es de destacar que una disminución de la SFR concentra las proteínas salivales, expresando de este modo las concentraciones elevadas de proteínas salivales incluyendo IgA y IgG. Por lo tanto, las concentraciones salivales de IgA e IgG deben expresarse como IgA (g) /mg de proteína e IgG (g) /mg de proteína, para normalizar en función del volumen. Un mayor nivel de IgG salivar (g) /concentración de proteínas mg refleja una inflamación bucal planteado [11]. La intensidad de la inflamación periodontal se ha asociado con el número de dientes afectados [32]. Esto refleja que un mayor número de dientes con tejidos periodontales inflamados permite una extensa fuga de IgG en la cavidad oral a través de las grietas gingivales. En sujetos con C. albicans
la colonización, los niveles de IgG (g) /mg de proteína eran casi dos veces mayor en las mujeres en comparación con los varones. Sin embargo hay que destacar que estas mujeres tenían casi el doble de los dientes como los hombres en el mismo grupo. Por lo tanto, entre los diabéticos tipo 2 con C. albicans
la colonización, la presencia de más dientes parece ser la explicación más probable para la mayor IgG (g) /mg de proteína niveles en las mujeres en comparación con los varones.
Otros factores que pueden influir en la colonización por candida oral incluyen prótesis de alta resistencia, la xerostomía y la edad [33-35]. En el presente estudio, casi el 74% de los machos estaban albergando C. albicans orales
comparación con el 23% en las mujeres. Esto está de acuerdo con otro estudio en el que C. albicans
la colonización fue dominante en los hombres (83%) en comparación con las mujeres (56%) [36]. Se ha mostrado que Candida oral de
colonización puede aumentar hasta seis veces en la dentadura-portadores [37]. Los resultados actuales muestran que en los sujetos con C. albicans
la colonización, que llevaba dentadura fue más frecuente en los hombres (47%) en comparación con las mujeres (16,6%). Una explicación en este contexto puede ser que las dentaduras (ya sean parciales o completos) obstruyen el flujo de saliva de las glándulas salivales menores y el libre intercambio de oxígeno. Así, el bajo nivel de pH resultante facilita el crecimiento de C. albicans
[37]. En el presente estudio, los sujetos con C. albicans
la colonización, los hombres tenían un SFR mayor en comparación con las mujeres. Sin embargo, estos caudales fueron inferiores a la SFR en individuos no diabéticos (0,5 ml /min) [38]. Se sabe que existe una relación inversa entre SFR y la colonización por Candida oral. Sin embargo; a pesar de tener un SFR mayor en comparación con las hembras, los machos habían aumentado C. albicans
la colonización en comparación con las hembras. Esto puede ser una vez más asociado con la dentadura al desgaste que era aproximadamente tres veces más común en los hombres diabéticos tipo 2 (47%) en comparación con las mujeres (16,6%) con DT2.
Existe una relación positiva entre C. albicans
colonización y la edad [35]. Sin embargo; en la edad estudio actual no puede ser el efecto de las diferencias en C. albicans
colonización, ya que se ajustó en ambos grupos.
Los presentes resultados mostraron un PI superior, BOP y PD (4-6 mm) en las mujeres con C. albicans
la colonización en comparación con los varones. Sin embargo, es notable que estas mujeres tenían un menor SFR y tenía aproximadamente el doble de los dientes como los machos. Por lo tanto, un mayor número de dientes y la reducción de SFR posiblemente pueden estar asociados con un aumento de las condiciones periodontales y salival IgG (g) /mg de proteína y la concentración de proteína total en estas hembras en comparación con machos.
Conclusión
parámetros clínicos y salivales de inflamación periodontal (BOP e IgG (g) /mg de proteína) fueron mayores en mujeres diabéticas tipo 2 con C. albicans orales
la colonización en comparación con los hombres en el mismo grupo. Estas características específicas de género pueden ofrecer una vía para mejorar la salud bucal para las mujeres con diabetes tipo 2. Sin embargo, necesitan más estudios en este sentido.
Declaraciones
Agradecimientos
Los autores desean dar las gracias a María Guglielmeti (Departamento de Medicina de Laboratorio de la División de Microbiología Clínica, Hospital de la Universidad Karolinska en Huddinge, Estocolmo, Suecia) para su cooperación en las investigaciones micológicas. Los autores también desean agradecer la colaboración de higienista dental Sohail Hussain y Mohammad Noman (Instituto de Medicina Dental Altamash, Karachi, Pakistán) durante todo el proyecto. Archivos originales presentados
de los autores de las imágenes
A continuación se presentan los enlaces a original de los autores presentó archivos de imágenes. 'archivo original para la figura 1 12903_2008_121_MOESM2_ESM.pdf autores 12903_2008_121_MOESM1_ESM.pdf Autores archivo original de la figura 2 12903_2008_121_MOESM3_ESM.pdf autores archivo original de la figura 3 12903_2008_121_MOESM4_ESM.pdf autores archivo original de la figura 4 Conflicto de intereses
Los autores declaran que no tienen intereses en conflicto.
autores
FJ realizado los exámenes clínicos y salivales, lleva a cabo el análisis estadístico, evalúa los resultados y escribió el manuscrito. LK lleva a cabo las investigaciones micológicas y contribuyó en la escritura manuscrita y la revisión. Estados Unidos contribuyó a las investigaciones salivales, la escritura manuscrita y de revisión. MA ayudó en la evaluación periodontal clínico de los sujetos de estudio. BK contribuyó a manuscrito escrito, así como la revisión. PE-E supervisó este proyecto y contribuyó a las investigaciones salivales, evaluación de resultados, la escritura manuscrita y la revisión. Todos los autores leído y aprobado el manuscrito final.
